Cmh1222
- 1. GENES Y MOLECULAS DEL COMPLEJO MAYOR DE HISTOCOMPATIBILIDAD
- 2. * TRASPLANTE EN RATONES - Base genética para el reconocimiento del injerto como tejido extraño. Genes de Histocompatibilidad. * ESTUDIOS SEROLOGICOS EN HUMANOS George Snell. 40’ - Jean Dausset 60’. En presencia de complemento el suero del receptor lisa los linfocitos del Donante ALOSUEROS - ALOANTICUERPOS ALOANTIGENOS HLA * RESPUESTA INMUNITARIA- Baruj Benacerraf y Hugh McDevitt. 60’ PREMIO NOBEL 1980. Benacerraf, Dausset y Snell. “Estructuras de la superficie celular determinadas genéticamente que regulan las reacciones inmunológicas” PREMIO NOBEL 1996. Doherty y Zinkernagel. “Las células efectoras deben reconocer 2 señales de una célula infectada por virus, una derivada del virus y la otra de la molécula MHC normalmente presente en la célula” HISTORIA PREMIO NOBEL 1960 Macfarlane Burnet y Peter B Medawar “Inmunidad adquirida en los trasplantes de tejidos.
- 3. MAPA ESQUEMATICO DEL MHC DP DQ DR B C A REGION D HUMANO K I-A I-E D L REGION I MURINO MHC CLASE I MHC CLASE II MHC CLASE III C’ C’
- 4. ORGANIZACIÓN GENÉTICA DEL CMH HUMANO
- 5. MAPA DEL MHC HUMANO
- 6. MAPA DEL GEN QUE CODIFICA LA CADENA α DE LAS MOLECULAS MHC CLASE I 1 2 3 4 5 6
- 7. Mapa del gen que codifica la cadena α de la molécula MHC clase II 5‘UT L α1 α2 TM/CYT 3‘UT α1 α2 TM 1 2 3 4 MHCII
- 8. MAPA DEL GEN QUE CODIFICA LA CADENA β DE LAS MOLECULAS MHC CLASE II 1 2 3 4
- 9. -+++Neutrófilos -+Hepatocitos +++++Macrófagos ++++++Otras APC (Células dendríticas) Células no nucleadas Otras células nucleadas Tejido Linfoide -+Pulmón -+Riñón ++++Células del epitelio tímico ++++++ ++++Células T --Glóbulos Rojos Células B Clase IIClase ITejido Localización de las moléculas del MHC Elsevier Science, Gardland Publising 1999
- 10. Nomenclatura de alelos HLA Nomenclatura Indica HLA Region HLA-DRB1 Locus HLA-DRB1*13 Alelos HLA-DRB1*1301 Un alelo específico Nomenclatura de alelos H-2 Nomenclatura Indica H- 2 Region H- 2K Locus H- 2Kd Un alelo específico
- 11. POLIMORFISMO DE GENES MHC DPβ DPα DQ β DRβ DRαA B C DQα 111 22 59 28 463 3 617 179 338 MHC CLASE I MHC CLASE II
- 12. TIPIFICACION DE MOLECULAS MHC EXTRACCION DE DNA PCR RESULTADOS CLASE I CLASE II INICIADOR DNAg BLANCO INICIADOR AMPLIFICACION PCR PRODUCTO DE PCR 1 52 3 4 INICIADOR INICIADOR
- 13. TIPIFICACION HLA CLASE I: SEROLOGIA Vs BIOLOGIA MOLECULAR HLA-A HLA-B HLA-C HLA-E HLA-G Serología Alelos Serología Alelos Serología Alelos Serología Alelos Serología Alelos A1 A*0101,0102 B7 B*0702–0706 Cw1 Cw*0102,0103 — E*0101 G*01011– A2 A*0201–0217 B8 B*0801–0803 Cw2 Cw*02021,02022 0104 A3 A*0301,0302 B13 B*1301–1303 Cw3 Cw*0302–0304 A11 A*1101–1103 B14 B*1401,1402 Cw4 Cw*0401–0403 A23(9) A*2301 B15 B*1501–1531 Cw5 Cw*0501 A24(9) A*2402–2410 B18 B*1801–1803 Cw6 Cw*0602 A25(10) A*2501 B27 B*2701–2710 Cw7 Cw*0701–0705 A26(10) A*2601–2608 B35 B*3501–3518 Cw8 Cw*0801–0803 A29(19) A*2901,2902 B37 B*3701–3702 — Cw*12021–1203 A30(19) A*3001–3004 B38(16) B*3801–3802 — Cw*1301 A31(19) A*31012 B39(16) B*39011–3909 — Cw*1402,1403 A32(19) A*3201 B40 B*40011–4008 — Cw*1502–1505 A33(19) A*3301–3303 B41 B*4101,4102 — Cw*1601,1602 A34(10) A*3401,3402 B42 B*4201,4202 — Cw*1701,1702 A36 A*3601 B44(12) B*4402–4407 A43 A*4301 B45(12) B*4501 A66 A*6601,6602 B46 B*4601 A68(28) A*68011–6803 B47 B*4701 A69(28) A*6901 B48 B*4801,4802 A74(19) A*7401 B49(21) B*4901 — A*8001 B50(21) B*5001 B51(5) B*5101–5107 B52(5) B*52011,52012 B53 B*5301 B54(22) B*5401 B55(22) B*5501–5503 B56(22) B*5601,5602 B57(17) B*5701–5704 B58(17) B*5801,5802 B59 B*5901 B67 B*67011,67012 B73 B*7301 B78 B*7801,7802
