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APOSTILA DE HEMATOLOGIA CLÍNICA
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Introdução
Hematologia é o ramo da biologia que estuda o sangue. A palavra é composta
pelos radicais gregos: Haima (de haimatos), "sangue" e lógos, "estudo, tratado,
discurso".
A Hematologia estuda, particularmente, os elementos figurados do sangue:
hemácias (glóbulos vermelhos), leucócitos (glóbulos brancos) e plaquetas. Estuda,
também, a produção desses elementos e os órgãos onde eles são produzidos
(órgãos hematopoiéticos): medula óssea, baço e linfonodos.
Por outro lado, além de estudar o estado de normalidade dos elementos
sangüíneos e dos órgãos hematopoíéticos, estuda também as doenças a eles
relacionadas.
HEMATOPOIESE é o processo de substituição das células sanguíneas, que
ocorrem nos chamados órgão hematopoiéticos, que compreendem a medula
óssea e o sistema linfóide.
MEDULA ÓSSEA é o mais importante orgão da gênese das mais diversas células
sanguíneas pois lá estão as células tronco que dão origem a células progenitoras
de linhagens mielocíticas, linfocítica, megacariócitos e eritroblastos.
LINHAGEM MIELÓIDE compreende os granulócitos polimorfonucleados
(neutrófilo,eosinófilo e basófilo) e monócitos.Quando os monócitos migram para os
tecidos se transformam em macrófagos, que são células com alto poder de
fagocitose.
LINHAGEM LINFÓIDE engloba os linfócitos T e B.Os linfócitos B saem maduros
da medula óssea enquanto os linfócitos T precisam migrar para o Timo onde irão
sofrer o processo de maturação.Os linfócitos B ainda se diferenciam em
plasmócitos quando encontram um antígeno num órgão linfóide secundário e
secretam anticorpos nos tecidos.
MEGACARIÓCITO partes de seu citoplasma dão origem às plaquetas,
responsáveis pela coagulação sanguínea.
ERITROPOIESE é o processo de produção de eritrócitos. Em humanos adultos, a
eritropoiese ocorre na medula óssea, mas fetos e em situações especiais como
anemias severas pode ocorrer em outros órgãos, principalmente no fígado e no
baço.
ERITROBLASTO origina as hemácias do sangue, que atuam nas trocas gasosas.

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HEMOGLOBINA
Estrutura
A hemoglobina é um tetrâmero composto de duas de cada dois tipos de cadeias
de globina, a alfa e a beta. Cada uma dessas cadeias contém cerca de 141
aminoácidos. Existem quatro grupos heme por proteína; estes possuem um íon de
ferro no seu centro, que liga a molécula de O2. É uma proteína alostérica, pois a
ligação e a liberação do oxigênio é regulada por mudanças na estrutura
provocadas pela própria ligação do oxigénio ao grupo heme.
Existe três tipos de hemoglobina, devido a variação na cadeia polipeptidica:
Hemoglobina A1, Hemoglobina A2 e Hemoglobina F.
A hemoglobina (Hb) é uma proteína composta de grupamentos heme que compõe
95% da proteína total desta célula. Os benefícios de conter hemoglobina dentro
das células, ao contrário de livre no plasma, incluem: uma meia-vida maior (a Hb
livre no plasma possui uma meia-vida de apenas algumas horas), a capacidade
metabólica dos eritrócitos de manter o ferro ligado à Hb em seu estado funcional e
a habilidade de controlar a afinidade do oxigênio pela Hb, alterando as
concentrações de fosfatos orgânicos (especialmente o 2,3-DPG).
Distribuição do Oxigênio
A distribuição é feita através da interação da hemoglobina com o oxigênio do ar
(que pode ser inspirado ou absorvido, como na respiração cutânea). Devido a isto,
forma-se o complexo oxi-hemoglobina, representado pela notação HbO2.
Chegando às células do organismo, o oxigênio é liberado e o sangue arterial
(vermelho) transforma-se em venoso (vermelho arroxeado). A hemoglobina livre
pode ser reutilizada no transporte do oxigênio. A hemoglobina distribui o oxigênio
para as todas as partes do corpo irrigadas por vasos sanguíneos.
Localização
A hemoglobina pode ser encontrada dispersa no sangue (em grupos animais
simples) ou em várias células especializadas (as hemácias de animais mais
complexos).
O aumento de glóbulos vermelhos no sangue (eritrocitose) geralmente se dá por
uma adaptação fisiológica do organismo em locais de altitude elevada. Uma vez
que o aumento de glóbulos vermelhos favorece o transporte de oxigênio pelo
sangue, seu uso melhora a performance de atletas, principalmente em esportes
que necessitem muita resistência. Quando os atletas realizam treino em locais de
alta altitude, a pequena concentração de oxigênio estimula a produção natural de
EPO (Eritropoietina, hormônio que aumenta o número de GV e da capacidade
muscular)e ao retornar às baixas altitudes, seu corpo está mais preparado e sua
resistência está maior.

