Calculos ufc
- 1. Cálculo de las ufc/gr ó ml a) Factor Dilución (FD) Título de la dilución inicial * Títulos diluciones sucesivas Ejemplo: 1/10 (dilución inicial) * 1/10 * 1/10 (diluciones siguientes) FD= 1/1000 b) Factor Decimal de Dilución (FDD)= 1/FD FDD=1000 c) ufc/g ó ml = nº de colonias significativas en la última placa considerada Volumen inicial sembrado * FDD / Expresión de resultados 1.- Si no ha habido crecimiento 2.- Recuentos significativos por placa: entre 30 y 300 ufc 3.- Logaritmo o número de ufc/g ó ml en potencias de 10 1
- 2. Ejemplo - Se homogenizan 25 g de queso con 225 ml de agua de peptona. - Se realizan 2 diluciones decimales sucesivas. - Se siembra 1 ml de muestra. - Se incuban las placas y transcurrida esta fase los resultados obtenidos son: • 2ª dilución: más de 300 colonias. • 3ª dilución: 100 colonias. - Se desea calcular el número de colonias/g de muestra. Resultado 1º) DILUCIÓN INICIAL: 25/(25+225) = 25/250 = 1/10 2º) DILUCIONES SUCESIVAS: 1/10 (2ª) 1/10 (3ª) FD = 1/10 X 1/10 X 1/10 = 1/1000 FACTOR DECIMAL DE DILUCIÓN (FDD) = 1 /FD = 1000/1 = 1000 3º) ufc/g = (Nº DE COLONIAS CONTADAS X FDD)/VOLUMEN SIEMBRA ufc/g = (100 X 1000)/1 = 100.000 = 1 x 105 = 105 log10 105 = 5 log10 ufc/g 2
- 3. Problemas Tengo 47 gr de muestra. ¿Qué cantidad de diluyente debo emplear para conseguir una primera dilución al 1/10?. 1/10 = 47/47+x 47+x = 470 x = 423 ml Una vez hecha la primera dilución, se hacen tres diluciones decimales más. Se siembran de la última dilución 1 ml (placa A) y 0,1 ml (placa B), respectivamente. El recuento obtenido fue en A: 396 ufc y en B: 95 ufc. •¿Qué hubiera sucedido si tan sólo se hubiera sembrado la placa A? El resultado se consideraría no significativo. ¡Habría que repetir la siembra! C) Informes de resultados y dictamen 1.- análisis de superficies 2.- análisis de una comida Grupo A 3
- 4. Supuesto práctico sobre análisis microbiólogico de superficies TOMA DE MUESTRAS CON LAMINOCULTIVOS 4
- 5. LECTURA DE LAMINOCULTIVOS Recuento en PCA MICROORGANISMOS MARCADORES DEL NIVEL DE LIMPIEZA Y DESINFECCIÓN EN LA INDUSTRIA ALIMENTARIA. CRITERIOSMICROBIOLÓGICOS Higiene, Inspección y Control Alimentario. Facultad de Veterinaria. Trasmontaña 35416 Las Palmas. ESPAÑA Tfno: 928 45 11 35 / 45 10 98. Fax: 928 45 11 42 CONVENIO: FECHA DE RECEPCIÓN: ANÁLISIS NÚMERO: Asuperficie FECHA DE ANÁLISIS: MUESTRA DE: superficies REMITIDA POR: RESULTADOS ANALISIS MICROBIOLOGICOS n=1 Placa rcto. aerobios mesófilos (Cuchara) ufc/g 5 Placa rcto. enterobacterias (Bandeja descongelación de pollo) SC Placa rcto. hongos y levaduras (Guante chico) 18 5
- 6. RESUMEN DEL CONTROL DE SUPERFICIES •Los resultados se interpretan según criterios internos de la empresa. •No se deben comparar con los de otra empresa. •Usar siempre la misma técnica. •Después de la desinfección no se deben encontrar coliformes. MICROORGANISMOS MARCADORES DEL NIVEL DE LIMPIEZA Y DESINFECCIÓN EN LA INDUSTRIA ALIMENTARIA. CRITERIOSMICROBIOLÓGICOS Recuento total de aerobios: 0-5 ufc/placa: Satisfactorio 6-10 ufc/placa: Aceptable 11-25 ufc/placa: No aceptable. Revisar Programa LD > 25 ufc/placa: Insatisfactorio Recuento de aerobios totales 1 ufc. / cm2 : desinfección excelente 2 – 5 ufc. / cm2 : desinfección media, puede mejorarse > 5 ufc. / cm2 : desinfección defectuosa Recuento de Enterobacterias totales 0 ufc/placa: Satisfactorio < 5 ufc/placa: Aceptable > 5 ufc/placa: Insatisfactorio. Revisar 6