- 14. SITIOS DE VARIACIÓN ALÉLICA
- 15. Caucásico Africano Asiático HLA-A1 15.18 5.72 4.48 HLA-A2 28.65 18.88 24.63 HLA-A3 13.38 8.44 2.64 HLA-A28 4.46 9.92 1.76 HLA-A36 0.02 1.88 0.01 Frecuencia (%)Grupo de alelos DISTRIBUCIÓN DE ALELOS HLA-CLASE I
- 16. Moléculas del CMH Clase I No Clásicas (CMH-Ib) • HLA-G, HLA-E, HLA-F • Bajo nivel de polimorfismo • Expresión tisular restringida • Dominios citoplasmáticos más cortos que los de las moléculas Clase Ia • Conservación de residuos de unión a Linfocitos T CD8+
- 17. HLA-DR HLA-DQ HLA-DP Serología Alelos Serología Alelos Serología Alelos Cadena α DRA*0101–0102 DQA1*0101–0105 DPA1*0103–0104 DQA1*0201 DPA1*0201–0202 DQA1*0301–0303 DPA1*0301 DQA1*0401 DPA1*0401 DQA1*0501–0503 DQA1*0601 Cadena β DR1 DRB1*0101–0104 DQ5(1) DQB1*0501–0504 DPw1 DPB1*0101 DR15(2) DRB1*1501–1505 DQ6(1) DQB1*0601–0611 DPw2 DPB1*0202–0202 DR16(2) DRB1*1601–05 DQ2 DQB1*0201–0203 DPw3 DPB1*0301 DR3 DRB1*0301–0308 DQ3 DQB1*0301–0306 DPw4 DPB1*0401–0402 DR4 DRB1*0401–0423 DQ4 DQB1*0401–0402 DPw5 DPB1*0501 DR11(5) DRB1*1101–1127 DPw6 DPB1*0601 DR12(5) DRB1*1201–1204 — DPB1*0801–4101 DR13(6) DRB1*1301–1312 — DPB1*4401–6501 DR14(6) DRB1*1401–1425 DR7 DRB1*0701 DR8 DRB1*0801–0813 DR9 DRB1*0901 DR10 DRB1*1001 DR52 DRB3*0101 DRB3*0201–0205 DRB3*0301 DR53 DRB4*0101–0103 DRB4*01011–02N DR51 DRB5*0101–0105 DRB5*0201–0203 TIPIFICACION HLA CLASE II: SEROLOGIA Vs BIOLOGIA MOLECULAR
- 18. Negro Caucasico Oriental Amerindio DQ2 17.17 20.76 9.46 2.4 DQ8/9(3) 7.54 10.43 13.54 18.55 DQ7/(3) 17.84 21.62 28.43 51.05 DQ4 8.74 3.67 5.9 8.85 DQ5/6(1) 45.39 39.47 36.29 10 PorcentajesAlelos DISTRIBUCION DE ALELOS HLA - DQ
- 19. DISTRIBUCIÓN DE ALELOS HLA-DRB1 Negro Caucásico Oriental Amerindio DRB1*01 5.46 9.42 2.98 1.50 DRB1*03 13.99 11.11 5.02 3.10 DRB1*04 10.51 12.82 12.99 40.00 DRB1*07 9.23 13.17 5.77 0.75 DRB1*08 4.80 3.68 6.49 4.25 DRB1*09 1.96 1.36 9.43 9.50 DRB1*10 2.01 1.34 1.54 0.00 DRB1*11 15.74 13.36 7.74 11.65 DRB1*12 4.44 2.32 13.49 0.75 DRB1*13 14.29 10.23 4.88 6.05 DRB1*14 1.59 3.16 7.69 6.15 DRB1*15 9.91 10.73 14.35 1.85 DRB1*16 1.33 3.60 1.36 1.10 PorcentajesAlelos
- 20. HERENCIA
- 21. CODOMINANCIA GENES DEL COMPLEJO MAYOR DE HISTOCOMPATIBILIDAD H M
- 22. GENES DEL COMPLEJO MAYOR DE HISTOCOMPATIBILIDAD Como se heredan β α α αα β β αα β α α αα β β αα α α α α α α B2MG A C BDP DQ DR CIS TRANS β α β α β α β α β α β α β α αβ DP DQ DR B C A ANTIGENOS MHC GENES MHC
- 23. Organización de los genes HLA dentro del Complejo MHC DRB1 DR1 DR51 DR52 DR53 DR8 gen pseudo-genes genes pseudogen gen DRB1 DRB1 DRB1 DRB1 DRB6 DRB6 DRB6 DRA DRB5 DRB9 DRA DRB2 DRB3 DRB9 DRA DRB7 DRB8 DRB4 DRB9 DRA DRA DRB9 antígeno asociado