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HEMOGRAMA
HEMOGRAMA é um exame realizado que avalia as células sanguíneas de um
paciente. O exame é requerido pelo médico para diagnosticar ou controlar a
evolução de uma doença. Que compreende o eritrograma, leucograma e
plaquetograma.
Coleta de sangue
O sangue do indíviduo é colhido com anticoagulante (EDTA), para se evitar a
coagulação do mesmo. Não há necessidade de colher o sangue com o indivíduo
em jejum.
Processo Manual
Contagens manuais do número de hemácias e leucócitos podem ser feitos em
câmara de Neubauer, após uma diluição prévia do sangue. O método dificilmente
é usado, sendo usado em poucos casos de dúvidas da metodologia automática .

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O esfregaço de sangue é usado para fazer uma diferenciação entre os leucócitos,
isto é, fazer uma contagem do número de neutrófilos, linfócitos, monócitos,
eosinófilos e basófilos. Chegando-se a uma porcentagem de cada célula
encontrada. Usado também para avaliar a série vermelha e as plaquetas. É feito
com uma pequena gota de sangue sendo colocada sobre uma lâmina de vidro,
onde o técnico fará um esfregaço, arrastando a gota de sangue com uma outra
lâmina de vidro, com isso forma-se uma película. O sangue tem que ser
homogenizado antes de se fazer o esfregaço para que as células estejam bem
destribuídas. O esfregaço é corado com Leishman ou Giemsa. E observado em
microscópio com objetiva de aumento de 100X.

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A vantagem de se fazer um hemograma é que algumas células podem ser
contadas erradamente pelos processos automáticos. Alguns aparelhos não
contam células imaturas e podem levar a um erro quanto a um diagnóstico de
leucemia. O esfregaço, porém, deve ser avaliado por pessoal experiente. ff

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Processo automático
Hoje em dia o hemograma é feito em aparelhos. Os aparelhos usam uma pequena
quantidade de sangue. Há dois sensores principais: um detector de luz e um de
impendência elétrica.
As células brancas, ou leucócitos, podem ser contadas baseando-se em seu
tamanho ou através de suas características. Quando a contagem é baseada no
tamanho das células, o aparelho as diferencia por 3 tipos: células pequenas
(linfócitos), células médias (neutrófilos, eosinófilos e basófilos) e células grandes
(monócitos). Esse primeiro tipo de aparelho requer uma contagem manual de
células pois nõa difenrecia as células de tamanho médio, podendo omitir uma
eosinofilia por exemplo. Os que utilizam o método de características da células
são mais precisos.
Em relação a série vermelha, o aparelho mede a quantidade de hemoglobina, o
número de hemácias e o tamanho das hemácias. Realizando cálculos para chegar
ao valor do hematócrito, e os outros índices hematimétricos. As plaquetas também
são contadas por aparelhos.

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HEMATÓCRITO é a percentagem do volume total de sangue correspondente aos
glóbulos vermelhos.
É uma medição calculada a partir do tamanho médio e do número de glóbulos
vermelhos e quase sempre é parte também da contagem sanguínea completa,
como a (quantidade de) hemoglobina. Os valores médios são diferentes segundo
o sexo e variam entre 0,42-0,52 (42%-52%) nos homens e 0,36-0,48 (36%-48%)
nas mulheres. Caso o valor seja inferior à média significa que existe pouca
quantidade de glóbulos vermelhos e se for superior existe uma maior quantidade
de glóbulos vermelhos para o volume de sangue. Esta é uma medida cada vez
mais importante para efeitos clínicos.
HEMOGLOBINA é a proteína que dá a cor aos glóbulos vermelhos (eritrócitos) e
tem a função vital de distribuir o oxigênio pelo organismo.
ERITROGRAMA é o estudo da série vermelha (eritócitos ou hemácias). Ao
microscópio, as hemácias tem coloração acidófila (afinidade pelos corantes ácidos
que dão coloração rósea) e são desprovidos de núcleo. As hemácias apresentam
coloração central mais pálida e coloração um pouco mais escura na periferia. Elas
são bicôncovas e têm aparência de bala soft. Em indivíduos normais, possui
tamanho mais ou menos uniforme. Quando uma hemácia tem tamanho normal ela
é chamada de normocítica. Quando ela apresenta coloração normal é chamada de
normocrômica.
O estudo da série vermelha revela algumas alterações relacionadas como por
exemplo anemia, eritrocitose (aumento do número de hemácias).
Os resultados a serem avaliados são:
Número de glóbulos vermelhos: Os valores normais variam de acordo com o sexo
e com a idade. Valores normais: Homem de 5.000.000 - 5.500.000, Mulher de
4.500.000 - 5.000.000. Seu resultado é dado em número por litro.
Hematócrito: Representa a quantidade de hemácias exitentes em 100ml de
sangue total. Os valores variam com o sexo e com a idade. Valores: Homem de 40

