Practica glucogeno 2
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Este documento describe un procedimiento para determinar la cantidad de glucógeno presente en el hígado y el corazón. El procedimiento involucra triturar la muestra de tejido, calentarla con hidróxido de potasio para extraer el glucógeno, agregar etanol y sulfato de sodio para precipitar el glucógeno, centrifugar la mezcla, secar y pesar el precipitado de glucógeno, y realizar una prueba de Felhing para confirmar la presencia de glucógeno. El objetivo es cuantificar el
Practica glucogeno 2
- 1. UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS E INGENIERIAS DEPARTAMENTO DE QUÍMICA LABORATORIO DE BIOQUIMICA PRACTICA Nº DETERMINACIÓN DE GLUCÓGENO EN HÍGADO Y CORAZÓN OBJETIVOS 1. Determinar la presencia de glucógeno en diferentes tejidos. 2. calcular la cantidad de glucógeno presente en un tejido animal. Teoría relacionada (consultar). Materiales Reactivos Tubos de centrífuga (2) KOH al 10 % Balanza reactivo de felhing A yB Beaker de 400 y 200 ml sulfato de sodio saturado Vidrio de reloj etanol al 96% Pipetas de 5 y 10ml HCl 1,2M Agitador Beaker de 300 y 100ml Cuchillo. PROCEDIMIENTO Pese 20 g de hígado o corazón y triture suavemente, páselo a un vaso de precipitado y agréguele KOH al 10% hasta cubrir y caliente en un baño de agua hirviendo durante 20 minutos, agite de vez en cuando durante el calentamiento; enfríe en un baño de hielo, retire los cuerpos sólidos y agregue 2 ml de sulfato de sodio saturado y mezcle fuertemente, añada 4 ml de etanol y deje en baño de hielo por 10 minutos. Observe y centrifugue por 3 minutos, descarte el sobrenadante, seque y pese. Una pequeña cantidad agregue agua y caliente suavemente hasta disolver, agréguele 1 ml de HCl (1,2M), caliente durante 20 minutos y realice la prueba de Felhing.
- 2. Preguntas de actividad complementaria 1. Cuál es el porcentaje de glucógeno en Hígado y corazón teórico, compárelo con el calculado experimentalmente. 2. Cuál es la función del Hidróxido de Potasio, etanol y ácido Clorhídrico en la determinación de glucógeno. 3. Cuál es el porcentaje de error de la cantidad de glucógeno obtenida. BIBLIOGRAFÍA: PLUMER, D.T. Introducción a la bioquímica práctica. México. MaGraw- Hill Latinoamericana, S.A. CONN, E. y Stumpf, P.K. Bioquímica F.