Presentación Reservorios
- 1. INFECCIÓN CON LEISHMANIA SPP. EN RESERVORIOS SILVESTRES CAPTURADOS EN 3 COMUNIDADES ENDÉMICAS PARA LEISHMANIASIS CUTÁNEA DE LA PROVINCIA DE PANAMA OESTE Kadir González Departamento de Investigación en Parasitología ICGES
- 2. EPIDEMIOLOGÍA LEISHMANIASIS Enfermedad endémica en 88 países
- 3. DISTRIBUCIÓN DE CASOS DE LEISHMANIASIS EN PANAMÁ POR PROVINCIA AÑOS 2000-2010 PROVINCIA POSITIVOS % PANAMÁ ESTE 1223 PANAMA METRO 1087 PANAMA OESTE 5148 SAN MIGUELITO 587 4.71 % 4.19 % 19.83 % 2.26 % COLÓN 2871 11.06 % COCLÉ 4471 17.22 % VERAGUAS 912 3.51 % DARIÉN 983 3.79 % BOCAS DEL TORO 7147 27.53 % CHIRIQUÍ 525 2.02 % C. GUNA YALA 73 0.28 % C. NGOBÉ BUGLÉ HERRERA LOS SANTOS 744 27 161 2.87 % 0.10 % 0.62 % TOTAL 25 959 100 % ESTADISTICAS DEL DEPARTAMENTO DE EPIDEMIOLOGIA MINSA 2000-2010
- 5. Morfología de Leishmania Forma promastigote Forma amastigote
- 6. Vectores • Género Lutzomya • “chitra” • 76 en Panamá Lu. panamensis Lu. trapidoi Lu. ylephiletor Lu. gomezi Lu. sanguinaria Lu. olmeca Lu. shannoni
- 7. RESERVORIOS Rata espinoza Mono tití Zarigueya Perezoso Mono Nocturno
- 9. JUSTIFICACIÓN • Demostrar la infección de mamíferos reservorios de Leishmania spp. es necesario para entender la epidemiología de la LC en áreas endémicas y el establecimiento de medidas de vigilancia y control apropiadas.
- 10. OBJETIVO • Determinar la infección de Leishmania spp. en mamíferos silvestres procedentes de las áreas endémicas de Trinidad de Las Minas, Las Pavas y Lídice.
- 11. METODOLOGÍA
- 12. TRINIDAD DE LAS MINAS LAS PAVAS LÍDICE AREA DE ESTUDIO Ciudad de Panamá OCEÁNO PACÍFICO
- 13. LAS PAVAS LAS PAVAS
- 14. TRINIDAD DE LAS MINAS TRINIDAD DE LAS MINAS
- 15. LÍDICE
- 16. AREA DE ESTUDIO • Panamá Oeste, Distrito de Capira (Lídice, Trinidad de Las Minas) y La Chorrera (Las Pavas). • Son áreas endémicas con una alta transmisión de LC en Panamá. • 5661 casos nuevos de Leishmaniasis reportados en las estadísticas del año 2000 al 2012 del MINSA. • En Trinidad de las Minas se reportaron 76 casos de Leishmaniasis según estadísticas del 2010- 2012.
- 17. CAPTURA DE MAMIFEROS • Colectas sistemáticas de mamíferos con trampas sherman y tomahawk por siete noches seguidas. • El estudio fue aprobado por el Comité Institucional para el uso y cuidado de animales de laboratorio (CIUCAL-ICGES).
- 18. MAPA DE LOCALIZACION DE TRAMPAS 4 Transeptos 8 Trampas por Transepto 15 mts 120 mts
- 19. Los mamíferos fueron capturados, procesados y liberados. Cumpliendo con el protocolo establecido.