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- 50% e Mulher de 36 - 45%. Recém nascidos tem valores altos que vão
abaixando com a idade até o valor normal de um adulto.
Hemoglobina: segundo a Organização Mundial de Saúde é considerado anemia
quando um adulto apresentar Hb < 12,5g/dl, uma criança de 6 meses a 6 anos Hb
< 11g/dl e crianças de 6 anos a 14 anos, uma Hb < 1 2g/dl.
VCM (Volume Corpuscular Médio): é o índice mais importante pois ajuda na
observação do tamanho das hemácias e no diagnóstico da anemia: se pequenas
são consideradas microcíticas (< 80fl, para adultos), se grandes consideradas
macrocíticas(> 96fl, para adultos) e se são normais, normocíticas (80 - 96fl).
Anisocitose: é denominação que se dá quando há alteração no tamanho das
hemácias. As anemais microcíticas mais comuns são a ferropriva e as síndromes
talassêmicas. As anemias macrocíticas mais comuns são as anemia
megaloblástica e perniciosa. O resultado do VCM é dado em femtolitro.
HCM (Hemoglobina Corposcular Média): é o peso da hemoglobina na hémácia.
Seu resultado é dado em picogramas.
CHCM (Concentração de Hemoglobina Corposcular Média): é a concentração
da hemoglobina dentro de uma hemácia. O intervalo normal é de 32 - 36g/dl.
Como a coloração da hemácia depende da quantidade de hemoglobina elas são
chamadas de hipocrômicas (< 32), hipercrômicas (> 36) e hemácias
normocrômicas (no intervalo de normalidade). É importante observar que na
esferocitose o CHCM geralmente é elevado.
RDW (Red Cell Distribution Width): é um índice que indica a anisocitose
(variação de tamanho), sendo o normal de 11 a 14%, representando a
percentagem de variação dos volumes obtidos. Nem todos os laboratórios
fornecem o seu resultado no hemograma.
Normalmente realiza-se uma análise estatística em testes realizados em um
grande grupo de indivíduos normais para se chegar aos límites estabalecidos para
hemoglobina, hematócrito e número de hemácias, isto quer dizer que cada região
possui um límite de normalidade.
A Morfologia das hemácias (ou estudo da forma das hemácias) é feita em
microcópio, analisando o esfregaço de sangue, as formas encontrads são:
Drepanócitos (forma de foice): aparece somente nas síndromes falciformes (não
aparecendo no traço falcifrome).
Esferócitos (forma esférica, pequena e hipercrômica): em grande quantidade é
comum na anemia esferocítica (esferocitose), em menores quantidades podem
estar presentes em outros tipos de anemias hemolíticas.
Eliptócitos (forma de charuto): em grandes quantidades comum na eliptocitose.
Em menores quantidades podem aparecer em qualquer tipo de anemia.
Hemácias em alvo em grandes quantidades (células cujas membranas são
grandes havendo uma palidez e um alvo central mais corado) aparece em
hemoglobinopatias C, E ou S, nas síndromes talassêmicas e em pacientes com
doença hepática.
Dacriócitos (forma de lágrima): em grande quantidade na mielofibrose. Em
pequena quantidade podem aparecer em qualquer tipo de anemia.

