Electroforesis
- 1. República Bolivariana de Venezuela Universidad Arturo Michelena Facultad de Ciencias de La Salud Escuela de Patología Médica San Diego, Mayo de 2009 Electroforesis
- 2. Electroforesis Es un método que se utiliza para separar biomoléculas, empleando una corriente eléctrica. Esta separación se puede realizar: Electroforesis en Papel Electroforesis en Gel
- 4. Electroforesis en Papel Se emplea en la separación de sustancias de bajo peso molecular como aminoácidos y péptidos. Es muy útil en los laboratorios clínicos por su fácil manipulación y su rápido desarrollo.
- 5. Electroforesis en Papel Pueden hacerse en tiras de acetato de Celulosa, Que son químicamente más homogéneas y son transparentes. El acetato de celulosa se utiliza también para separar lipoproteínas.
- 6. Electroforesis en Papel Proceso con electroforesis en papel. La muestra se aplica sobre una tira de papel de filtro humedecido con una 2 disoluciones tampón, bien en el centro o en cualquiera de los extremos del papel , dependiendo de las sustancias a separar y del pH del tampón. Los extremos de la tira se sumergen en dos recipientes separados que contienen la disolución tampón y en los que se hallan colocados los electrodos.
- 8. Electroforesis en Papel Se conectan los electrodos a una fuente de tensión continua y se aplica una diferencia de potencial durante el tiempo adecuado. Al aplicar una corriente directa, las moléculas cargadas de la mezcla emigran hacia los electrodos de polaridad opuesta formando bandas en el papel . La velocidad de emigración de una molécula, depende preferentemente de su carga.
- 10. Electroforesis en gel Se basa en: El tamaño La forma El Punto Isoeléctrico Puede ser una técnica preparativa para purificar moléculas antes de aplicar espectrometría de masas, clonación o secuenciación de ADN.
- 11. Electroforesis en gel El gel en muchos casos es un polímero entrelazado de porosidad controlable. Está compuesto por diferentes concentraciones de: acrilamida/bis-acrilamida iniciador de la polimerización
- 12. Electroforesis en gel Aplicaciones con electroforesis en gel. Aplicaciones en Ácidos Nucleicos. Aplicaciones en Proteínas.
- 13. Electroforesis en gel Aplicaciones en Ácidos Nucleicos. En los fragmentos de ADN doble, la velocidad de migración es inversamente proporcional al tamaño. En los fragmentos simples de ADN y ARN se utilizan compuestos como hidróxido de sodio y formamida q rompen los enlaces de puente de hidrógeno y permiten que la velocidad dependa únicamente del tamaño.
- 14. Electroforesis en gel Aplicaciones en Proteínas. Al aplicar una fuerza electromotriz y las proteínas no migran, hay que desnaturalizarlas, añadiendo: Detergente : (SDS/SDP). Agente Reductor : 2-mercaptoetanol.