Secuenciacion
Descargar como PPTX, PDF2 recomendaciones4,934 vistas
La secuenciación determina la secuencia de nucleótidos de una molécula de ADN o ARN. Existen dos métodos principales: el método de Sanger basado en la terminación de cadena y los métodos automáticos de secuenciación. La secuenciación es fundamental para comprender la función de genes y proteínas y tiene aplicaciones en la producción de sustancias terapéuticas, el diagnóstico de enfermedades hereditarias y la identificación de genes humanos específicos.
Secuenciacion
- 1. INTEGRANTES Karen Ramos Díaz Orlando Vargas
- 2. ¿Qué es secuenciación? Secuenciación enzimática Método Sanger Secuenciación automática Reactivos y aparatos en la secuenciación
- 3. •¿Que es la secuenciación? •Significado •La determinación de la secuencia de nucleótidos de una molécula especifica. •Es fundamental para hacer predicciones sobre su función. Facilitando su manipulación. •Existen dos métodos:
- 4. •TERMINACIÓN DE CADENA •Diseñado por Sanger, 1980 •Fundamento Replicación del ADN Complementariedad de bases Síntesis de una nueva hebra de ADN, inicia en el sitio de un primer y finaliza con la incorporación de un nucleótido terminador.
- 5. SE NECESITAN LOS SIGUIENTES COMPUESTOS: El ADN molde o segmento de ADN que se desea secuenciar Una enzima que replique el ADN, normalmente la ADN Polimerasa Un cebador o "primer“ Los cuatro nucleótidos trifosfato (dATP, dCTP, dGTP y dTTP) Por último, se necesitan nucleótidos didesoxi (ddATP, ddTTP, ddCTP y ddGTP)
- 6. 1° Paso 2°Paso 3° 4° Paso Paso
- 7. 5° Paso 6° Paso 7° Paso 8° Paso
- 9. Secuenciación: Separación de fragmentos Los productos de las 4 reacciones, cada una conteniendo una pequeña cantidad de uno de los cuatro didesoxinucleótidos, son cargadas en el gel y sometidas a electroforesis Como la polimerización es solo en dirección 5’ a 3’, los fragmentos mas cortos estarán en 5’ y los más largos que se encontrarán en la dirección 3’ Autorradiografia resultante
- 11. - La principal diferencia entre método enzimático de terminación de cadena y el método automático de secuenciación radica, en primer lugar en el tipo de marcaje. - La segunda diferencia radica en el sistema de detección de los fragmentos de ADN.
- 12. Secuencia obtenida por el método automático de secuenciación.
- 13. UTILIDAD E IMPORTANCIA EN LA MEDICINA 1) LA PRODUCCIÓN DE SUSTANCIAS CON EFECTOS TERAPÉUTICOS. Somatostatina (SS) que, segregada por el hipotálamo, inhibe la síntesis de somatotropina (GH) u hormona del crecimiento. Insulina que, segregada por el páncreas, regula la concentración de glucosa en sangre. Somatotropina (GH) que, segregada por la adenohipófisis controla y regula el normal crecimiento (evitando enanismo). Interferones, que son proteínas elaboradas por células animales en respuesta a una infección vírica. Factor VIII antihemofílico (AHF), es una globulina que estimula a las plaquetas (para la coagulación sanguínea). Renina, es una enzima que cuaja la leche, necesaria para la elaboración de quesos (o para algunos fármacos).
- 14. UTILIDAD 2. El diagnóstico de enfermedades hereditarias. 3. La identificación de genes humanos específicos. 4. La terapia génica.