Manual de-practicas-biometrica-hermatica(2sem)

T.L.C. Sara E. Cambero Martínez
C.B.T.i.s. 41 “Belisario Domínguez”
01/02/2012
Manual de prácticas de laboratorio
“Biometría Hemática”
ALUMNO:
GRUPO:

CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLOGICO Industrial
y de Servicios No. 41
BIOMETRIA HEMATICA
PRACTICAS DE LABORATORIO
CUARTO SEMESTRE 2 T.L.C. SARA CAMBERO
Q.F.B. JORGE ECHAVE
Guia práctica para flebotomia..................................................................................................... 3
INTRODUCCIÓN ....................................................................................................................... 3
LA SEGURIDAD PRIMERO ........................................................................................................... 3
REQUISITOS GENERALES PARA LA SEGURIDAD PERSONAL............................................................... 3
MEDIDAS ESPECÍFICAS DURANTE LA FLEBOTOMÍA ......................................................................... 3
FACTORES PRE-ANALÍTICOS QUE AFECTAN LAS PRUEBAS: .............................................................. 4
INTERFERENCIAS:.................................................................................................................... 5
IDENTIFICACIÓN DEL PACIENTE................................................................................................... 5
LA PREPARACION DEL PACIENTE: ............................................................................................... 6
E T I C A:............................................................................................................................. 7
PREPARACIÓN DEL EQUIPO ....................................................................................................... 7
EL PROCEDIMIENTO DE LA FLEBOTOMÍA....................................................................................... 8
PROBLEMAS DURANTE LA EXTRACCIÓN VENOSA. ........................................................................ 10
LA PUNCIÓN CAPILAR: ............................................................................................................ 13
ORDEN DE LLENADO DE LOS TUBOS:......................................................................................... 15
CONSIDERACIONES EN PACIENTES HOSPITALIZADOS:................................................................... 15
EXTRACCIÓN SANGUÍNEA EN PACIENTES CON VENOCLISIS: ........................................................... 16
EL ETIQUETADO: ................................................................................................................... 16
CUIDADOS DEL PACIENTE POSTERIOR A LA EXTRACCIÓN: ............................................................. 17
TRANSPORTE DE LA MUESTRA ................................................................................................. 17
AL TERMINAR SU LABOR.......................................................................................................... 17
Práctica 1 F l e b o t o m i a................................................................................................... 18
Práctica 2 Recuento eritrocitario y determinacion de hematocrito ............................................. 23
Práctica 3 Dosificacion de hemoglobina .................................................................................. 30
Práctica 4 Formula roja y clasificacion de anemias .................................................................. 35
Práctica 5 Eritrosedimentacion globular y recuento de reticulocitos........................................... 39
Práctica 6 Recuento de leucocitos totales ............................................................................... 44
Práctica 7 Recuento diferencial de leucocitos.......................................................................... 49
Anexo 1.................................................................................................................................. 54
Anexo 2.................................................................................................................................. 56
Bibliografia:............................................................................................................................. 57

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
GUIA PRÁCTICA PARA FLEBOTOMIA
Introducción
La flebotomía constituye una de las etapas más importantes en el trabajo del laboratorio clínico. Por una parte
representa el primer contacto entre el laboratorio y sus pacientes y desde el punto de vista de la muestra
sanguínea, la enorme importancia que conlleva una muestra apropiadamente colectada, la seguridad de su
origen y el correcto envasado y transporte, constituyen factores fundamentales en la evaluación e informe de los
exámenes a realizar.
El personal que ha de realizar la colección de la muestra sanguínea, debe tener presente que en el trato correcto
del paciente, su orientación y la habilidad para realizar su trabajo, está la cara del Laboratorio Clínico ante la
comunidad que ha de servir.
El presente protocolo pretende ser una guía para el personal encargado de la colección de las muestras
sanguíneas, tal que ésta función sea estandarizada en sus aspectos técnicos y estableciendo las pautas
necesarias en bioseguridad y de aquellos factores que pueden afectar la calidad de la muestra.
La seguridad primero
Tú eres un recurso altamente entrenado y valioso.
No permitas que un accidente ponga en peligro tu vida.
Tú eres el único que puede practicar y hacer cumplir los procedimientos de seguridad para tu propia
protección y la de tus compañeros de trabajo.
Requisitos generales para la seguridad personal
 Vestimenta y accesorios: Es obligatorio el utilizar bata durante todo el tiempo de trabajo en el laboratorio.
Cuando se va a extraer muestra, es requisito la utilización de guantes de protección. Es recomendable el uso
de lentes de protección.
 No se permite comer ni tomar en el área de trabajo.
 No se permite fumar.
 Aplicación de cosméticos: No permitido en el área de trabajo.
 Lentes de contacto: No se permite su manipulación en el área de trabajo.
 Cabello: Se recomienda que las damas aseguren por detrás su cabello, de forma tal que no entren en
contacto con superficies contaminadas.
 Lavado de las manos: Las manos deben ser lavadas con frecuencia durante todo el día de labor, antes y
después del contacto con los pacientes, antes de comer o tomar y antes de salir del laboratorio.
Medidas específicas durante la flebotomía

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
 Practique las precauciones universales mínimas con todo paciente a ser atendido.
 Toda muestra debe ser considerada potencialmente infecciosa y se deben tomar las precauciones que
garanticen la seguridad del flebotomista y de los pacientes.
 Limpie su mesa antes de iniciar sus labores.
 Si el paciente tose con frecuencia, colóquese una mascarilla.
 Evite tocar áreas visiblemente infectadas del paciente.
 Tome precauciones al manipular las agujas y lancetas.
 No deje agujas y lancetas usadas en la mesa de trabajo; descartar inmediatamente en su contenedor
apropiado.
 No coloque el protector a la aguja.
 Si hay derrame de sangre, limpie con Hipoclorito de sodio al 10%.
 Limpie el torniquete con alcohol etílico después de cada extracción.
 Cambie los guantes si se han manchado de sangre u otros fluidos corporales.
 Siempre que sea posible, cambie los guantes entre pacientes.
 Al terminar su labor, quítese los guantes y lávese bien las manos.
 Si ocurre un pinchazo con aguja conteniendo sangre de un paciente HIV positivo, informe inmediatamente al
jefe del laboratorio y diríjase a la clínica del empleado o a riesgos profesionales.
 Evite que los niños toquen o jueguen con los equipos de la flebotomía.
Factores pre-analíticos que afectan las pruebas:
Es importante tener presente que existen muchos factores que pueden afectar las pruebas de laboratorio,
algunos de los cuales pueden ser evitados con una adecuada orientación al paciente y una correcta técnica de
extracción sanguínea. A continuación enumeraremos algunos de estos factores y recomendaciones al respecto.
1. La ansiedad y la tensión mental o física puede afectar los niveles de muchos componentes sanguíneos.
Tal es el caso de las concentraciones de Prolactina, Cortisol, Catecolamina, Aldosteronas y Renina.
También puede elevar la cuenta de leucocitos.
2. Se recomienda evitar ejercicios físicos vigorosos durante 3 días previos a la toma de muestra, ya que
pueden alterar los niveles de CPK, LDH, AST potasio, glucosa, lactato, prolactina y cortisol.
3. El ritmo diurno de algunos fluidos corporales muestran fluctuaciones durante el día. Por ejemplo los
niveles de cortisol son altos en la mañana, pero decrecen en la tarde. Los niveles de hierro tienden a
caer durante el día.
4. La situación dietética del paciente puede ser importante para ciertas pruebas. Tal es el caso de las
variaciones en la concentración de lípidos después de una comida grasosa. El suero sanguíneo muestra
una apariencia lechosa debido a la presencia de triglicéridos y quilomicrones. Estos sueros
hiperlipidémicos influyen en las mediciones, por lo que se recomienda tomar muestra después de un
periodo de ayuno, usualmente de toda la noche.
5. La ingestión de etanol induce cambios en la composición de los lípidos corporales. De particular interés
son las enzimas hepáticas, como la fosfatasa alcalina, transaminasas, gama glutamil transferasa y otros
componentes como la glucosa, triglicéridos, uratos y lactato.
6. El fumar puede producir variaciones en los resultados de algunos componentes como la lipasa, amilasa,
colesterol, glucosa e igualmente afecta la absorción gástrica en la prueba de tolerancia a la glucosa.
7. La cirugía y la inyección intramuscular provoca un aumento en la concentración de creatincinasa.
8. La exploración rectal o la manipulación prostática, puede causar un aumento en la concentración del
antígeno prostático específico.
9. Los anticonceptivos orales afectan profundamente la actividad estrogénica y conducen al aumento de
muchas proteínas como la tiroxina, cortisol y las hormonas sexuales.
10. Medicamentos como barbitúrico y fenitoina, inducen enzimas hepáticas con valores elevados.
11. Evite extraer sangre arriba de una inyección intravenosa previa, ya que las concentraciones de muchos
compuestos pueden resultar erróneamente altos o bajos.

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
12. Evite provocar hemólisis durante el proceso de extracción o llenado de los tubos, lo cual afectará
algunas pruebas relevantes. La hemólisis puede ocurrir también por exceso de residuos del alcohol
utilizado durante la desinfección del sitio a puncionar. También puede ser debido a un incremento en la
fragilidad capilar y alto volumen de células empacadas, especialmente en recién nacidos.
13. Evite agitar con fuerza los capilares para microcolección de muestra, ya que puede provocar su
hemólisis.
14. Evite puncionar en un área con hematoma, fístulas, quemaduras, escoriaciones de la piel, cicatrices o
del costado en que se ha realizado mastectomía reciente.
15. Verifique condiciones de ayuno para las pruebas que lo requieran.
16. Las pruebas seriadas como curvas de tolerancia, post-prandial, post-ejercicios, etc. deben monitorearse
en el tiempo adecuado, por lo que tienen prioridad.
17. En el caso de las pruebas seriadas, deben rotularse los tubos con la hora de toma de la muestra.
Interferencias:
 Los tubos con anticoagulante deben invertirse suavemente y colocarlos en posición vertical, para evitar el
contacto prolongado con el tapón de caucho.
 Algunos compuestos se pueden adsorber al tubo. Tal es el caso de la hormona ACTH y la paratiroidea que se
adsorben al vidrio con facilidad, por lo que se recomienda tubos de plástico.
 Los separadores de suero se utilizan para separar el suero libre del coágulo de sangre. Estos pueden ser de
gel de silicón, poliester o perlas de vidrio. En algunos casos debido a problemas en la centrifugación y a altas
temperaturas, pueden quedar gotas de gel dentro del suero. Se ha demostrado que estas gotas de gel
pueden interferir con algunas mediciones. Es conocido que la progesterona se reduce apreciablemente
cuando se almacena sobre gel por varios días. Igualmente ocurre con la lidocaína, fenobarbital, fenitoina y
Carbamacepina.
 Algunas hormonas polipeptídicas de bajo peso molecular, como la ACTH, glucagón, gastrina y otras
hormonas intestinales, se destruyen rápidamente por enzimas presentes en la sangre. Por lo que es
necesario centrifugar la muestra a baja temperatura, 10 minutos después de la toma y almacenar el suero o
plasma inmediatamente a –20 C.
 Aquellos tubos con anticoagulantes deben ser llenados exactamente hasta la marca, cualquiera sea el
método que se utilice para extraer la sangre, para evitar que la concentración del anticoagulante sea
demasiada alta, tal que afecte el sistema de medición.
Identificación del paciente
Todas las muestras deben ir acompañadas de una solicitud debidamente formulada. La solicitud debe contener la
siguiente información:
a) La identificación completa del paciente:
 Nombre completo
 Sexo
 Número de cédula o seguro social
 Datos para su localización
 Sala y número de cama si está hospitalizado
 Número de teléfono si es ambulatorio
b) Médico solicitante:
 Nombre completo
 Especialidad