- 24. GENES DEL COMPLEJO MAYOR DE HISTOCOMPATIBILIDAD Como se heredan los haplotipos A1 B1 B2 B3 B4 B5 B6 B9B7 B8 B10 A1/B1 A1/B3 DR3 (DRB1*03) DR52(DRB3*) DR11 (DRB1*11) DR12 (DRB1*12) DR13 (DRB1*13) DR14 (DRB1*14) A1/B1 A1/B4 DR4 (DRB1*04) DR7 (DRB1*07) DR53 (DRB4*) DR9 (DRB1*09) A1/B1 A1/B5 DR15(DRB1*15) DR51(DRB5*) DR16(DRB1*16)
- 25. ESTRUCTURA MHC CLASE I Y CLASE II
- 26. α 2 25 - 80 β microglobulina 25 - 80 α 3 203 - 259 α 1 α 2 25 - 80 β microglobulina 25 - 80 α 3 203 - 259 α 1 Molécula delComplejo Mayor de Histocompatibilidad Clase I (MHC)
- 27. RESIDUOS QUE CONFORMAN EL BOLSILLO DE UNION DE PEPTIDOS DE LAS MOLECULA HLA-CLASE I Bolsillo Posicion de Anclaje en el Péptido A 1 B 2 C 6 D 3 E 7 F 77 80 81 84 95 116 123 143 146 147 Residuos que Forman el Bolsillo 5 7 59 63 66 99 159 163 167 171 7 9 24 25 34 45 63 66 67 70 99 9 70 73 74 97 99 113 114 155 156 159 160 97 114 147 152 156 Carboxi-terminal
- 28. β 117 - 173 β 15 - 79 α 107 - 163 Molécula Molécula del Complejo Mayor de Histocompatibilidad clase II (MHC clase II)
- 30. Posición Relativa en el Bolsillo Residuos que Forman el Bolsillo de la Cadena α Residuos que Forman el Bolsillo de la Cadena β 1 7 32 34 43 85 86 89 90 4 9 13 70 71 74 78 6 11 62 65 66 9 11 13 7 28 47 61 67 71 9 69 72 73 76 9 57 RESIDUOS QUE CONFORMAN EL BOLSILLO DE UNION DE PEPTIDOS DE LA MOLECULA HLA- DRβ1*01
- 31. Sitio de unión del péptido de las moléculas MHC clase I y II
- 32. POCKETS O BOLSILLOS CLASE I CLASE II NOMENCLATURA DE LOS BOLSILLOS DE UNIÓN DE PEPTIDOS EN LAS MOLECULAS MHC
- 33. V85 G86 F32 W43 V86 I 7 F24 F89 W43 F89 V85 F32 F24 T90 W F Y I L M V I 7T90 POCKET 1 POLIMORPHISM and PREFERENTIAL AAs
- 34. N62 Y26 Q9 Q9 Q70 E28 A73 R13 F13 Y78 K71 F26 Q70 S13 Y78 L26 A74 A73 A73 F26 Q N M V L F Y I N72 R71 POCKET 4 POLIMORPHISM and PREFERENTIAL AAs N62 D ILVADE Q9 Y78 N62 Q9 G73 K71 A74 R74 D28 H13 Y78 Q70 D28 D28 A74 Q70 A71
- 35. N69 W9 K71 L70 F13 C30 N62 Q9 V65 K71 D66 E28 E11 E28 S11 TSAGP KRHQNE L11 V65 POCKET 6 POLIMORPHISM and PREFERENTIAL AAs N69 E11 E9 Y30 Q9 D66 N62 S13
- 36. Y60 E59 W61 E9 E71 A68 L70 K75 M73 N37 S77 E59 H56 S57 H68 D57 I72 R76 Y60 W61 L70 K75 S77 R76 L7 MLTIV EDSA H9 Y37 P56 POCKET 9 POLIMORPHISM and PREFERENTIAL AAs
- 39. Sα53 Nα62 Nα69 Rα76 Dβ57 Wβ61 Kβ71 Nβ82 Hβ81 Sα53 Nα62 Nα69 Rα76 Dβ57 Wβ61 Kβ71 Nβ82 Hβ81 Interacción del péptido 10021 con HLA-DRB1*0401
- 40. INTERACCION PEPTIDO - MHC CLASE I CLASE II
- 41. EL POLIMORFISMO ALELICO SE CONCENTRA EN EL SITIO DE UNION DE PEPTIDOS ANTIGENICOS
- 42. RESUMEN 1. Los genes de MHC consisten de loci genéticos que codifican muchas de las proteínas involucradas en la presentación de antígenos a las células T. 2. La principal característica de los genes MHC es su amplio polimorfismo que garantiza la capacidad del organismo para vigilar una variedad de antígenos. 3. Al menos tres propiedades de las moléculas MHC son afectadas por el polimorfismo : • El rango de péptidos unidos. • La conformación del péptido unido. • La interacción de la molécula MHC directamente con el TCR. Así, la naturaleza altamente polimórfica del MHC tiene consecuencias funcionales y un papel crítico en la respuesta inmune.