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Hemácias policromáticas (forma normal mas com coloração azul devido a
presença de RNA residual): aparece quando grandes quantidades de hemácias
novas estão sendo produzidas. Comuns em anemias hemolíticas.
Esquisócitos (são hemácias fragmentadas): aparecem quando nas hemácias há
uma lesão mecânica, em casos de hemólise, ou em casos de pacientes que
sofreram queimaduras.
Acantócitos (hemácias com pontas de diversos tamanhos): nas hepatopatias,
hipofunção esplênica, esplenectomizados.
Crenadas (hemácias com várias pontas pequenas): na uremia, quando o paciente
faz tratamento com heparina, deficiência de piruvatoquinase.
Outros achados não relacionados a forma:
Hemácias aglutinadas (agrupamentos de hemácias): quando a hemólise é
causada por um anticorpo contra hemácias, elas acabam se agrupando
(crioaglutininas).
Hemácias em Roleux (hemácias em rolos, formam pilhas de rolos de hemácias):
aparece em alta concentração de globulinas anormais, mieloma múltiplo e
macroglobulinemia.
Inclusões nas hemácias:
Corpuscúlos de Howell-Joly (aparecem como se fossem um botão azul escuro
junto à membrana da hemácia, por fragmento nuclear ou DNA condensado): após
esplenectomia, anemias hemolíticas severas.
Hemácias com pontilhados basófilos: (vários pontos roxos dentro da hemácia, pela
preciptação dos ribossomos ricos em RNA): aparecem na talassemia beta,
intoxicação por chumbo, anemia hemolítica por deficiência de pirimidina-5-
nucleotidase.
Anel de Cabot (forma de uma anel ou em oito dentro da hemácia, por restos
nucelares): em anemias hemolíticas severas.
Leucograma é o estudo da série branca (ou leucócitos), faz-se uma
contagem total dos leucócitos e uma contagem diferencial contando-se 100
células. O adulto normalmente apresenta de 5.000-10.000 leucócitos por 100ml de
sangue.
Contagem diferencial de Leucócitos: Em um paciente normal as células
encontradas são:
Monócitos: uma das maiores células da série branca, têm citoplasma azulado,
núcleo irregular (indentado, lobulado, em C ou oval) podem ter vacúolos (pela
recente fagocitose). Quando estão aumentados usa-se o termo monocitose e

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ocorre em infecções virais, leucemia mielomonocítica crônica e após
quimioterapia.
Linfócitos: se pequenos têm citoplasma escasso, núcleo redondo; se grandes têm
citoplasma um pouco mais abundante. Podem ter grânulos. É a célula
predominante nas crianças. Seu aumento é chamdo de linfocitose. Em adultos,
seu aumento pode ser indício de infecção viral ou leucemia linfocítica crônica.
Eosinófilos: citoplasma basofílico que não é visualizado por causa da presença de
grânulos específicos (de coloração laranja-avermelhada), com núcleo com 2-3
lóbulos. Quando seu número aumenta é chamado de eosinofilia, e ocorre em
casos de processos alérgicos ou parasitoses.
Basófilos: citoplasma cheio de grânulos preto-purpúreos que cobrem o citoplasma.
Em um indivíduo normal, só é encontrado até uma célula (em termos percentuais).
Neutrófilos Segmentados: citoplasma acidófilo (róseo), núcleo com vários lóbulos
(2-5 lóbulos) conectados com filamento estreito. É a célula mais encontrada em
adultos. Seu aumento pode indicar infecção bacteriana, mas pode estar
aumentada em infecção viral.
Outras Células que podem ser encontradas:
Blasto:
Linfoblasto:
L1: célula pequena, citoplasma basofílico e escasso. Encontrada nas leucemia
linfóide aguda tipo L1.
L2: célula de tamanho médio, citoplasma de tamanho e basofilia variada.
Encontrada na leucemia linfóide aguda tipo L2.gg
L3: célula grande ou média, citoplasma com intensa basofilia, com vacúolos.
Aparece no linfoma de Burkitt.
Mieloblasto: possui citoplasma escasso, azulado (basofílico), núcleo redondo ou
oval, com um ou mais nucléolos evidentes. Pode apresentar grânulos no seu
citoplasma e bastão de Auer (forma de agulha). Os mieloblastos aparecem em
casos de leucemia mielóide, síndrome mielodisplásica ou na reação leucemóide
(infecção grave).
Monoblasto: similar a outros blastos mas com núcleo mais contorcido ou irregular
que o mieloblasto. Aparece na leucemia mielomonocítica aguda ou na leucemia
monocítica aguda.
Promielócitos Neutrofílico: O mieloblasto evolui para promielócito, célula maior que
o mieloblasto, citoplasma basófilo, grânulos de coloração vermelho-púrpura
(grânulos primários), núcleo oval com uma pequena identação.
Mielócitos Neutrofílico: O promielócito evolui para mielócito, célula com citoplasma
acidófilo (rosa), mais abundante que o promielócito e com poucos grânulos e já
não são mais visualizados os nucleólos.
Metamielócitos Neutrofílico: citoplasma acidófilo, núcleo identado com forma de
feijão, poucos grânulos.
Bastonetes Neutrofílico: citoplasma acidófilo, núcleo em forma de S ou C. Não é
comum seu achado em sangue de pacientes normais, mas aparecem em número
aumentado em casos de infecção.

