TINCION DE GRAM CONTENIDO TEMATICO 1.1 DEL PROGRAMA
- 1. TINCION DE GRAM GONZÁLEZ SANCHEZ JESUS FRANCISCO
- 2. Significado La tinción de Gram es una técnica de coloración de contraste; fue descubierta por Hans Christian Gram en (1884). El fundamento de la técnica se hace con base a las paredes celulares de las bacterias para diferenciar las bacterias Gram positivas y Gram
- 3. Características Estructuralmente la tinción de Gram se caracteriza por clasificar las bacterias por medio de sus propiedades físicas y químicas en sus paredes, gracias al peptidoglicano ya que es la causante de la rigidez de la pared celular y esto permite determinar una bacteria Gram positiva o Gran negativa. Bacterias Gram negativas Bacterias Gram positivas
- 4. Características Gram positivas Poseen una pared celular gruesa con hasta 40 capas de peptidoglicano y polímeros pero no cuentan con membrana celular externa. Se tiñen de un color de color azul obscuro a morado. Las bacterias Gram positivas, al contener una gran cantidad de peptidoglicano, retienen con mayor fuerza este complejo
- 5. Características Gram Negativas La pared celular de las bacterias Gram negativas está constituida por una capa fina de peptidoglucano y una membrana celular externa. Al someterse al proceso de decoloración las mismas se destiñen con facilidad. Ya que no pueden retener por tener menos cantidad de peptidoglicano. Estas se tiñen de un color rojo o rosa
- 6. Reactivos estos son: Cristal violeta, Yodopovidona (Lugol) alcohol-acetona, safranina Aceite de inmersión. Hisopo de algodón estéril Portaobjetos Mechero o alcohol Microscopio Instrumentos para la Tinción de Gram
- 7. Procedimiento para la toma de muestra Se rotula el portaobjetos con los datos de la paciente. Con un hisopo de algodón estéril, tomar la muestra frotando en la zona donde sea mas abúndate. Colocar la muestra sobre el portaobjetos, haciendo movimientos circulares formando un ovalo dejando los bordes libres y evitando saturar o dejar grueso el extendido.
- 8. Procedimiento Coloca la muestra en el portaobjetos. Fijar la muestra con calor con ayuda de un mechero durante unos segundos. Cubrir completamente la preparación con el reactivo cristal violeta y se deja actuar durante un minuto, posteriormente se lava suavemente con agua.
- 9. Procedimiento Añadir el Lugol y déjalo reposar por lo menos por 60 segundos, luego enjuágala cuidadosamente con el mismo método Decolorar la muestra con alcohol-cetona al 95% por 15 segundos, posteriormente se enjuaga rápidamente Empapar la muestra con safranina y dejar actuar durante un minuto, después se debe lavar suavemente con agua. Dejar secar el portaobjetos al aire
- 10. Interpretación Colocar una gota de aceite de inmersión en la muestra y se observa en el microscopio con objetivo 100x. Las bacterias se clasifican en función del color y de la forma: Se identifica la bacteria si es gran positiva(color morado) o gran negativa (Color rosado o rojo). Las formas mas comunes son redondas (cocos) o en forma de bastoncillo (bacilos).
- 11. Finalidad • La finalidad de la tinción de gram es distinguir bacterias gran positivas y negativas también puede proporcionar información para el diagnóstico de infecciones. • Hace posible distinguir entre la contaminación de la muestra y una verdadera infección. • Además se encarga de identificar el tipo de antibiótico así como su eficacia y puede revelar los agentes causales
- 12. Conclusión La tinción de Gram es una tinción muy importante para la microscopia, esta permite identificar y clasificar a las bacterias en Gram Positivas y Gram negativas de acuerdo al grosor de su pared celular que posee. Gracias a la invención de esta tinción se ha podido realizar diagnósticos más eficientes y así mejorar la calidad de vida.