02_Lozano.pdf
- 1. Club de Inmunohistoquímica y Biología Molecular Mª Dolores Lozano Escario Clínica Universidad de Navarra. Pamplona.
- 2. “Cuando me invitan a dar charlas un poco filosóficas pienso que mi vida profesional está acabada “ Dr. JR Valentí. Especialista en Traumatología y Cirugía Ortopédica. Clínica Universidad de Navarra.
- 5. Marzo 1993- Abril 1995
- 9. Junio 1995…………………………………………. Departamento de Anatomía Patológica Clínica universidad de Navarra. Pamplona.
- 13. HPV en citología ginecológica…….
- 14. Desarrollo de la PAAF Técnicas de punción con TAC, ecoendoscopia, broncoscopia, EBUS Bloques celulares, biopsias pequeñas.
- 16. Rudolf Virchow (1821-1902) Teoría general de la enfermedad basada en tres principios: •Principio de la localización: no hay "enfermedades generales", todo proceso morboso se halla anatómicamente localizado. •Principio de la lesión celular: si se quiere conocer lo que en la enfermedad es verdaderamente fundamental hay que recurrir al estudio de la célula. •Principio del peligro: La vida de la célula enferma lleva en sí una cierta idea de "peligro", y esto es lo que básicamente distingue a la enfermedad de la salud en cuanto modos de vida. Teoría celular:la célula es la unidad elemental de la estructura y formación de todos los seres vivos. Toda célula procede de otra célula
- 17. La Anatomía Patológica Humana (AP) es la rama de la Medicina que se ocupa del estudio, por medio de técnicas morfológicas, de las causas, desarrollo y consecuencias de las enfermedades. El fin último es el diagnóstico correcto de biopsias, piezas quirúrgicas, citologías y autopsias. La Anatomía Patológica es una especialidad médica que posee un cuerpo doctrinal de carácter básico que hace que sea, por una parte, una disciplina académica autónoma y, por otra, una unidad funcional en la asistencia médica. Completo, de calidad y reproducible
- 18. Patología: Estudio (logos) del sufrimiento (pathos) Ciencia Básica Práctica Clínica Estudio de cambios estructurales y funcionales en células, tejidos y órganos que subyacen la enfermedad Técnicas: morfológicas inmunológicas microbiológicas moleculares Dimensión Asistencial Investigación Aplicada
- 22. 11 mm Desarrollo de lineas celulares Inmunocitoquímica FISH Técnicas complementarias en patología Estudios moleculares
- 26. INTRODUCCIÓN
- 27. Tumores morfológicamente iguales Alteraciones moleculares “diana” diferentes Necesidad de información molecular •Desarrollo de técnicas reproducibles para estandarizar las guías terapeúticas •Diagnóstico AP completo •Calidad de las muestras diagnósticas
- 28. ALK fusion 54-yr-old male never-smoker, adenoca Interpatient Heterogeneity in the Molecular Characteristics of NSCLC Patients With the Same Diagnosis and Clinical Features (Stage IV NSCLC) In 2012: Most oncologists would agree that these patients have very different malignancies Most oncologists would agree that these patients should receive different therapy 39-yr-old female never-smoker, adenoca EGFR Mt 65-yr-old male smoker, squamous KRAS Mt
- 29. Demanda de diagnósticos “precoces”, certeros, rápidos y mediante métodos mínimamente invasivos Biopsias PAAF Pacientes metastásicos Desarrollo de las técnicas de imagen
- 30. • provide accurate diagnosis • manage the tissue in a way that immunohistochemical and/or molecular studies can be performed •use and integration of immunohistochemical (i.e. TTF- 1/p63), histochemical (i.e. mucin stain), and molecular studies Enero 2008- Enero 2012. CUN-Departamento de Anatomía Patológica 590 CPNM 441 citología (PAAF); 36 con Bx 149 biopsia / resección; 32 con PAAF previa
- 31. Líneas celulares Immunocitoquímica FISH Técnicas complementarias en muestras citológicas y biopsias pequeñas Estudio mutacional
- 33. SAMPLE PROCUREMENT IN PATIENTS WITH SUSPECTED METASTATIC MELANOMA •FINE NEEDLE ASPIRATION •Direct FNA •EUS guided FNA •Bronchoscopy guided FNA •SURGICAL SPECIMEN IMPRINTS •EYE IMPRINTS CYTOLOGICAL DIAGNOSIS BY PATHOLOGIST • ACCURATE DIAGNOSIS • IHQ (Melan A, S100, HMB45) •Select smear for molecular testing containing more than 40% tumour cells. DNA EXTRACTION PCR AMPLIFICATION DIRECT SEQUENCING •Exon 15 of BRAF gene •Exons 9,11,13 and 17 of c-Kit gene S-100 Melan A FINAL REPORT V600E mutation in BRAF gene L576P mutation in c-Kit gene
- 34. Varon 76 años, fumador 80 paq/año Citologia esputo “positiva para ca. Escamoso” Masas pulmonares bilaterales, adenopatías mediastínicas Mts. Hepáticas, óseas, pleurales y cerebrales PAAF con broncoscopio de adenopatías hiliares
- 35. 2011C1865
- 37. Del E746-S752 Exón 19
- 38. Del E746-S752 Exón 19 Respuesta parcial a los 6 meses del incio de TKIs
- 39. •Mujer 72 años, no fumadora •Enfermedad diseminada (origen desconocido) •Metástasis cerebrales •Se le había ofrecido únicamente tratamiento paliativo
- 40. TTF-1 CK-7 PAAF directa de un nódulo supraclavicular Ac metastásico de probable origen pulmonar del L747-E749, A750P Exon 19
- 41. Tratamiento con TKI (Tarceva)
- 49. “...los nuevos test moleculares no son una amenaza para los patólogos, sino una oportunidad para incorporar las nuevas tecnologías y desarrollarlas. Los citopatólogos juegan un papel primordial puesto que se les pide hacer más con menos muestra.....” Naylor and Ramzy, 2003