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Linfócitos Atípicos: citoplasma mais basofílico que o linfócito normal, núcleo
irregular. Aparece em infecções virais. Em grande número na mononucleose
infecciosa, na infecção por citomegalovírus, na toxoplasmose.
Células Plasmáticas: citoplasma basofilico, tamanho moderado e núcleo
excentrico. Pode aparecer no mieloma múltiplo.
Células Linfomatosas: citoplasma em quantidade variada, núcleo dobrado,
convoluto, clivado ou dobrado. Com um ou mais nucleólos. Aparece em linfomas.
Hairy Cells: citoplasma azul páildo, com projeções citoplasmáticas. Aparece
somente na leucemia das células cabeludas.
Célula Cerebriforme: núcleo escuro contendo fendas e dobras (aparência de
cérebro). Aparece na síndrome de Sézary.
Inclusões citoplasmáticas que podem ser encontradas em neutrófilos:
Granulações Tóxicas: quando há um aumento na produção dos granulócitos, há
uma diminuição no tempo da maturação das células precursoras dos neutrófilos.
Por isso os neutrófilos aparecem no sangue com os grânulos primários. Estão
presentes em casos de infecções.
Vacuólos: resultandes da fogocitose. Podem aparecer nos neutrófilos e monócitos.
Seu relato só é importante quando aparece nos neutrófilos. Aparece em casos de
infecções graves.
Plaquetas são observadas em relação a quantidade e seu tamanho. Seu
número normal é de 150.000 à 400.000 por microlitro de sangue. O tamanho de
uma plaqueta varia entre 1 a 4 micrometros.
A contagem de plaquetas é feita pelo método automático. A maioria dos
laboratórios usam aparelhos cuja contagem de plaquetas se faz no mesmo canal
de contagens de hemácias, sendo que a diferenciação de ambas se dá pelo
volume (plaquetas são menores que 20 fl e hemácias maiores que 30 fl). Devido
ao grande volume de exames feito por um laboratório ficou inviável a contagem
manual de todas as plaquetas, mas a contagem manual não foi totalmente
abandonada. Quando o número de plaquetas encontra-se diminuído, o laboratório
faz um esfregaço de sangue para confirmar se elas estão diminuídas ou não. Se
isso não for confirmado, a contagem de plaquetas é feita de modo manual, isto é,
contagem em câmara de Neubauer.
Os erros mais comuns em uma contagem automática são: aparelhos mal
calibrados e problemas na coleta do sangue. A coleta é muito importante, uma
coleta muito lenta, agitação errada do sangue colhido entre outros problemas
podem fazer com que as plaquetas se agrupem e ao realizar a contagem em
aparelhos, seu número estará diminuído. O agrupamento de plaquetas não é um
sinal clínco.

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Citometria de fluxo
A técnica de citometria de fluxo é usada para contar e analisar as características
físicas e moleculares de partículas microscópicas (ex.: células) num meio líquido.
Um feixe de luz (normalmente laser) de uma única freqüência (cor) é direcionado a
um meio líquido em fluxo. Estão apontados ao local onde a corrente do fluido
passa através do feixe de luz alguns detectores: (i) Forward Scatter ou FSC, que
está na linha do laser e atrás da zona onde passam as partículas, e é uma medida
do volume das partículas; (ii) Side Scatter ou SSC, que está perpendicular à
direcção do laser, e é uma medida da complexidade das células, i.e., forma do
núcleo, quantidade e tipo de grânulos citoplasmáticos ou rugosidade membranar:
(iii) Detectores fluorescentes (um ou mais), também perpendiculares à direção do
laser.
Cada partícula que passa através do feixe de luz dispersa-a de alguma forma e os
corantes químicos na partícula podem ser excitados de modo a emitir luz numa
freqüência mais baixa que a da fonte de luz. Esta combinação de luz dispersa e
fluorescente é detectada pelos detectores e analisando as flutuações de brilho de
cada detector (um para cada pico de emissão fluorescente) é possível vários
factos sobre a estrutura física e química de cada partícula individual.
Os parâmetros possíveis de medir são: volume e complexidade morfológica das
células, pigmentos celulares como clorofila, ADN (análise de tipo de células,
cinética celular, proliferação, etc.), RNA, análise e classificação de cromossomos,
proteínas, antígenos à superfície celular (marcadores CD), antígenos
intracelulares (várias citosinas, mediadores secundários, etc.), antígenos
nucleares, atividade enzimática, pH, cálcio ionizado intracelular, magnésio,
potencial membranar, fluidez membranar, apoptose (quantificação, medidas da
degradação do ADN, potencial da membrana mitocondrial, alterações na
permeabilidade, atividade da caspase), viabilidade celular, monitorização da
electropermeabilização das células, caracterização da multi resistência a fármacos
em células tumorais, glutationa, várias combinações (DNA/antigénios de
superfície, etc.). Esta lista é muito longa e está em constante expansão.