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
 Registro
c) Pruebas que se realizarán
d) Es deseable que la solicitud incluya información clínica de utilidad
 Diagnóstico
 Ingestión de drogas
 Restricciones especiales
e) Fecha de orden y fecha de colección
f) Iniciales del flebotomista
g) Hora de extracción.
LA PREPARACION DEL PACIENTE:
La primera impresión y las observaciones inmediatas pueden ser útiles para el flebotomista. Ayudarán a
establecer el tipo de paciente, el sitio de la punción, las precauciones necesarias y la forma correcta para el trato
del paciente.
El paciente espera de usted un trato profesional, cortés y de comprensión, ya que él está frente a usted porque le
aqueja su salud. La comunicación afectiva es determinante en la relación con el paciente.
Hable con el paciente. Explique el procedimiento a seguir.
Identificación del paciente:
La identificación correcta del paciente es obligante. Pregunte su nombre completo y número de cédula o seguro
social. Si se trata de un paciente hospitalizado, observe su brazalete de identificación y su nombre en la cama.
 Vigilancia del paciente:
Observe si el paciente está sudoroso, agitado, sedado.
 Personalidad del paciente:
Observe si el paciente es agresivo, arrogante, conflictivo.
Evite cualquier discusión con el paciente. De ser así, llame al jefe del laboratorio. Trate de calmarlo y sea
comprensivo. Sin embargo, usted siempre tiene la opción de no atender un paciente agresivo que pueda causar
lesión a usted o a sí mismo. Comunique de ésta situación a la persona encargada de la sala.
Si se trata de un niño agresivo o combativo, solicite ayuda para hacer la extracción.

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
E T I C A:
En todo momento debe mantener la ética y confidencialidad del paciente y sus pruebas. Los Códigos de Ética de
los trabajadores de la salud, prohíben estrictamente que los aspectos de salud del paciente sean divulgados con
propósitos no profesionales.
Se deben evitar críticas, temas políticos, atención de asuntos personales y conversaciones que distraigan o
dilaten la adecuada atención del paciente.
No dé preferencia a familiares ni amistades, tal que afecte la atención de los pacientes.
Preparación del equipo
 Tubos de colección: Los tubos están predeterminados para llenarse con un determinado volumen de sangre
por vacío. El tapón de caucho está codificado por color, de acuerdo a su uso o sus aditivos.
TUBO CON TAPON ROJO
USO: Química, Inmunología, Banco de sangre
ADITIVO: Ninguno
TUBO CON TAPON ROJO
USO: Química
ADITIVO: Gel - Separador
TUBO CON TAPON MORADO
USO: Hematología
ADITIVO: Anticoagulante EDTA
TUBO CON TAPON CELESTE
USO: Pruebas de Coagulación
ADITIVO: Anticoagulante Citrato de sodio
 Agujas: Están numeradas dependiendo de su calibre. Para colección de sangre para hemogramas, se
recomienda una aguja de un diámetro de 0.8 mm (21G) para evitar daño a las células. Las agujas de 0.9 mm
a 1.1 mm de diámetro (20G – 19G) se utilizan normalmente para punción venosa en adultos.
 Jeringuillas: De 3, 5, 10 y 20 cc
 Adaptador para tubos-Vacutainer: Se utilizan para tubos al vacío.

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
 Torniquete: Recomendable de 2 tamaños para adultos y niños y de preferencia deben ser planos.
 Alcohol: Etílico o Isopropílico al 70%.
 Algodón
 Gasa
 Guantes
 Curita o venda adhesiva
 Iodo.
 Frascos para hemocultivos.
El procedimiento de la flebotomía
La muestra debe tomarse correctamente y bajo las condiciones más favorables para evitar errores. Esto incluye la
absoluta identificación del paciente, el sitio a puncionar y el volumen a colectar. El paciente debe estar en
posición cómoda, de preferencia en una silla especial para venipunción con descanso para los brazos y si está en
cama, preferiblemente acostado.
Selección del sitio a puncionar:
Al proceder a seleccionar el sitio a puncionar, evite áreas con hematoma, fístulas, quemaduras, escoriaciones de
la piel o cicatrices. Si se trata de un paciente hospitalizado evite tomar muestra de un brazo que se esté utilizando
con venoclisis o del costado en que se ha realizado una mastectomía reciente.
La palpación:
Antes de proceder a puncionar, se debe escoger la vena. La mejor manera es realizando una palpación de las
mismas para esa decisión. Para ello coloque el torniquete 3 a 4 pulgadas por arriba del sitio seleccionado, para
visualizarlas mejor. Debe tener presente en no mantener el torniquete por más de 3 minutos, para evitar la
hemoconcentración.
Las venas más utilizadas para la venipunción, están localizadas en el área antecubital. Entre éstas tenemos:
a) Vena Cubital: Es la más larga y gruesa de todas y es la preferida por bordear la musculatura del
brazo.
b) Vena Cefálica: Tiene iguales características de la anterior, pero es un poco menos gruesa.
c) Vena Basílica: Es más pequeña que las anteriores. Esta vena está cerca de la arteria braquial, por lo
que su punción es riesgosa y su área es más sensible y dolorosa para el paciente.

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
Al palpar hágalo con la punta de sus dedos, tratando de seguir el rastro de las venas. Aquí también son útiles sus
conocimientos en la anatomía de las venas de las extremidades superiores. En ocasiones si no visualiza la vena,
puede forzar la sangre dentro de la vena a través de un suave masaje de abajo hacia arriba.
PALPACIÓN DE LAS VENAS
La Descontaminación:
Una vez que se ha decidido por la vena a puncionar, debe proceder a descontaminar el área con alcohol etílico o
isopropílico al 70% utilizando algodón y con movimientos circulares del interior al exterior. Debe tener presente
que una vez realizada la descontaminación, no debe volver a tocar el área venosa.
DESCONTAMINACION DEL AREA
La punción venosa:
Ahora está preparado para realizar la extracción sanguínea.
El brazo debe estar preferiblemente en posición cómoda horizontalmente. Con el torniquete en posición, haga
que el paciente cierre y abra el puño de 3 a 5 veces para bombear mejor la sangre, y luego que mantenga el puño
cerrado.
Si se trata de un niño, es recomendable colocar 2 dedos de la mano, debajo del codo del paciente, para evitar
que doble el brazo durante la extracción.
Extracción con jeringuilla:
Cuando vaya a proceder a realizar la extracción con jeringuilla, usted debe tener presente el calibre a utilizar y el
tamaño de la jeringuilla según el volumen a extraer.

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
a) Coloque la punta de la aguja en un ángulo de 15 a 30 grados sobre la superficie de la vena escogida y atraviese
la piel con un movimiento firme y seguro, hasta el lumen de la vena.
b) Apretando firmemente la jeringuilla, debe jalar el émbolo con movimiento continuo para extraer la sangre
hasta el volumen requerido. Evite presionar fuertemente la aguja durante la extracción.
c) Afloje el torniquete para que la sangre fluya mejor y remueva la aguja del brazo con movimiento suave al
terminar de colectar, sin apretar el área de la punción con el algodón.
d) Presione el algodón sobre el sitio de la punción aplicando una presión adecuada y no excesiva para evitar
la formación de hematoma.
e) Llenar los tubos en su orden.
f) Descarte la jeringuilla y aguja en un contenedor apropiado.
g) Colocar un curita o venda en el sitio de la punción.
Problemas durante la extracción venosa.
Diversos problemas pueden surgir durante la colección de sangre venosa y pudiera no obtenerse sangre o su
colección sea incompleta.
a) Colocación correcta de la aguja:

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
Coloque la aguja con el bisel hacia arriba
b) Cambio en la posición de la aguja. Movimiento de retroceso que
la saca del lumen venoso.
c) Movimiento hacia delante que atraviesa la vena.
c) Movimiento de la aguja, tal que el bisel de la aguja quede contra la pared de la vena, afectando la entrada de la
sangre
d) Colapso de la vena:
En estos casos, afloje el torniquete para incrementar el flujo sanguíneo, remueva la aguja ligeramente y vuelva a
redireccionarla.
d) Formación de hematoma:
Si se forma un hematoma bajo la piel adyacente al sitio de la punción, afloje el torniquete y retire la aguja. Aplique
presión firmemente sobre el hematoma.
e) Sangre arterial:

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
Pudiera suceder que se atraviese una arteria, en estos casos la sangre se observa de un color rojo brillante.
Retire la aguja y aplique presión por 5 minutos.
Como prevenir los hematomas:
 Puncione solamente la pared superior de la vena.
 Remueva el torniquete antes de remover la aguja.
 Escoja las venas superficiales mayores.
 Aplique presión sobre el sitio de la punción.
Como prevenir la hemólisis:
La hemólisis de una muestra sanguínea puede ocurrir por diversas razones entre las que se pueden enumerar:
o Trauma con una aguja de calibre muy pequeño.
o Por contaminación con agentes antisépticos.
o Agitación violenta o excesiva de los tubos.
o Demasiado tiempo en ser analizadas las muestras o en ser separado el coágulo de sangre.
o Incremento en la fragilidad capilar de los eritrocitos o alto volumen de células empacadas,
especialmente en neonatos.
o Presión excesiva para mejorar el flujo sanguíneo.
o En tubos no llenados al vacío, puede ocurrir hemólisis al llenarlos haciendo una fuerte presión
sobre el émbolo provocando un chorro de sangre muy fuerte.
Los componentes más afectados son aquellos cuya concentración son más altas en las células que en el plasma,
por ejemplo, ión potasio, fosfato, deshidrogenasa láctica, aspartato aminotransferasa, hierro sérico, etc. De más
está decir que la hemólisis afecta en diversa medida la lectura espectrofotométrica de los componentes
sanguíneos.
La hemólisis puede ser prevenida tomando en cuenta los siguientes elementos:
a) Mezcle los tubos con aditivos anticoagulantes lentamente por 5 a 10 veces, inmediatamente después
de ser llenado el tubo.
b) Evite extraer sangre de un hematoma.
c) Acerque el bisel de la aguja a la pared interna del tubo, para evitar el choque fuerte de la sangre
contra el fondo del tubo.
d) Esté seguro que el sitio de la punción esté seco del antiséptico.
e) Evite una punción traumática.
f) Evite la agitación vigorosa de los tubos.
g) Evite el calentamiento de los tubos.