- 45. PROCESAMIENTO Y PRESENTACION EN MHC CLASE I
- 46. Presentación antigénica en Clase I del MHC Antígeno viral Ribosomas Proteinas virales Proteasoma Péptidos rER Golgi Linfocito T CD8+ Citosol
- 47. PROTEASOMA
- 48. PROCESAMIENTO EN CLASE I calnexina Clase I MHC CITOSOL RETICULO ENDOPLASMICO β2m NUCLEO Proteinas antigènicas PROTEOSOMA péptidos Vesícula a la superficie calreticulina TAP tapasina
- 50. PROCESAMIENTO Y PRESENTACION EN MHC CLASE II
- 51. Esquema general : Presentación de péptidospor parte de moléculas MHC clase II EC Péptido antigénico ER MIIC MIIC MIIC
- 52. Presentación antigénica en Clase II del MHC RE Linfocito T CD4+ Citosol Macropinocitosis Endocitosis mediada por receptor Fagocitosis Micropinocitosis MIIC α β Ii Complejo MHC Cadena α−β-Ii Catepsinas CLIP HLA DM-DO Antìgenos Protèicos Péptidos Immunological Reviews Vol 172:109-120
- 53. Cadena Invariable (Ii) COOHIi NH2 Transmembrane CLIP Trimerization Iip22 Iip10 CLIP NonNon--cysteincystein proteasasproteasas CysteinCystein proteasasproteasas CathepsinCathepsin SS CathepsinCathepsin LL
- 54. HLA-DM Libera CLIP del MHC-II Denzin LK, Cresswell P. Cell 1995 Jul 14;82(1):155-65 péptido CLIP
- 55. HLA-DM Estabiliza MHC-II Vacías Denzin LK, Hammond C, Cresswell P. J Exp Med 1996 Dec 1;184(6):2153-65
- 56. HLA-DM selecciona péptidos antigénicos para MHC-II
- 57. CARACTERÍSTICAS FUNCIONALES DE DM - DO HLAHLA--DM Libera CLIP del MHCDM Libera CLIP del MHC--IIII HLAHLA--DM Estabiliza MHCDM Estabiliza MHC--II VacíasII Vacías HLAHLA--DM SeleccionaDM Selecciona PPéptidoséptidos AAnntitigénicos para MHCgénicos para MHC--IIII HLAHLA--DO Regula la función de DMDO Regula la función de DM
- 58. RESUMEN 1. Existen dos sistemas bien definidos en la inmunidad adaptativa para procesar y presentar antígenos: MHC clase I y clase II 2. Clásicamente péptidos presentados por moléculas MHC clase I inducen la activación de respuesta citotóxica mediante la activación de células T CD8+ 3. Las moléculas MHC clase I presentan péptidos provenientes del procesamiento de proteínas en la vía citosólica 4. La inmunidad mediada por células HLA clase I puede darse en todas las células de los vertebrados excepto en las no nucleadas como los eritrocitos.
- 59. CARACTERIZACION MOLECULAR DEL COMPLEJO MAYOR DE HISTOCOMPATIBILIDAD EN EL MODELO Aotus nancymaae
- 61. Suárez CF, et al. Tissue Antigens 2003:61:362 Alineamiento de las proteínas de los dominios α1 y α2 del MHC Clase I obtenida de la traducción de las secuencias de nucleótidos de las tres especies de Aotus.
- 62. Diagrama en cinta de los grupos de secuencias Ao-g1 y Ao-g2 del CMH Clase I identificados en Aotus. Ao-g1 Ao-g2 Suárez CF, et al. Tissue Antigens 2003:61:362
- 64. 290 300 310 320 330 340 16 -1 10 20 30 40 50 60 13070 80 90 100 110 120 210 220 230 240 250 260 270 280 LEADER PEPTIDE 140 150 160 170 180 190 200 ALPHA 1 DOMAIN ALPHA 2 DOMAIN ALPHA 3 DOMAIN TRANSMEMBRANE DOMAIN CYTOPLASMIC DOMAIN
- 65. • Las moléculas de CMH I de Aotus, al igual que los loci clásicos de los demás primates analizados, presentan selección positiva en la región PBR y negativa en la no PBR. •Conservación de algunas propiedades químicas en posiciones críticas para la unión peptídica entre las secuencias de Aotus y las de humano CMH Ia, sugiere que pueden unir similares clases de péptidos. CONCLUSIONES
- 67. Alineamiento de la secuencia de amino ácidos del exón 2 del MHC- DPB1 obtenida a partir de traducir la secuencia de nucleótidos. Díaz D, et al. Immunogenetics:2002:54:251
- 68. Alineamiento del exón 3 del MHC-DPB1 deducida de la secuencia de nucleótidos. Díaz D, et al. Immunogenetics:2002:54:251
