Practica catalisis 5
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Este documento presenta los objetivos y procedimiento de una práctica de laboratorio sobre la catálisis enzimática e inorgánica. Los objetivos son comparar la acción catalítica de la enzima catalasa y el catalizador inorgánico MnO2 al descomponer H2O2, observar el efecto de la temperatura en cada catalizador, y observar la acción de un inhibidor sobre la enzima. El procedimiento incluye realizar reacciones con catalasa de sangre y papas, y con MnO2 a diferentes temperaturas y en presen
Practica catalisis 5
- 1. UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS E INGENIERIAS DEPARTAMENTO DE QUÍMICA LABORATORIO DE BIOQUIMICA PRACTICA Nº CATÁLISIS ENZIMATICA E INORGÀNICA OBJETIVOS: Comparar la acción catalítica de la enzima catalasa, con la de un catalizador inorgánico como el bióxido de manganeso (MnO2) al descomponer en peróxido de hidrógeno (H2O2) a temperatura ambiente. Observar el efecto de la temperatura sobre la acción catalítica de una enzima y comparar el mismo efecto de temperatura sobre un catalizador inorgánico. Observar la acción de un inhibidor sobre la actividad catalítica de una enzima. TEORÍA RELACIONADA Las enzimas son catalizadores biológicos de estructura proteica y producidos por los mismos organismos que las utilizan para realizar sus propios procesos metabólicos. La acción catalítica de una enzima está sometida a la influencia de factores físicos como son, el calor, las radiaciones o de factores químicos como cambios en el pH y en la concentración de la enzima, sustrato y la presencia de inhibidores. En cambio los catalizadores inorgánicos, en algunos casos, no son afectados por factores físicos como el calor, por tanto, pueden catalizar una determinada reacción pese a cambios en la temperatura. La reacción que se presenta en la experiencia a realizar se puede describir en la siguiente forma:
- 2. MATERIALES Y REACTIVOS 6 tubos de ensayo 2 pipetas de 5 y 10 ml Beaker de 400mL Calentador Pinza para tubos de ensayo Gotero Probeta de 100mL Espátula Mortero con mano Cuchilla (TRAER) Gradilla Gasa (TRAER). Peróxido de Hidrógeno (H2O2) al 3% Bióxido de Manganeso (MnO2) Cianuro de Sodio (NaCN) Papas como fuente de catalasa (TRAER) Sangre como fuente de catalasa (VOLUNTARIO) Agua destilada Hielo (TRAER) PROCEDIMIENTO 1. Rotular tres tubos de ensayo y agregar a cada uno las siguientes sustancias: Tubo Nº1: 1mL de sangre al 10% Tubo Nº2: 1 mL de extracto de papa. Tubo Nº3: Una pequeña porción de MnO2 2. Agregar a cada uno de los tubos 1 mL de H2O2 al 3%. Observar la intensidad de la reacción por el burbujeo del oxígeno y la liberación de calor. Compare el nivel alcanzado por las burbujas en cada uno de los tubos y registre en orden creciente la actividad catalítica con base en este parámetro. 3. Prepare 3 tubos de acuerdo al numeral 1 y colóquelos en un baño con agua a ebullición durante diez minutos, retirarlos y dejar en reposo dentro de un baño de agua a temperatura ambiente durante 10 minutos. Adicionar a cada tubo 2 mL de H2O2 al 3%. Compare el nivel alcanzado por las burbujas en cada uno de los tubos y registre en orden creciente la actividad catalítica con base a este parámetro. 4. Prepare nuevamente 3 tubos de acuerdo al numeral 1 y colóquelos en un baño de hielo durante 10 minutos. Adicionar a cada tubo 2 mL de H2O2 al 3%. Compare el nivel alcanzado por las burbujas en cada uno de los tubos y registre en orden creciente la actividad catalítica con base en este parámetro.
- 3. 5. Prepare nuevamente 3 tubos de acuerdo al numeral 1, adicione a cada tubo uno 5 gotas de NaCN y dejar en reposo durante 5 minutos, luego adicione 2 mL de H2O2 al 3% a cada tubo. Compare el nivel alcanzado por las burbujas en cada uno de los tubos y registre en orden creciente la actividad catalítica con base en este parámetro. PREGUNTAS 1. Explique por qué el captopril y el enalopril son ejemplos de inhibidores competitivos de la enzima conversora de la angiotensina. 2. Las granadas son fabricadas por la industria militar con un dispositivo especial de seguridad para que no exploten en el sitio donde son fabricadas, si no durante el combate, ¿Qué tipo de enzimas son fabricadas por ciertos órganos que tienen un comportamiento similar al de las granadas? De ejemplos. 3. Por qué carece de importancia la lipasa gástrica en los procesos digestivos del estómago de los adultos y en cambio es importante en el estómago infantil? 4. Cuál es la importancia médica de las enzimas? De por lo menos un ejemplo concreto. 5. Defina que son: Zimógenos, Isozimas, Inhibidores acompetitivos. 6. Qué diferencias hay entre inhibidores orgánicos e inorgánicos? 7. Qué función cumplen las vitaminas hidrosolubles en las reacciones catalizadas por enzimas?. 8. Explique como se da el proceso de regulación de la actividad enzimática en el organismo?. BIBLIOGRAFIA: PLUMER, D.T. Introducción a la bioquímica práctica. Mexico. MaGraw- Hill Latinoamericana, S.A. CONN, E y Stumpf, P.K. Bioquímica F. LOPEZ, E y ANZOLA, C. Guías de laboratorio de Bioquímica. Facultad de ciencias. Universidad Nacional de Colombia sede Bogota.