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
Causas de la Hemoconcentración:
o Aplicación prolongada del torniquete. La presión hidrostática causa que algo de agua y
elementos filtrables escapen al espacio extracelular. Esto tiene efectos también sobre el
empaque celular.
o Masaje vigoroso del sitio a puncionar.
o Esclerosis u obstrucción venosa.
Extracción con vacutainer:
En ocasiones, especialmente cuando se requiere colectar muchos tubos para diversas pruebas en secciones
distintas, es sumamente útil el uso del adaptador vacutainer o similar, el cual nos permite llenar cuantos tubos
sean necesarios.
En estos casos, una vez hecha la punción, sostenga firmemente el vacutainer con una mano y con la otra inserte,
llene y retire cuantos tubos requiera.
EXTRACCION CON VACUTAINER
La Punción Capilar:
La obtención de sangre por punción capilar es particularmente útil en las siguientes circunstancias:
1. Si la punción venosa es peligrosa para el paciente.
2. No se puede accesar las venas recomendadas.
3. Las venas se están utilizando para administrar medicamentos.
4. El volumen de sangre requerido no justifica una extracción venosa.
Estas circunstancias se aplican a:
a) Neonatos.
b) Lactantes.
c) Niños.
d) Adultos con quemaduras severas.
e) En pacientes muy obesos.
f) En caso de terapias intravenosas.
La punción cutánea se puede llevar a cabo en:
a) La superficie más lateral o más medial de la planta del pie.
b) La superficie medial plantar del dedo gordo del pie.
c) La superficie lateral del dedo medio o anular, preferiblemente.
d) El lóbulo de la oreja, evitando la mejilla.

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
TIPOS DE PORTA-LANCETA
El procedimiento de la Punción Capilar:
 Una vez escogido el sitio de la punción, puede dar un ligero masaje al área para concentrar la sangre.
 Limpie el sitio con alcohol etílico o isopropílico al 70%.
 Con una mano sostenga el dedo o área a puncionar y con la otra sostenga la lanceta.
 Haga la punción con la lanceta, realizando un movimiento rápido, firme y profundo.
 Después de puncionar, descartar la primera gota de sangre, que contiene líquido tisular, limpiándolo con el
algodón.
 Presione el dedo para hacer salir la sangre, procurando sea de manera ininterrumpida.
 Una vez tomada la muestra, sellar los tubos capilares con sellador o los microtubos con su tapa.
 Los microtubos y capilares con anticoagulantes deben ser invertidos suavemente por lo menos 10 veces para
evitar su coagulación.
 Coloque el algodón sobre el sitio puncionado haciendo presión para parar el sangramiento.
SITIO RECOMENDADO PARA LA PUNCION CAPILAR
Consideraciones adicionales de la punción capilar:
a) La mala circulación causa modificaciones en la concentración de ciertos componentes sanguíneos, por ejemplo
el ión potasio y del fosfato, debido a la contaminación con líquido tisular, causada por la presión que se aplica para
obtener la muestra.
b) Al escoger el sitio de la punción, evite hacerlo en dedos con quemaduras, excoriaciones o cianóticos.
c) Las muestra para mediciones de Ph y gases sanguíneos en tubos capilares de vidrio heparinizados deben ser
llenados sin formación de burbujas de aire. Sellar inmediatamente un extremo del tubo y coloca una pequeña
barra magnética en dirección ascendente dentro del tubo. Colocar en agua con hielo, evitando la contaminación de
la muestra.
PUNCION CAPILAR CON PORTA-LANCETA
Colección en Neonatos:
 El pie del neonato es el sitio apropiado para colectar muestra sanguínea por punción capilar.
 Es recomendable la pre-limpieza del pie con una gasa tibia para incrementar el flujo sanguíneo.

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
 El siguiente diagrama ilustra con el color verde los sitios de punción recomendados.
 Limpie el área seleccionada con alcohol etílico al 70%.
 Mantenga firmemente el pie del neonato para evitar cualquier movimiento.
 Usando una lanceta estéril realice la punción con movimiento rápido, firme y profundo.
 Limpie con el algodón la primera gota obtenida. Utilice una ligera presión para obtener las gotas de
sangre requeridas. No haga presión excesiva o masajes, que puedan provocar que la sangre se diluya
con líquido tisular.
 Llene los microtubos requeridos.
TUBOS DE MICRO-COLECCION
 Al terminar mantenga presión sobre el sitio de la punción con gasa o algodón para parar el
sangramiento.
 Descarte la lanceta en un receptáculo apropiado.
Orden de llenado de los tubos:
La sangre coleccionada debe ser llenada en un orden específico para evitar contaminación cruzada de aditivos
entre los tubos. El orden recomendado es el siguiente:
1. El primer tubo a ser llenado es el de hemocultivo, si también se ha ordenado ésta prueba.
2. Los siguientes tubos corresponden a los tubos sin aditivos, tal es el caso de los tubos con tapón rojo para
química y serología.
3. Los tubos para pruebas de coagulación, indicados por el tapón celeste. Estos tubos Nunca pueden ser los
primeros.
4. Los siguientes tubos son aquellos que contienen aditivos especialmente para evitar coagulación, así:
o 4.1 - Tubo con heparina (Tapón verde oscuro)
o 4.2 - Tubo con EDTA (Tapón color lavanda).
o 4.3- Tubo con Oxalato (tapón verde claro).
Nota: Los tubos con aditivos deben ser rápida y completamente mezclados.
Consideraciones en pacientes hospitalizados:
Los pacientes hospitalizados constituyen el mayor reto para el flebotomista. Ello incluye circunstancias muy
especiales tales como pacientes gravemente enfermos, en ocasiones en estado de coma, con equipo de soporte
respiratorio, quemaduras graves, pacientes psiquiátricos, neonatos en incubadoras, etc. que exigen un esfuerzo
especial al personal encargado de la extracción de sangre.

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
Por todo lo anterior enumeraremos algunas recomendaciones que han de ser tenidas en cuenta al momento de
atender estos pacientes:
a) Debe haber una plena identificación del paciente. Si el paciente está despierto, pregúntele su nombre. En todo
caso debe comprobar la identificación del paciente con el nombre colocado en la cama y su brazalete de
identificación que puede estar en el brazo o el tobillo.
b) Tome en cuenta todos los aspectos explicados referente a pacientes con venoclisis o que reciben drogas
intravenosas.
c) Pida ayuda cuando va a atender pacientes psiquiátricos o agresivos, para evitar causarle un daño durante la
punción.
d) Limpie con alcohol el torniquete después de cada extracción.
e) Siga las instrucciones de bioseguridad con todos los pacientes, especialmente las indicadas en la entrada de
las salas de pacientes potencialmente peligrosos.
f) No colecte sangre de una extremidad edematosa.
g) En caso de pacientes con línea arterial, las muestras de sangre deben ser extraídas por el médico, a excepción
de la muestra por tiempo de coagulación, que debe ser tomada del otro brazo y lo cual puede hacerlo el técnico.
Extracción sanguínea en pacientes con venoclisis:
A pesar de que éste procedimiento no está indicado para ser realizado por el personal de flebotomía del
laboratorio clínico, hemos adicionado el mismo con la intención de que el personal conozca el procedimiento para
extraer sangre por debajo del sitio intravenoso.
o Cierre la llave del fluido intravenoso, al menos 2 minutos antes de hacer la punción.
o Aplique el torniquete por debajo del sitio intravenoso.
o Seleccione una vena diferente a la utilizada en la conexión intravenosa existente.
o Realice la punción. Deje escapar aproximadamente 5 ml de sangre y descártela antes de
colectar la muestra para los exámenes.
o Retire el torniquete.
o Aplique presión sobre la vena para parar el sangramiento.
o Abra la llave del fluido intravenoso.
o No se retire sin confirmar que el paciente está bien.
Nota: No se debe colectar sangre obtenida de un brazo con fístula, cánula o heparina, sin consultar al médico
tratante o a la enfermera.
El Etiquetado:
El etiquetado de los tubos debe realizarse inmediatamente posterior a la extracción sanguínea. Es incorrecto
rotular los tubos previamente a la punción. En el caso de pacientes hospitalizados, ésta tarea se realiza en la
cama del paciente.
El etiquetado puede incluir:
a) Nombre del paciente
b) Número de cédula o seguro social, el cual debe coincidir exactamente con el formulario de
solicitud de examen.
c) Fecha de la punción. Colocar la hora si es muestra seriada.
d) Iniciales del flebotomista.

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
Una muestra del etiquetado de los tubos puede ser el siguiente:
CUIDADOS DEL PACIENTE POSTERIOR A LA EXTRACCIÓN:
Una vez realizada la extracción, es nuestra responsabilidad asegurarnos que el paciente se encuentra apto para
levantarse de la silla y retirarse. Algunos pacientes sufren de mareos, debilitamiento y desmayo posterior a una
extracción.
Para evitar que se caiga y se haga daño, debemos observarlo y preguntarle si está bien, antes de indicarle que se
retire.
Si el paciente está sudoroso, con la cara muy blanca o tiembla, pudiera necesitar nuestra ayuda, ya sea
haciéndole oler sales de amonio o alcohol. En caso de posible desmayo, debemos indicarle que coloque la
cabeza entre sus piernas, para ayudar a irrigar de sangre su cerebro.
Si fuera necesario, podemos acostarlo hasta que se reponga.
En el caso de los niños, debemos asegurarnos que mantengan el curita o venda para evitar sangramiento
posterior.
Los pacientes especialmente los ancianos que están en ayunas, debemos darle indicaciones para que pronto
desayunen, a fin de evitar desmayos.
Transporte de la muestra
Una vez que se haya colectado la muestra sanguínea, ésta debe ser llevada pronto al laboratorio para su
procesamiento. Algunas pruebas exigen que el suero sea separado cuanto antes del coágulo sanguíneo, para
evitar alteraciones en la composición o niveles de algunos metabolitos.
De más está decir que la muestra debe ser acompañada por su correspondiente formulario de solicitud de
examen.
AL TERMINAR SU LABOR
Una vez terminada su labor en la extracción de muestras sanguíneas el personal tiene la obligación de dejar
limpio y ordenado su puesto, con el fin de que el mismo pueda ser utilizado por otro personal con las condiciones
apropiadas de trabajo.
Esta labor incluye la limpieza del área, el ordenamiento de los tubos, jeringuillas y agujas sobrantes y la
colocación de restos de basura en su recipiente.
Al terminar sus funciones, debe informar al jefe de sala o a la persona asignada para su relevo, con el fin de
mantener la continuidad de las labores.