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ANEMIAS
É uma anomalia caracterizada pela diminuição da concentração da hemoglobina
dentro das hemácias, intraeritrocitária, e pela redução na quantidade de hemácias
no sangue. Isso resulta em uma redução da capacidade do sangue em transportar
o oxigênio aos tecidos. A hemoglobina, uma proteína presente nas hemácias, é
responsável pelo transporte de oxigênio dos pulmões para os demais órgãos e
tecidos e de dióxido de carbono destes para ser eliminado pelo pulmão.
Sinais e sintomas
São variáveis, mas os mais comuns são fadiga, fraqueza, palidez (principalmente
ao nível das conjuntivas), déficit de concentração ou vertigens. Nos quadros mais
severos podem aparecer taquicardias, palpitações. Afeta também a gengiva
(causando, em casos mais graves, o seu sangramento).
Causas da Anemia
Genéticas:
Hemoglobinopatias, sendo as mais comuns hemoglobinopatias S (anemia
falciforme), C, E e D
Síndromes Talassêmicas (talassemia alfa ou beta)
Defeitos na membrana da hemácia: eliptocitose e esferocitose
Anormalidades enzimáticas: deficiência em glucose-6-fosfato desidrogenase
Abetaproteinemia
Anemia de Fanconi
Nutricionais:
Deficiência de ferro (Anemia Ferropriva)
Deficiência de vitamina B12 (Anemia megaloblástica)
Deficiência de folato (Anemia megaloblástica)
Perda de sangue:
Hemorragia excessiva por acidentes, cirurgia, parto
Sangramento crônico por sangramentos causados em casos de úlcera, câncer
intestinal, ciclo menstrual excessivo, sangramento nasal recorrente (epistaxes),
sangramento por hemorróidas
Imunológicas:

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mediadas por anticorpos
Efeitos Físicos:
Trauma
Queimaduras
Uso de medicamentos e exposição a produtos químicos:
Anemia aplásica
Anemia Megaloblástica
Doenças Crônicas:
Uremia
Hipotireoidismo
Hepatite
Doença Renal(provocando problemas na síntese de eritropoietina)
Neoplasias
Infecções:
Bacterianas: septicemia ;
Protozoários: Malária, Toxoplasmose, Leishmaniose
Virais: hepatite, Aids, Mononucleose, Citomegalovírus;
MIELOGRAMA
O mielograma é o estudo de uma amostra da medula óssea, obtida por
punção aspirativa com agulha apropriada, em ossos onde existe atividade
hematopoética.
O local mais indicado para a punção em crianças é a crista ilíaca e no adulto
o esterno. Com o material da punção são confeccionados esfregaços, corados pela
mistura Romanovsky e avaliados microscopicamente.