- 70. Alineamiento de la proteína de Aona-DQA1 obtenida de la traducción de la secuencia de nucleótidos Díaz D, et al. Immunogenetics:2000:51:528
- 71. Díaz D, et al. Immunogenetics:2000:51:528 Alineamiento de la secuencia de aminoácidos de Aona- DQB1/2 obtenida de la traducción de la secuencia de nucleótidos
- 73. Owl monkey MHC-DRB domain reveals high similarity whit some human HLA-DRB lineages Esperanza Trujillo*‡, Carlos F. Suárez *‡, Mónica Estupiñán*, Juan Baquero*, Carlos Parra*, Raúl Rodríguez*, and Manuel E. Patarroyo *† Submitted: Journal of Immunology Fundación Instituto de Inmunología (FIDIC)
- 74. 10 20 30 40 50 60 70 80 90 HLA-DRβ1*-0403 F L E Q V K H E C H F F N G T E R V R F L D R Y F Y H Q E E Y V R F D S D V G E Y R A V T E L G R P D A E Y W N S Q K D L L E Q R R A E V D T Y C R H N Y G V V E S F T V Q RR Aona DRB*W1040101-22822-13 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - N - - - - - - - - - - - - - F - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - M - D - - P Q - - - - - - - - - - - - - - - - - - -- Aona DRB*W1040102-20465-7 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - N - - - - - - - - - - - - - F - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - M - D - - - Q - - - - - - - - - - - - - - - - - - -- Aona DRB*W1040103-20465-3 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - N - - - - - - - - - - - - - F - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - I Y Y - - - Q - - - - - - - - - - - - - - - - - - -- Aona DRB*W1040104-20718-3 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - N - - - - - - - G - - - - - F - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - M - D - - - Q - - - - - - - - - G - - - - - - -- Aona DRB*W1040105-20768-1 - - - - - - - - - - - - - S - - - - - - - - - - - - - N - - - - - - - - - - - - - F - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - M - D - - - Q - - - - - - - - - - - G - - - - - - -- Aona DRB*W1040106-20531-22 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - N - - - - - - L - - - - - - F - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - M - D - - - Q - - - - - - - - - - - G - - - - - - -- Aona DRB*W1040107-20531-15 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - N - - - - - - - - - - - - - F - - - - - - - - - - - G H - - - - - - - M - D - - - Q - - - - - - - - - - - G - - - - - - -- Aona DRB*W1040108-20512-1 - - - - - - - D - - - - - - - - - - - - - - - - - - - N - - - - - - - - - - - - - F - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - M - D - - - Q - - - - - - - - - - - G - - - - - - -- Aona DRB*W1040109-20466-5 - - - K - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - N - - - - - - - - - - - - - F - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - M - D - - - Q - - - - - - - - - - - G - - - - - - -- Aona DRB*W1040110-20531-23 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - N - - - - - - - - - - - - - F - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - M - D - - - Q - - - - - - - - - - - G - - - - - - -- Aona DRB*W1040111-21956-1 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - N - - - - - - - - - - - - - F - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - M - D - - - Q - - - - - - - - - - - G - - - - - - -- Aona DRB*W1040112-20768-12 S - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - N - - - - - - - - - - - - - F - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - M - D - - - Q - - - - - - - - - - - G - - - - - - -- Aona DRB*W1040114-20515-1 - - - - - - - - - - - - - - - - - - E - - - - - - - - N - - - - - - - - - - - - - F - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - M - D - - - Q - - - - - - - - - - - G - - - - - - -- Aona DRB*W1040301-20249-12 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - I H N - - - V - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 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- - - - - - - - - - L - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - D - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - R - - - - - - - - - - - - -- Aoni DRB*W130107-21921-5 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - D - - - - - - - - - - I - - - - - - - - - - - R - - - - - - - - - - - - -- Aoni DRB*W130201-22490-7 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - M - - - - R - - - - - A - - - - - - -- Aoni DRB*W130302-16797-1 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - D - - - W - - - - - - - - - - - - - - - - - - R - - - - - - - - - - - - -- Aoni DRB*W130301-16797-8 - - S - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - D - - - W - - - - - - - - - - - - - - - - - - R - - - - - - - - - - - R -- Aovo DRB*W130101-21089-2 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - D - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - R - - - - - - - - - - A - -- Aovo DRB*W130102-20789-1 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - D - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - R - - - - - - - - - - - - -- Aovo DRB*W130501-20423-3 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - F - - - - - - - - - - - - - - - - - - R T - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -- Aovo DRB*W130502-20423-7 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - F - - - - - - - - - - - - - - - - - - R T - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -- Aovo DRB*W130503-20423-4 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - F - - - - - - - - - - - - - - - - - - R T - - - - - - - - - - - - - - - - - - - S F - - - - - - - - - - - - - - -- DRB7*02a * F L E Q A K S E C H F F N G T E R V R Y L D R Y F Y N Q E E Y V R F D S D V G E L R A V T E L G R P D A Q Y W N S Q K D F L E D H R A A V D T Y C R H N Y G V G E * * * * * ** Aona DRB*W70301-20559-2 R - - - - - - - - - Y - - - - - - - - - - - - - - - - - - K - - - - - - - - - - - F - - - - - - - - R T - E - - - - - - - - - - - R - - - - - - - - K - - - - - - - S F T V Q RR Aoni DRB*W70301-20596-4 R - - - - - - - - - Y - - - - - - - - - - - - - - - - - - K - - - - - - - - - - - F - - - - - - - - R T - E - - - - - - - - - - - R - - - - - - - - K - K - - - - - S F T V Q RR SECONDARY STRUCTURE T 5 ALFA 1 ALFA 2 RANDOM COILBETA 3 TURN 3 B4 T4BETA 1 TURN 1 BETA 2 T2 DRB*W13DRβ*W-4DRβ*W-101DRβ*W-301DRβ*W-11DRβ*W-304701-2DRβ*W-104DRβ*W-303
- 75. 9 7 9 7 6 9 ¤ 6 6 ¤ 6 ¤ 6 7 4 4 4 ¤ 4 6 6 ¤ 6 7 ¤ ¤ 9 9 7 ¤ 4 7 ¤ ¤ 9 ¤ 9 ¤ 9 7 7 ¤ ¤ 7 ¤ 4 ¤ ¤ 4 6 4 ¤ 4 ¤ 4 4 ¤ 4 1 ¤ 1 ¤ 1 1 ¤ 1 ¤ ¤ 1 ¤ 1 1 Ao-DRB*W104HLA-DRB1*04Ao-DRB*W304HLA-DRB1*03 9 7 9 7 6 9 ¤ 6 6 ¤ 6 ¤ 6 7 4 4 4 ¤ 4 6 6 ¤ 6 7 ¤ ¤ 9 9 7 ¤ 4 7 ¤ ¤ 9 ¤ 9 ¤ 9 7 7 ¤ ¤ 7 ¤ 4 ¤ ¤ 4 6 4 ¤ 4 ¤ 4 4 ¤ 4 1 ¤ 1 ¤ 1 1 ¤ 1 ¤ ¤ 1 ¤ 1 1 Logos obtenidos a partir de las secuencias de los Aotus (Ao-DRB*W) y de las secuencias de humanos (HLA-DRB)
- 76. Ao-DRB*W11HLA-DRB1*08-14 9 7 9 7 6 9 ¤ 6 6 ¤ 6 ¤ 6 7 4 4 4 ¤ 4 6 6 ¤ 6 7 ¤ ¤ 9 9 7 ¤ 4 7 ¤ ¤ 9 ¤ 9 ¤ 9 7 7 ¤ ¤ 7 ¤ 4 ¤ ¤ 4 6 4 ¤ 4 ¤ 4 4 ¤ 4 1 ¤ 1 ¤ 1 1 ¤ 1 ¤ ¤ 1 ¤ 1 1 9 7 9 7 6 9 ¤ 6 6 ¤ 6 ¤ 6 7 4 4 4 ¤ 4 6 6 ¤ 6 7 ¤ ¤ 9 9 7 ¤ 4 7 ¤ ¤ 9 ¤ 9 ¤ 9 7 7 ¤ ¤ 7 ¤ 4 ¤ ¤ 4 6 4 ¤ 4 ¤ 4 4 ¤ 4 1 ¤ 1 ¤ 1 1 ¤ 1 ¤ ¤ 1 ¤ 1 1 Ao-DRB*W101HLA-DRB1*01Ao-DRB*W701HLA-DRB7 9 7 9 7 6 9 ¤ 6 6 ¤ 6 ¤ 6 7 4 4 4 ¤ 4 6 6 ¤ 6 7 ¤ ¤ 9 9 7 ¤ 4 7 ¤ ¤ 9 ¤ 9 ¤ 9 7 7 ¤ ¤ 7 ¤ 4 ¤ ¤ 4 6 4 ¤ 4 ¤ 4 4 ¤ 4 1 ¤ 1 ¤ 1 1 ¤ 1 ¤ ¤ 1 ¤ 1 1