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
PRACTICA No. 1
F L E B O T O M I A
OBJETIVO:
Aplicar sus conocimientos previos de la anatomía del sistema circulatorio, para realizar una extracción
sanguínea venosa. Concientizándose de la importancia de su desempeño en la rehabilitación del paciente, a si
mismo, valorando las medidas de ética y bioseguridad.
INTRODUCCION:
FLEBOTOMIA: es el proceso de colectar sangre como una medida terapéutica, con el fin de diagnosticar
adecuadamente la causa de la enfermedad.
VENIPUNTURA: o venipunción, es la extracción de sangre por una vena.
Los lugares más habituales de realizar esta punción son la flexura del codo, venas de la mano, muñeca y tobillo.
En la flexura del codo existe una anastomosis especial entre la vena basílica y cefálica formado entre ellas una
especie de anclaje que evita que estas venas se muevan lo que facilita la flebotomía.
PUNCION CAPILAR
Este tipo de flebotomía se utiliza en pacientes que no permiten una adecuada punción venosa; facilita al
flebotomista la obtención de muestra sin causar traumatismos al paciente.
Esta punción capilar se realiza en las yemas de los dedos de las manos, en el lóbulo de la oreja o en los
talones de los pies.
A continuación se mencionaran algunas de las más frecuentes causas en las que se recomienda
punción capilar:
 En pacientes quemados severamente, quienes presentan deshidratación y su circulación sanguínea es
deficiente.
 En pacientes de oncología cuyas venas se reservan con fines terapéuticos (quimioterapia).
 En pacientes obesos cuyas venas son demasiado profundas.
 En pacientes geriátricos en los que las venas son poco accesibles y demasiado frágiles.
 En niños y bebes prematuros cuyas venas son inaccesibles.

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
En el caso de los bebes prematuros o niños menores de 1 año se recomienda hacer la punción capilar en la
planta de los pies, en las zonas laterales, evitando la parte central, que es donde se concentran gran cantidad de
arterias y venas axial como el hueso, pudiendo ocasionar infecciones o daños en tendones y cartílagos.
Sin embargo este tipo de punciones (capilar en dedo y en talón) puede frecuentemente sufrir hemólisis, esto
debido ha:
 Que se presiona demasiado el dedo o el pie, lo que evita una buena circulación sanguínea.
 Fragilidad en los eritrocitos, esto es frecuente en los recién nacidos.
 Que en la piel no se haya secado el alcohol al hacer la punción, provocando la hemólisis.
MATERIAL:
1. Jeringas (5 ó 10 mL).
2. Agujas desechables.
3. Torniquete.
4. Torundas de algodón o gasas.
5. Alcohol isopropílico al 70 %.
6. Tubos desechables adecuados a la muestra requerida.
7. Gradilla.
8. Recipiente de recolección para desechos infecto-contagiosos.
9. Banda adhesiva.
PROCEDIMIENTO:
1. RECEPCION DEL PACIENTE.- Es sumamente importante recibir al paciente con amabilidad, establecer
una comunicación cordial y atenta para lograr su confianza. Por lo tanto, se debe llevar un registro
adecuado del paciente, y así evitar confusiones y errores tanto de la o las muestras que se le van a
obtener, así como de sus resultados. Se sugiere considerar los siguientes aspectos :
a. Nombre, sexo y edad del paciente.
b. Número de registro.
c. Fecha y hora en que la muestra fue tomada.
d. Nombre del médico que atiende al paciente.
e. Diagnostico presuntivo.
f. Fármacos administrados.
g. Nombre o iniciales de la persona responsable de la flebotomía.
2. El paciente debe de estar en una posición cómoda, en un lugar iluminado y accesible al técnico.
3. Preguntarle al paciente a qué hora fue su última comida.
4. Colocar el torniquete.
5. Localizar la vena a puncionar, en caso de no ser visible, utilizar el tacto palpando la vena; cuando el
paciente tiene venas difíciles de palpar, ya sea porque son muy delgadas o están ocultas, es necesario

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
dar un masaje al brazo hacia abajo, estimulando la circulación sanguínea; bajar los brazos del paciente
para que las venas se “llenen” de sangre por la gravedad; o aplicarle compresas con agua caliente en el
brazo (con el calor las venas se ensanchan , logrando así su visualización).
6. Hacer asepsia de la zona a puncionar, en UN SOLO SENTIDO con una torunda con alcohol isopropilico.
7. Introducir la aguja con el bisel hacia arriba y siguiendo la trayectoria de la vena.
8. Extraer la sangre, girando poco a poco el émbolo de la jeringa hacia fuera.
9. Quitar el torniquete.
10. Sacar la aguja de un solo movimiento, sin lastimar
11. Presionar con la torunda de algodón, a forma de compresa, el sitio de la extracción.
12. Trasvasar la sangre a los tubos según sea el uso de la muestra.
13. Rotular tubos con la muestra.
14. Aplicar una banda adhesiva en el sitio de la punción.
REACCIONES QUE PUEDE PRESENTAR EL PACIENTE DURANTE LA FLEBOTOMIA:
 Desmayo: Se recomienda suspender la extracción, retirar la aguja, bajar los brazos y la cabeza del
paciente y colocarle compresas de agua fría en el cuello.
 Nauseas: Aplicar compresas de agua fría, preparar un recipiente en caso de evacuación.
 Shock hipoglucemico: Los primeros signos son: sudor frío, semblante pálido, debilidad, temblores
corporales y confusión mental.
 Convulsiones: El paciente puede estar inconsciente o con movimientos convulsivos, NO restringir los
movimientos, retirar los muebles que puedan ocasionarle daño; generalmente la convulsión pasa en
pocos minutos. Llamar al médico en caso necesario.
 Paro cardiaco: El paciente estará sin pulso ni respiración, las pupilas dilatadas y la piel con un tono azul
o gris. Inmediatamente acudir a personas certificadas en resucitación cardio pulmonar, y llamar al
médico.
PARTES DE LA JERINGA Y AGUJA
BISEL

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
REPORTE DE LABORATORIO
Ensenada, Baja California a _______ de _____________________ del 20 _____
PACIENTE:
EDAD: ___________SEXO: REGISTRO:
MEDICO:
DIAGNOSTICO PRESUNTIVO:
MEDICAMENTOS EN USO:
FLEBOTOMISTA:
RESULTADO: (explique su experiencia personal durante la extracción de sangre, al desempeñar los papeles de
paciente y de flebotomista)
Nombre y firma de quien realizó el estudio:
EST. T.L.C.
Nombre y firma de quien supervisó el
estudio: T.L.C.

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
CUESTIONARIO 1
1. Con sus propias palabras explica ¿que es FLEBOTOMIA?
2. ¿Cuáles son los sitios más comunes para realizar una flebotomía?
3. ¿En qué casos se puede realizar una punción en el talón del pie?
4. Mencione 5 datos importantes del paciente durante la recepción, para realizar un adecuado registro de sus
exámenes a realizarle:
5. ¿Si tenemos a un paciente con venas difíciles de visualizar, que se sugiere hacer, para realizar una
extracción exitosa?
6. Investigue y explique el término: “hemolisis “

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
PRACTICA No. 2
“RECUENTO ERITROCITARIO Y DETERMINACION DE HEMATOCRITO”
INTRODUCCION:
EL RECUENTO DE ERITROCITOS es un examen de sangre que determina el número de glóbulos rojos (GR)
que tiene una persona. La cantidad de oxígeno recibida por los tejidos corporales depende de cuántos glóbulos
rojos tenga la persona y de qué tan bien éstos estén funcionando. El recuento de eritrocitos, leucocitos y
plaquetas son expresados en concentración (células por unidad de volumen de sangre); en este caso que es el
método manual es de mm³.
FUNDAMENTO DEL METODO MANUAL:
Para EL RECUENTO DE ERITROCITOS, la sangre se diluye con una solución isotónica, conservando íntegros a
los eritrocitos, impidiendo a su vez, que se hinchen o se contraigan, pero también esta solución destruye a los
leucocitos. Luego, esta dilución se coloca en una cámara de Neubauer con la ayuda de una pipeta automática,
Pasteur o de Thoma y se cuentan cada uno de los eritrocitos al microscopio con el objetivo de 40X, para calcular
el número de eritrocitos por mm³.
Es preciso que cuando se interprete los resultados del conteo eritrocitario, se complemente con otras medidas de
la biometría hemática, es decir, con la hemoglobina, el hematocrito, la VCM, la HCM y la VMHC.
No obstante, los valores disminuidos pueden deberse a:
 Alteraciones dietéticas
 Anemias ocasionadas por causas varias
 Cáncer
 Enfermedades sistémicas
 Embarazo
 Fibrosis de médula ósea
 Hemorragias
Los valores aumentados a:
 Cardiopatías
 Enfermedades pulmonares crónicas
 Estancias en lugares de gran altitud
 Poliglobulia de diferentes causas.
El hematocrito
Con el valor hematocrito se confirma el diagnostico de diferentes enfermedades y patologías, como es el caso de
las anemias y la policitemia. En esta prueba se mide la cantidad de eritrocitos de la sangre en porcentaje del total,
o lo que es lo mismo, el porcentaje de células que transportan oxígeno frente al volumen total de sangre,
determinado por proceso de centrifugación. En este proceso, se pueden apreciar dos niveles, los elementos
formes que se sedimentan, y el plasma total que flota. En definitiva es la relación porcentual entre ambos lo que
representa el valor hematocrito.
La finalidad que se persigue con esta prueba es la de confirmar el diagnostico de varias patología o afecciones.
Los valores altos de hematocrito puede deberse a afecciones tales como:
 Cardiopatías
 Hemoconcentración o eritrocitosis
 Deshidratación
 Eclampsia durante el embarazo

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
 Enfermedades pulmonares crónicas
 Policitemia primaria o secundaria
 Shock
Sin embargo, los valores disminuidos nos pueden indicar:
 Anemia
 Hemodilución
 Hemorragia
 Fallos en la médula ósea (Radiaciones, toxinas, fibrosis, tumores, etc.)
 Embarazo
 Hemorragias
 Hipertiroidismo
 Hemolisis por una transfusión
 Leucemia
 Problemas de alimentación
 Artritis reumatoide.
MATERIAL BIOLOGICO:
 Sangre total
REACTIVOS:
 Liquido de Hayem o solución de Dacie
 E.D.T.A. al 10 %
MATERIAL NECESARIO:
 Pipeta de Thoma
 Hemacitómetro (cámara de Neubauer)
 Boquilla
 Microscopio
 Contador celular
 Tubos capilares
 Micro centrífuga
 Plastilina selladora
PROCEDIMIENTO:
Para recuento de eritrocitos:
1. Obtener sangre total siguiendo el protocolo ya conocido
2. Con la boquilla y la pipeta de Thoma aspirar sangre hasta la marca 0.5 (SIN BURBUJAS)
3. Aspirar diluyente (Hayem o Dacie) hasta la marca 101 de la pipeta
4. Agitar la pipeta por 3 min.
5. Desechar las 5 o 6 primeras gotas de la pipeta de Thoma
6. Colocar el cubreobjetos sobre la cámara de Neubauer y llenarla, tratando que fluya libremente por
difusión el liquido evitando llenar en exceso o formación de burbujas
7. Dejar en reposo 2 o 3 minutos el Hemacitómetro con el fin de que los eritrocitos sedimenten
8. Localizar la cuadricula de la cámara de Neubauer con el objetivo seco débil (10X); enseguida enfocar
con seco fuerte (40X)
9. El recuento se realizara en los cuadros más pequeños de la cámara, contando los hematíes localizados
en los 4 cuadros de los extremos y en el del centro, haciendo un total de 5 cuadros. (VER FIGURAS
MAS ABAJO)
10. Realizar los cálculos para determinar la cantidad de eritrocitos resultantes
Nota: Se puede realizar con la pipeta automática, se toma 20 µL (0,02mL) de sangre total con anticoagulante, o
sangre capilar y se deposita en un tubo de 12 x 75 que contenga 4 mL de solución de Hayem (aquí se tiene una