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Basicamente a observação se refere a celularidade, que nos mostra se a
medula é normo, hipo ou hipercelular. A relação entre os elementos mielóides e os
eritróides, nos fornece a relação mielóide - eritróide ou M / E, que varia entre 2 / 1
a 4 / 1.
Verificamos também o percentual de linfócitos que oscila em torno de 10 %,
a serie megacariocítica, observando a produção de plaquetas e outros elementos
tais como: parasitas e células neoplásicas.
Estuda-se a medula óssea, particularmente nas anemias, leucemias,
púrpuras, agranulocitoses, mielomas e controle de quimioterapia. Além de
analisarmos a morfologia das células, relatamos um percentual relativo à contagem
de 500 células, cuja tabela normal descrevemos abaixo:
CÉLULA MÉDIA % VALORES DE REFERÊNCIA
%
Mieloblasto 3 0,5 – 5,5
Pró-Mielócito 5 1,5 – 8,0
Mielócito Neutrófilo 12 4,5 – 18,0
Mielócito Eosinófilo 2 0,0 – 3,0
Mielócito Basófilo 0,5 0,0 – 1,0
Metamielócito Neutrófilo 27 12,0 – 42,0
Metamielócito Eosinófilo 2 0,5 – 3,5
Metamielócito Basófilo 0 0,0 – 0,1
Bastão Neutrófilo 24 15,0 – 33,0
Bastão Eosinófilo 1 0,0 – 2,0
Bastão Basófilo 0,2 0,0 – 0,5
Segmentado Neutrófilo 25 14,0 – 35,0
Segmentado Eosinófilo 4 1,0 – 7,0
Segmentado Basófilo 0,2 0,0 – 0,5
Linfócito 22 7,0 – 38,0
Monócito 3 0,0 – 5,0
Pró-Eritroblasto 3 0,0 – 6,0
Eritroblasto Basófilo 3 1,0 – 6,0
Eritroblasto Policromatófilo 15 5,0 – 26,0
Eritroblasto Acidófilo 11 2,0 – 21,0
Célula Reticular 1 0,0 – 2,0
Célula Plasmática 1 0,0 – 3,0
Megacariócito 0,5 0,0 – 1,0
Relação M / E 3 / 1 2 / 1 – 4 / 1
Mitoses Raras Raras
MORFOLOGIA DAS CÉLULAS DA MEDULA ÓSSEA
CÉLULA DIÂMETRO
MÉDIO
- micra -
NÚCLEO CITOPLASMA
Cromatina delicada Intensamente

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Pró-Eritroblasto 12 (10 – 14) e homogênea
Nucléolos 1 a 2
basofílico
Ausência de grânulos
Eritroblasto Basófilo 11 (10 – 12) Cromatina mais
densa
Ausência de
nucléolos
Intensamente
basofílico
Ausência de grânulos
Eritroblasto Policromatófilo 9 (8 – 10) Condensado,
Grumado
Azul / Marrom
Eritroblasto Acidófilo 7 (6 – 8) Picnótico Cor da hemácia
Mieloblasto 17 (15 – 20)
Cromatina delicada
Nucléolos 2 a 6
Basofílico
Grânulos azurófilos:
raros / nenhum
Pró-Mielócito 16 (14 – 18)
Cromatina mais
condensada
1 Nucléolo
Granulações
azurófilas:
numerosas
Mielócito 15 (12 – 18) Redondo ou oval Granulações
azurófilas
e específicas
Metamielócito 14 (10 – 18) Riniforme,
Invaginado
Granulações
azurófilas
e específicas
Plasmócito 11 (8 – 15)
Pequeno, Excêntrico
e
Cromatina em raios
de roda de carroça
Intensamente
basofílico
Vacuolizado
Megacarioblasto 21 (18 – 25) Sem lóbulos
Sem nucléolos
Azul claro
Pró-Megacariócito 18 Início da lobulação Irregular, sem
grânulos
Megacariócito Granuloso 35 Lobulado
Cromatina grumada
Granulações
azurófilas
Megacariócito
Trombocitógeno
70 (35 – 100) Muito lobulado Vermelho granuloso
Plaquetas na
periferia
PATOLOGIAS DA MEDULA ÓSSEA
PATOLOGIA MIELOFIBROSE AGRANULOCITOSE PÚRPURA
TROMBOCITOPÊNICA
Celularidade Reduzida Reduzida Aumentada
Célula Megacariócito Linfócitos Eritroblastos

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Predominante Plasmócitos
Série
Eritróide
Número reduzido
de Eritroblastos
Eritroblasto
Policromatófilo
Eritroblasto Acidófilo
Pró-Eritroblasto
Eritroblasto Basófilo
Eritroblasto
Policromatófilo
Eritroblasto Acidófilo
Série
Mielóide
Número reduzido
de Granulócitos
Número reduzido de
Mieloblastos e
Mielócitos
Todo o escalonamento
Mielóide
Outras
Séries
Número reduzido
de Mononucleares,
Linfócitos, Monócitos e
Plasmócitos
Presença de
numerosos
Fibroblastos
Linfocitose
Monocitose
Células Reticulares
Megacariócitos
aumentados
Número reduzido
de Mononucleares
Relação M / E ___________________ 10 / 1 a 50 / 1 1 / 1 a 4 / 1
BIÓPSIA DA MEDULA ÓSSEA
A biópsia da Medula Óssea proporciona um estudo arquitetural, fornecendo
informações quanto a celularidade medular e relações anatômicas dos diversos
componentes.
Para isto, retiramos fragmentos ósseos da crista ilíaca superior anterior. O
material passa por uma descalcificação e um processamento histológico, para
posterior estudo.
COLORAÇÃO CITOQUÍMICA
Esta modalidade de coloração é mediada por reação química e mostra
substâncias intracelulares com cores específicas, perceptíveis à microscopia ótica.