- 77. %mean %min %max %mean %min %max Ao-DRB*W104 vs. HLA-DRB1*04 95 91 98 93 80 100 Ao-DRB*W304 vs. HLA-DRB1*03 92 88 95 85 77 91 Ao-DRB*W302 vs. HLA-DRB3 92 89 94 84 77 91 Ao-DRB*W11 vs. HLA-DRB1*08 92 88 96 83 74 91 Ao-DRB*W303 vs. HLA-DRB3 91 86 94 83 71 91 Ao-DRB*W301 vs. HLA-DRB3 90 86 93 84 74 91 Ao-DRB*W11 vs. HLA-DRB1*11 90 85 95 83 71 91 Ao-DRB*W11 vs. HLA-DRB1*13 90 85 96 81 71 91 Ao-DRB*W701/02 vs. HLA-DRB1*07 90 87 93 80 74 88 Ao-DRB*W101 vs. HLA-DRB1*01 90 84 94 80 74 88 Ao-DRB*W11 vs. HLA-DRB1*14 89 85 96 80 68 91 Ao-DRB*W4 vs. HLA DRB1*10 88 84 89 74 68 80 Ao-DRB*W4 vs. HLA DRB4 88 83 91 72 65 80 β domain Pockets HumanOwl Monkey Promedio y Rango de homología entre Ao-DRβ y HLA-DRβ en el dominio β y posiciones de los Pockets
- 78. NEW ALLELLES AOTUS DRB*W NEW ALLELLES AOTUS DRB*W 104 303 304 301 7 11 4 101 703 1301 303 304 301 7 11 4 101 703 1301 16606 A. nancymaae 6 1 2 3 21709 A. nancymaae 7 1 1 16770 A. nancymaae 6 2 2 21718 A. nancymaae 5 1 1 20211 A. nancymaae 5 1 1 21737 A. nancymaae 10 1 1 20249 A. nancymaae 9 2 2 21739 A. nancymaae 10 1 1 2 20253 A. nancymaae 7 1 1 21741 A. nancymaae 8 2 2 20273 A. nancymaae 5 1 1 21843 A. nancymaae 10 1 1 1 3 20297 A. nancymaae 5 1 1 21876 A. nancymaae 8 1 1 20300 A. nancymaae 13 3 1 4 21884 A. nancymaae 12 1 1 20308 A. nancymaae 13 1 3 4 21885 A. nancymaae 7 1 1 20328 A. nancymaae 7 1 1 21923 A. nancymaae 9 1 1 20337 A. nancymaae 5 1 1 2 21936 A. nancymaae 8 2 2 20371 A. nancymaae 5 1 1 21955 A. nancymaae 10 1 1 20391 A. nancymaae 8 1 1 21956 A. nancymaae 5 2 2 20397 A. nancymaae 8 1 1 21990 A. nancymaae 6 1 1 20426 A. nancymaae 5 1 1 22025 A. nancymaae 6 1 1 20431 A. nancymaae 5 1 1 22061 A. nancymaae 7 1 1 2 20439 A. nancymaae 5 2 1 3 22414 A. nancymaae 5 1 1 20440 A. nancymaae 7 1 1 22417 A. nancymaae 14 3 3 20444 A. nancymaae 15 2 2 22418 A. nancymaae 9 1 1 20465 A. nancymaae 17 3 1 4 22492 A. nancymaae 5 1 1 20466 A. nancymaae 5 1 1 22573 A. nancymaae 5 1 1 20473 A. nancymaae 11 1 1 2 22589 A. nancymaae 13 1 1 20480 A. nancymaae 7 1 1 2 22822 A. nancymaae 6 1 1 2 20482 A. nancymaae 14 1 1 2 4 16584 A. nigriceps 8 1 1 1 1 4 20494 A. nancymaae 7 1 1 16797 A. nigriceps 6 2 2 20510 A. nancymaae 7 1 1 20456 A. nigriceps 9 1 1 2 20512 A. nancymaae 5 2 1 1 4 20457 A. nigriceps 8 1 1 20515 A. nancymaae 10 2 2 20483 A. nigriceps 8 1 1 2 20520 A. nancymaae 5 1 1 20506 A. nigriceps 5 1 1 20531 A. nancymaae 22 2 1 1 4 20596 A. nigriceps 10 1 1 1 3 20552 A. nancymaae 17 1 1 2 4 21791 A. nigriceps 11 1 2 3 20559 A. nancymaae 5 1 1 2 20848 A. nigriceps 5 1 1 20577 A. nancymaae 8 1 1 20857 A. nigriceps 9 1 2 3 20605 A. nancymaae 7 0 21915 A. nigriceps 8 3 3 20653 A. nancymaae 9 2 2 21919 A. nigriceps 5 1 1 1 3 20696 A. nancymaae 7 1 1 21920 A. nigriceps 10 1 1 20718 A. nancymaae 12 1 1 21921 A. nigriceps 9 1 1 20719 A. nancymaae 8 1 1 2 22490 A. nigriceps 5 3 3 20731 A. nancymaae 9 1 1 16704 A. vociferans 5 1 1 20750 A. nancymaae 5 1 1 20270 A. vociferans 8 1 1 20768 A. nancymaae 17 3 1 4 20358 A. vociferans 9 1 1 20894 A. nancymaae 11 1 2 3 20423 A. vociferans 11 2 2 20896 A. nancymaae 11 1 1 1 3 20475 A. vociferans 5 1 1 20897 A. nancymaae 9 1 1 20670 A. vociferans 5 1 1 20898 A. nancymaae 5 1 1 20789 A. vociferans 12 1 1 2 20904 A. nancymaae 12 1 1 2 21088 A. vociferans 7 4 4 20928 A. nancymaae 8 1 1 21089 A. vociferans 5 1 1 21100 A. nancymaae 5 1 1 22050 A. vociferans 15 1 1 2 No.CLONES No.Allelles No.CLONES SPECIE Ao-DRB*W Monkey SPECIE Monkey No.Allelles Ao-DRB*W Distribución de los alelos DRB-*W detectados en 96 Aotus.