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
dilución de 1:200). Se deja reposar aproximadamente 5 minutos y se procede a cargar la cámara con la misma
pipeta usando un nuevo tip.
PARTES DE LA PIPETA DE THOMA:
ILUSTRACION PARA EL LLENADO DE LA CAMARA DE NEUBAUER
CONTEO DE GLOBULOS ROJOS
Cuadrantes dentro de la camara de neubauer donde se realizara el conteo celular, contaremos cada uno de los
globulos rojos que encontremos en los cuadrantes que estan marcados con la letra “ R” y en el orden como se
indica en las flechas

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
De los 25 cuadrados en que se encuentra subdividido, se cuentan los cuatro angulares y el central, con un
recuento total representativo de 1/5 de milímetro cuadrado. Sobre la base de una dilución de 200, de un recuento
de 1/5 mm
2
y una profundidad de 0.1 mm, el cálculo se efectúa como sigue:
Eritrocitos contabilizados X 5 X 200 X 10 = NUMERO DE ERITROCITOS POR mm
3
, o bien
Eritrocitos contabilizados X 10,000 = NUMERO DE ERITROCITOS/ mm
3
Para determinación de hematocrito:
Con el valor del hematocrito se confirma el diagnostico de diferentes enfermedades y patologías, como es el caso
de las anemias y la policitemia. En esta prueba se mide la cantidad de eritrocitos de la sangre en porcentaje del
total, o lo que es lo mismo, el porcentaje de células que transportan oxígeno frente al volumen total de sangre,
determinado por proceso de centrifugación. En este proceso, se pueden apreciar dos niveles, los elementos
formes que se sedimentan, y el plasma total que flota. En definitiva es la relación porcentual entre ambos lo que
representa el valor hematocrito.
PROCEDIMIENTO:
1. Utilice tubos capilares de 7 cm de largo por 1 mm de grosor, llenar las ¾ partes del capilar, con sangre
venosa bien homogeneizada.
2. Cerrar la punta del tubo capilar sellando a la llama del mechero (evite quemar el paquete globular) o con
plastilina.
3. Centrifugar por 5 min. a 10,000 rpm
4. Leer el resultado en escalas comerciales, de la siguiente manera:
a.
extremo inferior del tubo) quede exactamente al mismo nivel de la línea horizontal
correspondiente al cero.
b. Desplace el tubo a través de la escala hasta que la línea marcada con el número 100 quede al
nivel del tope de la columna de plasma. Vigile que el fondo de la columna de eritrocitos continúe
sobre la línea cero. El tubo debe encontrarse completamente en posición vertical.
c. La línea que pase al nivel del tope de la columna de eritrocitos indicará la fracción de volumen
de éstos.
La disposición celular es:
�
�
� eritrocitos.
Fuente: Manual de técnicas básicas para un laboratorio de salud. OPS, Nº 2.

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
TUBO DE MICROHEMATOCRITO Y METODOS DE LECTURA DEL VOLUMEN DE CELULAS EMPACADAS.
CAUSAS DE ERROR EN RECUENTO DE GLOBULOS ROJOS:
o Agitado imperfecto.
o Suciedad del material.
o Error en la aspiración de sangre y dilución hasta las marcas correctas.
o Desecamiento del líquido en la cámara de recuento.
o Errores en el recuento y en el cálculo.
o Olvido de descartar el liquido de dilución de la pipeta antes de cargar la cámara
o Carga excesiva de la cámara
CAUSAS DE ERROR EN DETERMINACION DE HEMATOCRITO:
o Velocidad inadecuada al centrifugar.
o Actividad muscular del paciente antes de la toma de muestra.
o Exceso de anticoagulantes.
o Prolongado uso del torniquete.
o Quemar el paquete globular al cerrar el capilar.
o Utilizar sangre hemolisada.
VALORES NORMALES:
HOMBRES MUJERES UNIDADES
Eritrocitos (RBC) 5.4 (4.6 – 6.0) 4.8 (3.9 – 5.0) 10
6
µL
Hematocrito (HTO) 45 (42 – 52) 42 (36 – 48) %

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
PACIENTE:
MEDICO:
FLEBOTOMISTA:
RESULTADO:
PARAMETRO RESULTADO VALOR DE REFERENCIA
ERITROCTIOS (RBC)
HEMATOCRITO (HTO)
CALCULOS:
COMENTARIO:
Nombre y firma de quien realizó el
estudio: EST. T.L.C.
Nombre y firma de quien
supervisó el estudio: T.L.C.

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
CUESTIONARIO 2
“RECUENTO DE ERITROCITOS Y DETERMINACION DE HEMATOCRITO”
1. Con tus propias palabras, explica ¿Para qué nos sirve el recuento de glóbulos rojos, en un examen de
salud?
2. ¿Qué enfermedades o patologías se pueden considerar al tener un recuento eritrocitario bajo?
3. El recuento de glóbulos rojos elevado ¿En qué casos clínicos se presenta?
4. ¿Qué es lo que mide el hematocrito (Hto)?
5. Menciona 3 enfermedades que nos puedan arrojar un Hto. elevado:
6. Menciona 5 patologías que nos puedan dar un Hto bajo:
7. El conteo de eritrocitos con el método manual, puede tener errores y afectar al resultado de la prueba;
menciona al menos 3 de estas causas de error:
8. Menciona 3 causas de error para el hematocrito:
9. Que cálculos aritméticos se deben realizar para obtener el número total de glóbulos rojos contabilizados:
10. ¿Cuál es la modificación que se realizo en la dilución de la sangre con el reactivo de Hayem, para hacer
el recuento eritrocitario?

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
PRACTICA No. 3
“DOSIFICACION DE HEMOGLOBINA”
INTRODUCCION:
La hemoglobina es el componente principal de los glóbulos rojos constituye el 95% del peso eritrocitario,
es una proteína conjugada que sirve de vehículo para el transporte de O2 y CO2. Está constituida por 4
estructuras de hem unidas a una de globina.
La hemoglobina es el mejor índice para medir la capacidad transportadora de gases, tanto para oxigeno
como para bicarbonato por parte del eritrocito.
Tanto la concentración de hemoglobina como el hematocrito representan en forma directa el número de
eritrocitos. Desde el punto de vista de la evaluación de la integridad hematológica, la determinación de
hemoglobina es superior al hematocrito y al recuento de eritrocitos.
Las enfermedades relacionadas con los eritrocitos (especialmente los síndromes anémicos) están
definidas por la concentración de la hemoglobina.
La determinación de la hemoglobina por métodos electrónicos, se obtiene por el método de la
cianometahemoglobina que determina otras formas de hemoglobina como la oxihemoglobina y la
carboxihemoglobina, mediante un pequeño hemoglobinómetro incorporado al equipo.
El método de la cianometahemoglobina fue recomendado por el Comité Internacional para la
Estandarización de Hematología (ICSH) en 1966, modificado en 1977 y sigue siendo hasta hoy el más
recomendado.
Este procedimiento tiene muchas ventajas, tales como la disponibilidad de estándares satisfactorios y la
capacidad de cuantificar todas las formas de Hb de importancia clínica. Es el método de elección para efectuar
estudios científicos sobre anemia y para determinar su prevalencia en encuestas de salud pública.
Los niveles de hemoglobina por debajo de los niveles normales pueden deberse a:
- Anemia (diversos tipos)
- Sangrado
- Deficiencia de eritropoyetina (por enfermedad renal)
- Intoxicación con plomo
- Desnutrición
- Deficiencias nutricionales de hierro, folato, vitamina B12 y vitamina B6
- Sobre hidratación
- Destrucción de los glóbulos rojos asociada con una reacción a transfusión
La hemoglobina alta es normalmente debido a un aumento del número o anormalidad de los glóbulos rojos. Las
causas incluyen:
 Vivir en una gran altura
 Fumar
 Enfermedad cardíaca congénita
 Cicatrices y engrosamiento del tejido pulmonar (fibrosis pulmonar)
 Policitemia vera
 La deshidratación, como de la diarrea severa o sudoración excesiva
 La enfermedad renal
 El uso de esteroides anabolizantes
FUNDAMENTO
Al mezclar la sangre con el reactivo de DRABKIN, se transforma la hemoglobina en
cianometahemoglobina, la intensidad de color de esta reacción es medida en un fotocolorímetro o
espectrofotómetro.