18
Várias colorações citoquímicas especiais podem definir melhor e mais
especificamente as características celulares. Elas também nos permitem distinguir linhagens
celulares, e são úteis no diagnóstico de malignidades hematopoiéticas.
Podemos utilizar amostras frescas de sangue periférico, medula óssea, linfonodos e
baço. As colorações mais utilizadas na rotina são as peroxidases, o azul da prússia para
ferro, o sudan black B para demonstrar lipídeos, o ácido periódico de schiff que detecta
glicogênio intracelular e a fosfatase alcalina leucocitária, enzima presente no citoplasma
dos neutrófilos.
COLORAÇÃO CITOQUÍMICA DAS PEROXIDASES:
Nos grânulos citoplasmáticos está presente uma enzima, a mieloperoxidase, que age
sobre o peróxido de hidrogênio (H2O2), produto do metabolismo celular, liberando oxigênio
que oxida a benzidina, formando um composto corado.
As células possuidoras da enzima peroxidase terão seus grânulos corados de verde
ou verde-azulado e estas células serão peroxidase positivas.
Esta coloração citoquímica é utilizada na distinção entre as células de origem
mielóide e linfóide. As células da linhagem mielóide são peroxidase positivas, enquanto
que as linfóides são peroxidase negativas. Na leucemia mieloblástica, 25 % dos leucócitos
são peroxidase positivos, enquanto que na leucemia linfoblástica, 95 % dos leucócitos são
peroxidase negativos. Nas leucemias agudas, quando presente um grande número de
blastos, a peroxidase torna-se uma técnica segura para a diferenciação entre mieloblastos e
linfoblastos.
AZUL DA PRÚSSIA OU PERLS:
É utilizado para identificação do ferro celular na forma de ferritina ou
hemossiderina. A reação se processa na interação de íons ferrocianeto com íons férricos no
interior da célula, resultando um produto de cor azul-esverdeado chamado ferrocianeto
férrico.
O azul da prússia é utilizado para detectar ferro no interior do eritroblasto
(sideroblasto), no histiócito (SER) e identificar corpúsculos de Pappenheimer nas hemácias.
O corante pode ser aplicado em cortes histológicos, porém sua grande atuação é no
aspirado de medula óssea, na identificação do depósito de ferro e ferro sideroblástico.
SUDAN BLACK B:
O sudan black B revela lipídeos, especialmente os fosfolipídeos intracelulares. O
padrão de coloração corresponde ao das peroxidases, sendo positivo para as séries

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neutrofílicas e eosinofílicas, negativo para os linfócitos e fracamente positivo para os
monócitos.
Utilizada para diferenciar leucemia mielóide aguda (LMA) de leucemia linfóide
aguda (LLA), possui a vantagem sobre a peroxidase por permitir corar esfregaços mais
antigos.
ÁCIDO PERIÓDICO DE SCHIFF (PAS):
O ácido periódico de schiff revela glicogênio intracelular. A maioria das células
hematopoiéticas são PAS positiva, por este motivo, a reação tem pouco valor no
diagnóstico das leucemias agudas.
Seu valor diagnóstico se faz presente na confirmação da Eritroleucemia (LA-M6) na
classificação FAB.
FOSFATASE ALCALINA LEUCOCITÁRIA (LAP):
Há nos tecidos hematopoiéticos, principalmente no citoplasma dos neutrófilos,
atividade da fosfatase alcalina. Algumas metodologias são usadas para quantificar esta
enzima, sendo a principal a de Kaprow.
Este procedimento envolve o uso de naftol e violeta B, produzindo um precipitado
vermelho brilhante.
O estudo da LAP tem uma grande utilidade prática, nos auxiliando no diagnóstico
diferencial das doenças hematopoiéticas. Seu principal interesse se aplica nas síndromes
mielo proliferativas (SMP), especialmente na diferenciação da leucemia mielóide crônica
(LMC) e reações leucemóides, onde a atividade da LAP é alta.

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