- 7. Higiene, Inspección y Control Alimentario. Facultad de Veterinaria. Trasmontaña 35416 Las Palmas. ESPAÑA Tfno: 928 45 11 35 / 45 10 98. Fax: 928 45 11 42 CONVENIO: FECHA DE RECEPCIÓN: ANÁLISIS NÚMERO: Asuperficie FECHA DE ANÁLISIS: MUESTRA DE: superficies REMITIDA POR: RESULTADOS ANALISIS MICROBIOLOGICOS n=1 Placa rcto. aerobios mesófilos (Cuchara) ufc/g 5 Placa rcto. enterobacterias (Bandeja descongelación de pollo) SC Placa rcto. hongos y levaduras (Guante chico) 18 Higiene, Inspección y Control Alimentario. Facultad de Veterinaria. Trasmontaña 35416 Las Palmas. ESPAÑA Tfno: 928 45 11 35 / 45 10 98. Fax: 928 45 11 42 FECHA DE RECEPCIÓN: CONVENIO: Niveles de riesgo: ANÁLISIS NÚMERO: Asuperficie 0-5 Colonias/placa: Satisfactorio FECHA DE ANÁLISIS: de riesgo: Niveles MUESTRA DE: superficies 0 Colonias/placa: Satisfactorio 6-10: Aceptable REMITIDA POR: aceptable. Revisar 11-25: No RESULTADOS > 25: Insatisfactorio < 5: Aceptable > 5: Insatisfactorio. Revisar ANALISIS MICROBIOLOGICOS n=1 Placa rcto. aerobios mesófilos (Cuchara) ufc/g 5 Placa rcto. enterobacterias (Bandeja descongelación de pollo) SC Placa rcto. hongos y levaduras (Guante chico) 18 7
- 8. 1.- análisis de superficies 2.- análisis de una comida Grupo A Criterios microbiológicos en comidas preparadas Indicadores: Enterobacteriaceas lactosa + Aerobios mesófilos Testigos de falta de higiene: Escherichia coli Staphylococcus aureus Gérmenes patógenos: Salmonella Listeria monocytogenes RD 3484/2000 8
- 9. Higiene, Inspección y Control Alimentario. Facultad de Veterinaria. Trasmontaña 35416 Las Palmas. ESPAÑA Tfno: 928 45 11 35 / 45 10 98. Fax: 928 45 11 42 CONVENIO: FECHA DE RECEPCIÓN: ANÁLISIS NÚMERO: FECHA DE ANÁLISIS: MUESTRA DE: ensaladilla REMITIDA POR: RESULTADOS ANALISIS MICROBIOLOGICOS GRUPOS n=1 PARAMETRO A ufc/g m M m 6 4 105 mesófilos103 33x104 10 + 104 10 102 10 10 Rec tot aerobios mesofilos >10 Indicadores: Enterobacteriaceas lactosa Escherichia coli Testigos de M 5 8 Enterobacteriaceas dextrosa + Aerobios ufc/g D10FAB-CAD m M B 105-6 10 10 10 Ausencia/g Ausencia falta de higiene: Escherichia coli Staphylococcus aureus 2 102 10 102 10 10 10 aureus >103 Staphylococcus10 2 Ausencia Gérmenes patógenos: Salmonella 2 Ausencia/25 g Salmonella Listeria monocytogenes 106-7 2 10 10 Aus/25 Listeria monocytogenes g Dictamen: Si resultados son > a los de referencia en Indicadores: Enterobacteriaceas lactosa + Aerobios mesófilos ¡Revisar el funcionamiento HS del EARC y sistema de autocontrol! 9
- 10. Dictamen: Si resultados son > a los de referencia en Testigos de falta de higiene: Escherichia coli Staphylococcus aureus ¡Revisión de los métodos de vigilancia aplicados en los PCCs! Dictamen: Si resultados son > a los de referencia en Gérmenes patógenos: Salmonella Listeria monocytogenes ¡Retirada del mercado y excluidos del consumo humano! 10