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
La reacción se da así:
El reactivo de Drabkin contiene cianuro potásico y ferrocianuro potásico.
El ferrocianuro hace pasar el hierro de la hemoglobina del estado ferroso (Fe++) al férrico (Fe+++) para formar
metahemoglobina, la cual se combina con cianuro potásico y da un pigmento estable, la cianometahemoglobina.
La intensidad del color se mide mediante un fotómetro a una longitud de onda de 540 nm. La densidad óptica de
la solución es proporcional a la concentración de hemoglobina.
FUNDAMENTO DE ESPECTROFOTOMETRIA:
La base de la colorimetría y la espectrofotometría es que muchas sustancias tienen color propio, o pueden dar
lugar a productos finales coloreados en ciertas reacciones químicas. Hay una relación entre la intensidad de este
color y la concentración del producto final, o sea la concentración de uno o varios de los reactivos; de esta
manera, la intensidad del color puede utilizarse para medir la concentración. Para este fin se emplean los
espectrofotómetros, que son instrumentos para la medición del color (Mathew, 1977)
REACTIVOS:
Reactivo de Drabkin
MATERIAL:
Tubos de ensaye de 13 X 100 mm
Pipeta de Salí o micropipetas
Espectrofotómetro (VER ANEXO 1)
Celdas analíticas
Pipetas de 5 mL
Plumones sharpie
MATERIAL BIOLOGICO:
Sangre total venosa con EDTA
PROCEDIMIENTO:
1. Obtener una muestra de sangre total
2. Prender el fotocolorímetro o el espectrofotómetro y esperar a que alcance la temperatura adecuada para
su funcionamiento.
3. Dispensar exactamente 5ml de reactivo de Drabkin en 2 tubos de ensayo, rotulados uno como BLANCO
(B) y el otro como PROBLEMA (P).
4. Homogeneizar la muestra sanguínea
5. Medir exactamente 20 µL (0.02 ml) de la sangre en la micro pipeta de Salhi.
6. Eliminar el exceso de sangre que queda en las paredes externas de la pipeta antes de introducirla en la
solución de Drabkin.
7. Llevar la pipeta hasta el fondo del tubo y depositar la sangre, procurando lavar las paredes internas de la
pipeta; esto se logra mediante aspiraciones y expulsiones consecutivas de reactivo dentro del tubo.
Evitar la formación de burbujas.
8. Tapar el tubo y mezclar varias veces por inversión.
9. Dejar reposar por 10 minutos para que se produzca la hemólisis total de las células rojas y se complete
la reacción.
10. Transferir la solución a las cubetas del fotocolorímetro, para su lectura la cual se realizara de la siguiente
manera:
a. Colocar el haz de luz a la longitud de onda adecuada (en este caso es de 540 nm)
b. Colocar en una cubeta de lectura el reactivo del tubo “Blanco” (no contiene muestra) y ajustar el
aparato a 0 (cero) de absorbancia.
c. En otra cubeta colocar el reactivo con la muestra “problema” y leer la absorbancia que nos
indique el espectrofotómetro. Anotar la lectura.

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
11. Calcular la concentración de hemoglobina, utilizando la curva de calibración o multiplicando por una
constante que resulta de la calibración del método.
CALCULOS:
Se divide la absorbancia del problema entre la absorbancia del estándar, el resultado se multiplica por la
concentración del estándar.
Conc Hb Pac. = Abs. Prob. X Conc. STD = __?___ gr/dL HEMOGLOBINA
Abs. Std
Valores de referencia:
Estos varían según la edad, el sexo y la altura sobre el nivel del mar:
Varones adultos: 13 - 18 g/dL
Mujeres adultas: 12 - 16 g/dL
Lactantes - niños: 11 - 16 g/dL
Recién nacidos: 14 - 24 g/dL
Posible valor crítico: <5 g/dL
CAUSAS DE ERROR
 Errores en la obtención de la sangre. La estasis prolongada causada por usar más de un minuto
el torniquete en el brazo del paciente, origina resultados falsamente elevados de hemoglobina
en las muestras de sangre venosa. En sangre capilar ocurre lo contrario cuando se ejerce una
presión excesiva en el sitio de punción y aumenta el flujo de los líquidos tisulares diluyendo la
muestra de sangre.
 La muestra no se mezcla bien. Para evitarlo, invertir el tubo varias veces o, de preferencia, usar
un mezclador mecánico.
 Errores de pipeteo o de dilución.
 Muestra de sangre con coagulo.
 Sangre lipemia.
 Recuento de leucocitos muy elevado (50.0 x10
9
/L).
 Instrumento incorrectamente calibrado.

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
PACIENTE:
MEDICO:
FLEBOTOMISTA:
COMENTARIO:
EST. T.L.C.
estudio: T.L.C.

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
CUESTIONARIO No. 3
1. ¿Qué es un espectrofotómetro?
2. ¿Para qué nos es útil el espectrofotómetro?
3. Con tus propias palabras, explica como se realiza la lectura del haz de luz en el espectrofotómetro:
(laboratorio)
4. Para la determinación de la hemoglobina, usaremos un espectrofotómetro, menciona como haremos el
procedimiento de la lectura de las absorbancias: (laboratorio)
5. ¿Qué es la hemoglobina y para que nos es útil?
6. ¿Qué cálculos se efectuarán para obtener la concentración de hemoglobina en nuestro paciente?
7. ¿En qué ocasiones patológicas podremos obtener una hemoglobina baja?
8. ¿En qué patologías se puede encontrar una hemoglobina alta?
9. Menciona 3 causas de error que podemos tener al realizar esta prueba de manera manual:
10. Según tus características físicas, ¿cuales serian TUS valores de hemoglobina normales?

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
PRACTICA No. 4
“FORMULA ROJA Y CLASIFICACION DE ANEMIAS”
OBJETIVO:
Realizar una formula roja mediante la medición de cada uno de los parámetros que la integran: recuento
de eritrocitos, medición de la hemoglobina, Hematócrito y cálculo de los valores absolutos de la concentración de
hemoglobina; para poder diagnosticar y clasificar una anemia.
INSTRUCCIONES:
Tomar una muestra de sangre y realizar CADA UNO DE LOS RECUENTOS que ya hemos realizado
(eritrocitos, Hematócrito y dosificación de hemoglobina) con el material requerido para cada prueba. Anotar y
hacer cálculos correspondientes para determinar y clasificar anemias. Y finalmente realizar el reporte
correspondiente a cada paciente.
CLASIFICACION DE ANEMIAS POR MEDIO DE LA DETERMINACIONES DE LOS INDICES ABSOLUTOS
La anemia es una deficiencia en la cantidad o calidad de los glóbulos rojos y frecuentemente es
secundaria a alguna enfermedad subyacente.
Para diagnosticar a un paciente con anemia debemos clasificar que tipo de anemia está cursando, es
necesario realizar algunos cálculos para la determinación del tamaño, contenido y concentración de hemoglobina
en los glóbulos rojos. Estos índices han resultado útiles para la caracterización morfológica de las anemias y
pueden calcularse a partir del recuento de glóbulos rojos, de la concentración de hemoglobina y del hematocrito.
El Volumen Corpuscular Medio (VCM o VGM) da idea DEL TAMAÑO promedio DE CADA ERITROCITO, se
calcula con la siguiente fórmula:
VGM= Hto X 10
Eritroc.
HCM: Hemoglobina Corpuscular Media es la CANTIDAD HEMOGLOBINA PRESENTE en los eritrocitos, se
calcula:
HCM= Hb (g /dL) x 10
Eritroc.
CMHC: Concentración Corpuscular Media de Hemoglobina, es la CONCENTRACIÓN media de Hb en un
volumen determinado de eritrocitos, y se calcula:
CMHC= Hbx 100
Hto.

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
LIMITES NORMALES SIGNIFICADO
VGM 82 – 97 fl Normal Normocítico
Aumentado Macrocítico
Disminuido Microcítico
HCM 26 – 34 pg Normal Normocrómico
Disminuido Hipocrómico
CMHC 31 – 37 % Normal Normocrómico
Disminuido Hipocrómico
CALCULOS:

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
PACIENTE:
MEDICO:
FLEBOTOMISTA:
PARAMETRO RESULTADO/UNIDADES VALOR DE REFERENCIA
ERITROCITOS (RBC)
HEMATOCRITO (HTO)
HEMOGLOBINA
V.G.M.
H.C.M.
C.M.H.C.
COMENTARIO:
EST. T.L.C.
estudio: T.L.C.

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
CUESTIONARIO 4
1. ¿Qué es la hemoglobina?
2. Menciona tres tipos diferentes de hemoglobinas:
3. ¿Qué es la anemia?
4. ¿Cuáles son los valores normales de hemoglobina en hombres y mujeres adultos?
5. ¿Para qué son útiles los valores absolutos que se obtienen a partir de la concentración de la
hemoglobina, del número de eritrocitos y del hematocrito?
6. Generalmente en las anemias microcíticas hipocrómicas, ¿Cómo se resultan los índices absolutos?
7. Menciona al menos tres pruebas de laboratorio que se deban realizar adicionalmente a la formula roja
(biometría hemática), como auxiliares al diagnostico de anemia:
8. Menciona cinco síntomas que se pueden manifestar por causa de anemia:
9. Menciona tres posibles tratamientos que se pueden emplear para combatir la anemia:
10. Mencione 3 tipos de anemia que se puedan manifestar en los seres humanos:

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
PRACTICA No. 5
“ERITROSEDIMENTACION GLOBULAR Y RECUENTO DE RETICULOCITOS”
La eritrosedimentación globular es una prueba que se usa ampliamente para estudiar la actividad de
diversas enfermedades. La velocidad de sedimentación de los glóbulos rojos se refiere al tiempo que tardan en
separarse del plasma. Se le mide en MILIMETROS POR HORA.
La velocidad de sedimentación es un examen hematológico que no está incluido en el desarrollo de un
hemograma; sin embargo, es una prueba muy importante por su gran sensibilidad, pues resulta anormal en las
enfermedades funcionales, así como en los procesos inactivos o estrictamente locales.
FUNDAMENTO:
La eritrosedimentación depende de la formación de “ROULEAUX”, de la concentración de fibrinógeno y
de la concentración de globulinas alfa y beta en el plasma. La concentración de las diversas proteínas
plasmáticas afecta la eritrosedimentación y en muchas enfermedades se altera la relación entre las proteínas, con
la consiguiente aceleración de la eritrosedimentación. Una disminución en el número de glóbulos rojos también la
acelera y en algunos laboratorios se corrige su resultado en los casos de anemia. Además de las elevaciones
producidas en procesos infecciosos e inflamatorios, se producen elevaciones fisiológicas en el embarazo y
durante la menstruación. La VSG disminuye en la anemia falciforme y en las 39fibrinógeno39 severas.
FENOMENO DE ROULEAUX:
El ROULEAUX o “formación de pilas de monedas”, es un fenómeno que consiste en que los glóbulos se
aglomeran en masas. Las causas de este fenómeno radican en el plasma o en el suero y no están influidas por la
temperatura. La administración de algunos medicamentos puede producir este fenómeno. Otras veces se trata
de una causa intrínseca al paciente, que tiene un desequilibrio de sus proteínas (aumento del 39fibrinógeno o
aparición de proteínas anormales).
Observado en el microscopio, el fenómeno de Rouleaux es característico: se ven los glóbulos reunidos
en filas, apilados por sus caras planas, varias filas se entrecruzan en diversos planos, produciendo un grumo el
cual puede ser visto de forma macroscópica (a simple vista)
INTERPRETACION CLINICA:
La VSG es un buen índice de la presencia de procesos infecciosos activos como la tuberculosis o la
endocarditis bacteriana subaguda, el lupus eritematoso diseminado, las carditis reumáticas, ciertas neoplasias,
embarazo ectópico, etc. Sirve igualmente para controlar la actividad evolutiva de las infecciones mencionadas.
MATERIAL:
 Tubos de Wintrobe
 Pipetas Pasteur
 Gradilla de wintrobe
 Reloj cronometro
 Papel secante
 Guantes
PROCEDIMIENTO (METODO DE WINTROBE):
1. Mezclar la muestra de sangre
2. Llenar de sangre una pipeta Pasteur