- 79. Q9 T90 HLA-DRB1*0301 vs Aona DRB1*0311 F26 HLA-DRB1*0401 vs Aona DRB1*W4706 N37Y N37Y A74Q E9F E9F A74Q V85 V85 V85 V85 V86 V86 G86 G86 T90 I7 T90 T90 I7 I7 I7 I31 I31 I31 I31 F32 F32 F32 F32 F24 F24 F24 F24 W43 W43 W43 W43 F89 F89 M Y A D P A M M N62 N62 N62 N62 Q9 Q9 Q9 Q9 S13 H13 H13 S13 V65 D28 D28 D28 D28 A73 Y78 Y78 Y78 Y78 K71 K71 K71 K71 A73 G73 G73 R74 R74 Q70 N69 Y26 F26 Q70 Q70 Q70 Y26 N69 N69 N69 V65 V65 V65 D66 D66 D66 D66 N62 N62 N62 N62 E11 E11 E11 E11 Q9 Q9 Q9 H13 H13 S13 S13 S11 S11 V11 D28 D28 D28 D28 K71 K71 K71 K71 W61 W61 W61 W61 Y60 Y60 Y60 Y60 E9 N69 N69 N69 E9 E9 E9 Y37 Y37 D57 D57 D57 D57 R76 R76 R76 R76 A58 N69 K75 A58 K75 K75 K75 E59 E59 E59 E59 A58 A58 A68 E71 E71 E71 E71 A68 A68 A68 L70 L70 L70 L70 Y30 Y30 Y30 Y30 Pocket 9Pocket 6Pocket 4Pocket 1 Q9 T90 HLA-DRB1*0301 vs Aona DRB1*0311 F26 HLA-DRB1*0401 vs Aona DRB1*W4706 N37Y N37Y A74Q E9F E9F A74Q V85 V85 V85 V85 V86 V86 G86 G86 T90 I7 T90 T90 I7 I7 I7 I31 I31 I31 I31 F32 F32 F32 F32 F24 F24 F24 F24 W43 W43 W43 W43 F89 F89 M Y A D P A M M N62 N62 N62 N62 Q9 Q9 Q9 Q9 S13 H13 H13 S13 V65 D28 D28 D28 D28 A73 Y78 Y78 Y78 Y78 K71 K71 K71 K71 A73 G73 G73 R74 R74 Q70 N69 Y26 F26 Q70 Q70 Q70 Y26 N69 N69 N69 V65 V65 V65 D66 D66 D66 D66 N62 N62 N62 N62 E11 E11 E11 E11 Q9 Q9 Q9 H13 H13 S13 S13 S11 S11 V11 D28 D28 D28 D28 K71 K71 K71 K71 W61 W61 W61 W61 Y60 Y60 Y60 Y60 E9 N69 N69 N69 E9 E9 E9 Y37 Y37 D57 D57 D57 D57 R76 R76 R76 R76 A58 N69 K75 A58 K75 K75 K75 E59 E59 E59 E59 A58 A58 A68 E71 E71 E71 E71 A68 A68 A68 L70 L70 L70 L70 Y30 Y30 Y30 Y30 Pocket 9Pocket 6Pocket 4Pocket 1
- 80. Análisis por citometría de flujo de la expresión del MHC clase II en PBLs de A. nancymaae (A) y en EBV_LCL de humano (B) Díaz D, et al.Immunogenetics:2002:54:251
- 81. MOLECULAS CD1 Y PRESENTACION DE LIGANDOS NO PEPTIDICOS
- 82. MOLECULAS CD1 Y PRESENTACION DE LIGANDOS NO PEPTIDICOS 1. Generalidades 2. Características estructurales de la molécula CD1d murina. 3. Características y requerimientos estructurales de los ligandos presentados por CD1. 4. Tráfico y localización intracelular de las moléculas CD1. 5. Función de las moléculas CD1 en inmunidad microbial.
- 83. Dos Grupos de Moléculas CD1 Park, S and Bendelac, A. Nature. 406 : 788-792 (2000) Humano Conejo Ratón Rata CD1d CD1d CD1d1-d2 CD1d1 CD1d Grupo 2 Humano Oveja Humano Humano Humano CD1c CD1b CD1b CD1a CD1e CD1a CD1b CD1c CD1e Grupo 1
- 84. CD1a C. Langerhans epidermales, Dendríticas bronquiales y derivadas de monocitos. CD1b C. dendríticas de piel, higado, riñon, pulmón y organos linfoides CD1c C. dendríticas de piel, ,higado, riñon, pulmón y organos linfoides C. B (20-50 %) de sangre, amigdalas y bazo Distribución de las Moléculas CD1 en Tejidos
- 85. ESTRUCTURA DE LA MOLECULA CD1d ESTRUCTURA DE LA MOLECULA CD1d
- 91. IDENTIFICACION Y CARACTERIZACION ESTRUCTURAL DE LA MOLECULA CD1b EN Aotus nancymaae
- 93. Expresión de CD1 en A. nancymaae y en humno a patir de PBLs y monocitos derivados de células dendríticas por citometría de flujo usándo anti-CD1b Castillo F, et al. Immunogenetics:2002:54:251
- 94. Comparación de la secuencia de la proteína CD1b de A. nancymaae y de humano deducida a partir de la secuencia de nucleótidos Castillo F, et al. Immunogenetics:2002:54:251
- 95. Estructura tridimensional de la molécula CD1b de A. nancymaae Castillo F, et al.Immunogenetics
- 96. Comparación estructural de CD1a de humano (amarillo), CD1b de humano (azul) y CD1b de A. nancymaae (negra), obtenida por minimización y las proteínas Cd1 de ratón (rosado). Castillo F, et al. Immunogenetics:2002:54:251
- 100. Edith C. Hernández, Carlos F. Suárez, Carlos A. Parra, Manuel A. Patarroyo and Manuel E. Patarroyo Identifiying five different immunoglobulins families in Owl monkeys (Aotus Nancymaae) Immunoglobulin families in Aotus monkeys Fundación Instituto de Inmunología de Colombia (FIDIC) Enviado a Tissue Antigens
- 101. CONCLUSIONES Las moléculas presentadoras de antígeno del sistema inmunitario se caracterizan por ser dímeros que adoptan estructura tridimensional similar entre si. Los resultados experimentales de nuestro Laboratorio muestran que las moléculas que participan en el control de la inmunidad del mono Aotus tienen una altísima homología con su contra parte en el Humano. Finalmente nuestros resultados validan el Aotus como modelo experimental para el desarrollo de vacunas humanas y en general para desarrollar agentes profilácticos para humano.