- 21. TOMA DE MUESTRA/ANALISIS • Muestras de sangre 1. EDTA (pruebas moleculares) • PCR subgénero Viannia (amplifica la región del cinetoplástido) • Hsp-70 (Heat shock protein 70) • PCR-RFLP basado en el gen HSP-70 (Montalvo et al., 2010). 2. Sin anticoagulante (serología y cultivo)
- 22. RESULTADOS
- 23. RESULTADOS • Se evaluaron 208 mamíferos: • 66 perezosos • 98 roedores • 42 marsupiales • 1 armadillo • 1 puerco espino.
- 24. Orden Didelphimorphia Philander opossum Marmosa robinsoni Metachirus nudicaudata Didelphis marsupialis
- 25. ORDEN PILOSA Bradipus variegatus Choloepus hoffmani
- 26. ORDEN RODENTIA Proechimys semispinosus Zygodontomys brevicauda
- 27. Mamíferos Colectados por Comunidad COMUNIDAD MAMÍFEROS COLECTADOS Las Pavas Trinidad de Las Minas Lídice Total Perezosos 25 23 18 66 Roedores 14 84 0 98 Marsupiales 3 39 0 42 Puerco Espino 0 1 0 1 Armadillo 1 0 0 1 Total 43 147 18 208
- 28. PCR Subgenero Viannia (Lv-B1) HSP-70 (Heat Shock Protein 70) Amplifica región 750pb del minicírculo L. Viannia especies2 2Bhattacharyya R. 1996 Target: Heat-shok protein 70 genes: 1422 pb Garcia L. 2004/Montalvo A. 2009
- 29. RESULTADOS ADN de Leishmania Viannia spp. fue detectado en: • 54% (36/66) de los perezosos • 3.1% (3/98) de los roedores • 2.4% (1/42) de los marsupiales
- 30. Mamíferos PCR Viannia Positivos por comunidad MAMÍFEROS COLECTADOS PCR POSITIVOS POR COMUNIDAD Las Pavas Trinidad de las Minas Lídice Total (%) Bradipus variegatus 4/11 (36%) 2/3 (67%) 0/1 (0%) 6/15 (40%) Choloepus hoffmani 5/14 (36%) 11/20 (55%) 14/17 (82%) 30/51 (58%) Proechimys semispinosus 0/13 (0%) 3/84 (3.6%) --- 3/97 (3%) Zygodontomys 0/1 (0%) --- --- 0/1 (0%) brevicauda Didelphis marsupialis 0/3 (0%) 1/29 (3.4%) --- 1/32 (3%) Metachirus nudicaudatus --- 0/6 (0%) --- 0/6 (0%) Philander opossum --- 0/3 (0%) --- 0/3 (0%) Marmosa robinsoni --- 0/1 (0%) --- 0/1 (0%) Dasypus novemcinctus 0/1 (0%) --- --- 0/1 (0%) Sphiggurus mexicanus --- 0/1 (0%) --- 0/1 (0%)
- 31. PCR-Hsp-70/RFLP Hae III MM 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1. L. p 2. T. rangeli 3. L.p/T.c 4. L.p/T.r 5. P-03 s 6. Pt-17 s 7. Pt-22 c 8. Pl-06 s 9. Pl-10 s 10. CN ?
- 32. PCR-Hsp-70/RFLP BccI MM 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 MM La presencia de infecciones con otros tripanosomátidos pudo haber interferido con la interpretación de los resultados. 1. L. p 2. Rt-47 3. Rt-75 4. Pl-04 5. Pl-17 6. Pt-01 7. Pt-03 8. Pt-04 9. Pt-08 10. Pt-09 11. Pl-05 12. Pl-18 13. CN ? ?
- 33. CONCLUSIONES • Los resultados moleculares corroboran que los perezosos son el principal reservorios de Leishmania Viannia spp. en Panamá (Chirstensen et al). Choloepus hoffmani. • En Trinidad de las Minas se observó una mayor biodiversidad de mamíferos positivos a Leishmania spp. que en las comunidades de Las Pavas y Lídice.
- 37. GRACIAS