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
3. Introducir la punta de la pipeta Pasteur hasta el fondo del tubo de Wintrobe
4. Lentamente vaciar la sangre e ir retirando la pipeta arrastrándola por la pared interna del tubo
EVITANDO la formación de burbujas de aire.
5. El tubo se llena hasta la marca cero y se coloca en una gradilla en posición vertical.
6. INMEDIATAMENTE activar el cronometro que indique 1 hora, durante la cual ocurrirá el fenómeno
de Rouleaux
7. Transcurrida la hora se leerán los milímetros que haya sedimentado la muestra de sangre
8. La escala se lee hacia abajo, representando cada numero 10 mm o 1 cm.
VALORES DE REFERENCIA:
Hombres: 0 – 9 mm/hr
Mujeres y niños: 0 – 15 mm/hr
CAUSAS DE ERROR:
1. Uso de anticoagulante incorrecto (heparina aumenta el resultado).
2. Exceso de anticoagulante (aumenta)
3. Posición inadecuada del tubo (que este ladeado el tubo)
4. Aglomeración anormal de los glóbulos rojos en “pilas de monedas”.
CUENTA DE RETICULOCITOS
FUNDAMENTO:
La investigación de reticulocitos es una de las pruebas más útiles en la investigación de la causa de la
anemia, pues nos dá idea del estado de la producción de glóbulos rojos por la médula ósea.
Los reticulocitos contienen una fina red de ARN y protoporfirina que se puede teñir con el azul de cresil brillante.
Este colorante en combinación con una misma cantidad de sangre anticoagulada se mezcla y con la ayuda de la
temperatura (baño maría) se produce la coloración de estos eritrocitos jóvenes visualizándose en los frotices
sanguíneos por microscopía
REACTIVOS:
Azul brillante de cresilo
MATERIAL:
 Tubos de ensaye 13 X 75 mm
 Papel parafilm
 Plumón sharpie
 Portaobjetos
 Contador celular (pianito)
 Aceite de inmersión
 Microscopio
 Reloj cronometro
PROCEDIMIENTO:
1. En un tubo de ensaye chico se depositan tres gotas de sangre con EDTA
2. Se agregan 3 gotas de reactivo
3. Mezclar el tubo y tapar con parafilm
4. Incubar a 37
o
C por 10 minutos.
5. Hacer frotis en un portaobjetos
6. Leer en el microscopio con el objetivo de inmersión (100X)
7. Se leerán varios campos, contando 300 eritrocitos en total, incluyendo a los reticulocitos
8. Se hará un cálculo de regla de tres simple para obtener el valor porcentual de los reticulocitos
encontrados.

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
Recién nacidos: 3 – 6 %
Adultos: 0.5 – 1.5 %
INTERPRETACION CLINICA:
Causas de aumento
El número de reticulocitos aumenta en todas las circunstancias en las que existe un incremento de la
eritropoyesis, tales como en la hemólisis, como respuesta a sangrados o tras el inicio de un tratamiento
antianémico que ha resultado eficaz.
Causas de disminución
Como la producción de reticulocitos es necesaria para compensar las pérdidas fisiológicas de glóbulos rojos
maduros, una disminución de su número es la expresión de un estado arregenerativo o hiporregenerativo de la
serie roja. Esta circunstancia es típica de anemias aplásicas, anemias carenciales y enfermedades inflamatorias y
neoplásicas.
CALCULOS:

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
PACIENTE:
MEDICO:
FLEBOTOMISTA:
COMENTARIO:
EST. T.L.C.
estudio: T.L.C.

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
CUESTIONARIO 5
ERITROSEDIMENTACION Y RECUENTO DE RETICULOCITOS
1. Explique que es el fenómeno de rouleaux:
2. ¿Qué son los reticulocitos?
3. ¿En qué casos patológicos se presenta un aumento en la sedimentación globular?
4. ¿Por qué se les llama reticulocitos a estas células?
5. Explique cuáles son las unidades en las que se mide la eritrosedimentación globular y porque:
6. ¿Qué indican los valores anormales de los reticulocitos?
7. Mencione 2 causas de error que pueden alterar el resultado de la velocidad de sedimentación globular:
8. Se han mencionado varios sinónimos de la prueba que mide la sedimentación de la sangre, ¿Cuáles son
estos?

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
PRACTICA 6
“RECUENTO DE LEUCOCITOS TOTALES”
INTRODUCCION: Efectuaremos un recuento de leucocitos totales de un paciente.
Esto nos servirá de referencia para determinar si hay algún proceso infeccioso activo. Al efectuar el recuento total
no encontraremos diferenciación entre los 5 tipos de leucocitos normales (neutrófilos, monocitos, linfocitos,
basófilos y eosinófilos). En esta práctica nos limitaremos a contar manualmente los leucocitos totales dados en
mm
3
o litros.
FUNDAMENTO: En el método de Turk se utiliza un solución de acido acético al 2% que tiene como función lisar
los eritrocitos para evitar interferencias en el recuento.
MATERIAL UTILIZADO:
1. Pipeta de Thoma para LEUCOCITOS
2. Cámara de Neubauer
3. Microscopio
4. Contador celular
5. Boquilla
REACTIVO UTILIZADO:
Reactivo de Turk
PROCEDIMIENTO: Se requiere de sangre total con EDTA
1. Pipetear sangre con la pipeta de Thoma y la boquilla, hasta la marca de 0.5 evitando la formación de
burbujas.
2. Limpiar la pipeta para ELIMINAR el exceso de sangre
3. Aspirar reactivo de Turk hasta la marca 11, EVITANDO las BURBUJAS.
4. Se retira la boquilla de la pipeta y esta se agita vigorosamente por 3 min.
5. Preparar la cámara de Neubauer.
6. Se eliminan las 3 primeras gotas de la dilución.
7. Colocar una gota en la cámara de Neubauer y dejar reposar por 3 min. para que se asienten los
leucocitos.
8. Leer al microscopio con objetivo de 10X y el contador celular, SOLO EN LOS 4 CUADROS GRANDES
de la cámara de Neubauer, como se indica en la figura.
9. Realizar cálculos correspondientes.
CALCULOS: El total de células en estos 4 mm
3
se multiplica por 50 (factor obtenido entre la dilución de la sangre
y la profundidad de la cámara).

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
El recuento de glóbulos blancos se realizara en las 4 CUADRICULAS GRANDES que están en las orillas,
en este dibujo están MARCADAS con la letra W (White)…. Y con el OBJETIVO DE 10X
LEUCOCITOS TOTALES/ mm
3
= células contadas X 50
5,000 – 10,000/mm
3
5.00 – 10.00 X10
9
/L
SIGNIFICADO DE LOS RESULTADOS ANORMALES:
Un bajo número de glóbulos blancos se denomina leucopenia y puede deberse a:
 Insuficiencia de la médula ósea (por ejemplo: debido a infección, tumor o cicatrización anormal)
 Enfermedades vasculares del colágeno (como el lupus eritematoso)
 Enfermedad del hígado o el bazo
 Radioterapia o exposición a la radiación
Un alto número de glóbulos blancos se denomina leucocitosis y puede deberse a:
 Anemia
 Enfermedades infecciosas
 Enfermedad inflamatoria (como artritis reumatoidea o alergia)
 Leucemia
 Estrés emocional o físico severos
 Daño tisular (como, por ejemplo, quemaduras), entre otros

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
PACIENTE:
MEDICO:
FLEBOTOMISTA:
CALCULOS:
EST. T.L.C.
estudio: T.L.C.

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
CUESTIONARIO 6
RECUENTO DE LEUCOCITOS TOTALES
1. ¿Qué es la leucopoyesis?
2. ¿Cuántas especies de leucocitos existen en la sangre, y cuáles son?
3. ¿El valor elevado de leucocitos totales, que significado clínico tiene?
4. ¿A que se le conoce como leucopenia?
5. ¿Qué enfermedades pueden manifestar una leucopenia?
6. Mencione al menos 3 enfermedades que manifiesten leucocitosis:
7. ¿Cuáles son los valores normales de leucocitos totales?
8. ¿Cuál es el efecto del reactivo de Turk, para permitir la observación de los glóbulos blancos con más
facilidad?
9. Dibuje un esquema que represente lo observado en el microscopio al hacer el conteo de los glóbulos
blancos y explique ampliamente el proceso para realizarlo.

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
PRACTICA 7
“RECUENTO DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS”
INTRODUCCION: El recuento diferencial de leucocitos es una parte rutinaria de la biométrica hemática que
puede ser útil en la valoración de una infección o inflamación, en la determinación de los defectos de intoxicación
posible por sustancias químicas o drogas, en el monitoreo de trastornos sanguíneos como la leucemia, y en los
efectos secundarios de tratamientos como la quimioterapia. El procedimiento consta de una toma de sangre, la
misma se disemina en un portaobjetos de vidrio y luego se tiñe. A continuación se determina el porcentaje de
cada tipo de leucocitos.
FUNDAMENTO: Los leucocitos son parte fundamental del tejido hemático y presentan las siguientes
características: son células que tienen un mayor diámetro que los eritrocitos, presentan un núcleo de forma
irregular, su citoplasma presenta algunas granulaciones las cuales son teñidos con diferentes colorantes, y la
cromatina del núcleo puede ser de diferentes densidades.
Pueden distinguirse 5 tipos de leucocitos maduros (neutrófilos, eosinófilos, basófilos, monocitos y linfocitos)
basándose en general en las siguientes características:
 Tamaño de la célula
 Forma del núcleo
 Contenido de gránulos
 Consistencia de la cromatina nuclear
 Coloración de los gránulos
El 65% de leucocitos corresponde a los GRANULOCITOS: Eosinófilos, Basófilos y Neutrófilos.
El 35% corresponde a los AGRANULOCITOS: Monocitos y Linfocitos.
Los leucocitos se desplazan por medio de movimientos amiboideos saliendo de los vasos sanguíneos y llegando
a los tejidos, por medio de la DIAPEDESIS. Estas células vagabundas son importantes en las reacciones de
defensa contra enfermedades y en general en infecciones, puesto que pueden fagocitar cuerpos extraños y
bacterias.
Tienen una importante función en las reacciones inmunológicas de nuestro organismo favoreciendo la producción
de anticuerpos.
MATERIAL:
 Portaobjetos de vidrio
 Palillos aplicadores de madera
 Papel secante
 Plumón sharpie
 Contador celular
 Cronometro
 Aceite de inmersión
 Alcohol metanol fijador
 Eosina bufferizada
 Policromo
PROCEDIMIENTO:
1. Homogenizar la muestra sanguínea y ANTES de 3 hrs. realizar un frotis
2. Empleando un aplicador de madera, depositar una pequeña gota de sangre en el extremo de un
portaobjetos totalmente limpio.

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
3. Con el borde de otro portaobjetos a 20 o 30 grados, tocar la gota, esperar a que la sangre se distribuya
por capilaridad en el extremo del portaobjetos extensor y deslizarlo suavemente sobre el otro
portaobjetos, en sentido longitudinal hasta que la gota quede bien extendida sobre la superficie del
primer portaobjetos (NOTA: revisar clase de leucopoyesis para recordar la forma de hacer el frotis)
4. Dejar secar el frotis.
5. Teñir el frotis con la tinción correspondiente de la siguiente manera:
a. fijar la extensión en metanol absoluto aproximadamente 30 segundos.
b. teñir con la solución de Eosina bufferizada por 20 segundos.
c. enjuagar con agua de la llave.
d. introducir la extensión en solución de azul de policromo durante 30 segundos.
e. enjuagar con agua de la llave, dejar escurrir el agua y dejar secar al aire libre.
6. colocar una gota de aceite de inmersión y leer al microscopio con el objetivo de 100x.
7. se hará un recuento de 100 células blancas en total, DIFERENCIANDO cada una de ellas según sus
características antes citadas. (VER CLASE LEUCOPOYESIS)
8. evaluar la morfología de eritrocitos, leucocitos y plaquetas y reportar anormalidades.
Cellular Relativo (%)
Neutrófilos en Banda 0 - 5
Neutrófilos segmentados 45 - 65
Linfocitos 30 - 40
Monocitos 3 - 8
Eosinófilos 1 - 5
Basófilos 0 - 1
VARIACIONES FISIOLÓGICAS
La fórmula diferencial varía con la edad.
El niño en términos generales, posee más linfocitos que el adulto normal y alrededor de los 10 años comienza a
estabilizarse en los valores normales del adulto.
El anciano presenta un recuento de leucocitos entre 3.1 - 8.5 x 10
9
/L y el recuento diferencial tiene una media de
65 +/- 10% de polimorfo nucleares neutrófilos y linfocitos de 30 +/- 9%.
En el embarazo y sobre todo en el último trimestre, la leucocitosis puede llegar a 15 x 10
9
/L, con un aumento de
polimorfo nucleares neutrófilos y bandas neutrófilos.

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
PACIENTE:
MEDICO:
FLEBOTOMISTA:
RECUENTO TOTAL
LINFOCITOS
MONOCITOS
NEUTROFILOS SEGMENTADOS
NEUTROFILOS EN BANDA
EOSINOFILOS
BASOFILOS
OTROS
COMENTARIO:
EST. T.L.C.
estudio: T.L.C.

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
CUESTIONARIO 7
RECUENTO DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS
1. ¿Cuál es la utilidad del estudio de las extensiones sanguíneas?
2. ¿Qué características celulares se deben observar para diferenciar a los leucocitos y poder clasificarles?
3. Además de evaluar la serie blanca, ¿Qué otras cosas deben ser evaluados al observar una extensión
sanguínea?
4. ¿Qué características de calidad, debe tener la extensión sanguínea para realizar la lectura diferencial?
5. ¿Qué significado clínico tiene un aumento de los eosinófilos?
6. ¿Cómo se le llama a la elevación de los linfocitos y qué significado tiene?
7. Mencione 3 enfermedades o patologías que produzcan una neutrofilia:
8. Menciones 3 patologías que manifiesten una linfopenia:
9. Elabore un esquema de un campo visual del microscopio, e indique las células observadas

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
ANEXO 1
Espectrofotómetro
Un espectrofotómetro es un instrumento usado en la física óptica que sirve para medir, en función de la longitud
de onda, la relación entre valores de una misma magnitud fotométrica relativos a dos haces de radiaciones.
También es utilizado en los laboratorios de química para la cuantificación de sustancias y microorganismos.
Hay varios tipos de espectrofotómetros, puede ser de absorción atómica o espectrofotómetro de masa.
Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromática a través de una muestra y medir
la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra. Esto le permite al operador realizar dos funciones:
1. Dar información sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra
2. Indicar indirectamente que cantidad de la sustancia que nos interesa está presente en la muestra
ESPECTROFOTOMETRIA:
Se refiere a la medida de cantidades relativas de luz absorbida por una muestra, en función de la longitud de
onda. Cada componente de la solución tiene su patrón de absorción de luz característico. Comparando la longitud
de onda y la intensidad del máximo de absorción de luz de una muestra versus soluciones estándar, es posible
determinar la identidad y la concentración de componentes disueltos en la muestra (solución incógnita).
Las ventajas de la espectrofotometría sobre otros métodos analíticos de laboratorio son varias: es rápida, precisa,
versátil, fácil de usar y eficiente en costo. Los espectrofotómetros se han mejorado en precisión y versatilidad en
los últimos años con los avances de tecnología, y hoy se consideran indispensables en un laboratorio de química
analítica.
La espectrofotometría se usa para diversas aplicaciones, como:
 Análisis cuantitativo y cualitativo de soluciones desconocidas en un laboratorio de investigación,
 Estandarización de colores de diversos materiales, como plásticos y pinturas,
 Detección de niveles de contaminación en aire y agua,
 Y determinación de trazas de impurezas en alimentos y en reactivos.
La espectrofotometría ultravioleta-visible usa haces de radiación del espectro electromagnético, en el rango UV
de 80 a 400 nm, principalmente de 200 a 400 nm y en el de la luz visible de 400 a 800 nm, por lo que es de gran
utilidad para caracterizar los materiales en la región ultravioleta y visible del espectro. Al campo de luz uv de 200
a 400 nm se le conoce también como rango de uv cercano, la espectrofotometría visible solamente usa el rango
del campo electromagnético de la luz visible, de 400 a 800 nm.

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
Un espectrómetro típico posee cuatro componentes básicos: una fuente de radiación que tiene intensidad
constante en el rango de longitud de onda que cubre (usualmente es lámpara de tungsteno para luz visible, y
deuterio para ultravioleta), un compartimiento para la muestra, un monocromador que separa la banda de longitud
de onda deseada del resto del espectro y la dispersa al compartimiento de la muestra, y un foto detector, que
mide cuantitativamente la radiación que pasa por la muestra.
En general, los espectrómetros miden en % de transmitancia (T) y absorbancia (A). El por ciento de transmitancia
se refiere a la cantidad de radiación que pasa a través de la muestra y alcanza el detector. Una solución límpida,
no absorbente, mostrara una lectura de 100% de transmitancia en un espectrofotómetro calibrado. Las unidades
de absorbancia van de 0 a 2. Las medidas de absorbancia son frecuentemente usadas en química analítica, ya
que la absorbancia es proporcional al grosor de una muestra y la concentración de la sustancia en ésta.
El espectrofotómetro tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromática (de una longitud de onda
particular) a través de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra. El
espectrofotómetro mide la absorbancia de una muestra en los espectros de luz ultravioleta y visible (200 a 850
nm). El largo de onda es determinado por un prisma que descompone el rayo de luz de acuerdo al largo de onda
escogido. Luego la luz pasa por una hendidura que determina la intensidad del haz. Este haz atraviesa la muestra
y llega a un tubo fotográfico, donde es medido. La cantidad de luz que atraviesa la muestra es el porcentaje (%)
de transmitancia

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
ANEXO 2
VALORES NORMALES EN LA BIOMETRIA HEMATICA
PARAMETRO LIMITES NORMALES UNIDADES
Leucocitos 5.0 – 10.0 10
9
/L
Eritrocitos 3.5 – 5.7 10
12
/L
Hemoglobina 12.0 – 17.2 g/dL
Hematócrito 36.1 – 50.3 %
MCV 82.2 – 97.4 fL
MCH 26.0 – 34.0 Pg
MCHG 31.0 – 37.0 %
RDW (ADE) 11.6 – 37.6 %
Plaquetas 150 – 450 10
9
/L
MPV 7.8 – 11.0 fL
Linfocitos 20.5 – 51.1 %
Monocitos 1.7 – 9.3 %
Granulocitos 42.2 – 75.2 %
Eosinófilos 0 – 0.7 %
Bandas 0 – 0.2 %

BIOMETRIA HEMATICA
Q.F.B. JORGE ECHAVE
BIBLIOGRAFIA:
1. Garza D and Becan-McBride K. Phlebotomy Handbook, 2nd Ed. Norwalk, Connecticut: Appleton and Lange:
1989.
2. National Committee for Clinical Laboratory Standards; Procedures for the Collection of Diagnostic Blood
Specimens by Venipuncture, 3rd Ed. Document H3-A3. Vol. 11 No. 10, 1991.
3. National Committee for Clinical Laboratory Standards. Procedures for the Collection of Diagnostic Blood
Specimens by Skin Puncture. Document H4-A3. Vol. 11 No. 11, 1991.
4. Phelan, S. Phlebotomy Techniques: A Laboratory Workbook. Chicago, Ill.: American Society of Clinical
Pathologists: 1993.
5. University of Iowa Hospital and Clinics, Pediatric Phlebotomy Training Manual. 1994.
6. University of Iowa Hospital and Clinics, Phlebotomy Training Manual. 1994.
7. Mejoría Continua de la Calidad. Guía para los laboratorios clínicos de América Latina. Editores: M.L.Castillo
de Sánchez y M.E.Fonseca Yerena en colaboración con COLABIOCLI. Editorial Médica Panamericana.
8. Virtual Phlebotomy: A Computer Aided Course of Instruction.
http://www.parsons.umaryland.edu/~vguy/phleb.htm
9. California Phlebotomy Training. http://www.scpt.com/PhlebotomyViews.html
10. Virtual Hospital: CLIA. Pre-Analytical Factors Affecting Laboratory Results.
http://www.vh.org/Providers/CME/CLIA/Phlebotomy/Phlebotomy.html
11. Center for Phlebotomy Education. http://www.phlebotomy.com
12. Medstat Utah. http://www.medstat.med.utah.edu/webpath/tutorial/PHLEB/PHLEB.html
Autor:
Eric Caballero J.
ecaballe[arroba]cwpanama.net
http://www.ventajas.com/foro/view.cgi?header_id=235
http://reina.4life.biz/enfermedades.aspx?eId=107
Mathew, L. (1977). Metodos de laboratorio. Mexico, D.F.: Nueva Editorial Interamericana, S.A. de C. V.
Espinoza, Eligio (2009). Manual de hematología. Unison, Universidad de Sonora
Muñoz Zambrano, María E.; Morón Cortijo, Cecilia G. Manual de procedimientos de laboratorio en técnicas
básicas de hematología. Lima: Ministerio de Salud, Instituto Nacional de Salud, 2005.
Theme, Color Atlas of Hematology © 2004 Theme ABC OF CLINICAL HAEMATOLOGY Second Edition Edited by
DREW PROVAN Senior Lecturer, Department of Hematology, Bart’s and the London, Queen Mary’s
BORBOLLA Escoboza, José Rafael; Principios de hematología. Primera edición, México, D.F. MASSON DOYMA
MEXICO, S.A.; 2005

Manual de-practicas-biometrica-hermatica(2sem)

Más contenido relacionado

La actualidad más candente (20)

Similar a Manual de-practicas-biometrica-hermatica(2sem) (20)

Último (20)

Manual de-practicas-biometrica-hermatica(2sem)