Vector PBR 322
- 1. LA Biología Molecular 272 Fecha: 11 de Agosto de 2009
- 2. Vector PBR322 Un plásmido o vector es un agente que transfiere información genética. Los plásmidos son cadenas circulares que se encuentran fuera de los cromosomas de un organismo. Con ellos pueden intercambiar características genéticas propias del organismo o adquiridas por manipulación técnica.
- 3. Vector PBR322 pBR322 por un tiempo fue uno de los más comúnmente vectores de clonación usados de E. coli . Fue el primer plásmido artificial. Fue creado en 1977. Francisco Gonzalo Bolívar Zapata
- 4. Vector PBR322 Contiene 4361 pb. Contiene dos genes de resistencia a antibióticos: Ampr y el Tetr. Tiene un origen de replicación que funciona sólo en Escherichia coli . Contiene un único sitio de corte : Bam HI Hind III Sal I Gen Tetr Pst I Gen Ampr EcoRI no está dentro de ningún DNA codificante
- 5. Vector PBR322 mapa genetico del plasmido PBR322
- 6. Vector PBR322 El gen de resistencia a la ampicilina es una β - Lactamasa. Los promotores P1 y P3 son para el gen de la β - Lactamasa. P3 es un promotor natural, y P1 es creado artificialmente por la union de los dos fragmentos de DNA diferentes para crear pBR322. P2 esta en la misma region que P1 pero este esta en linea opuesta e inicia la transcripcion en direccion del gen de la resistencia a tetraciclina.
- 7. Vector PBR322 La secuencia de pBR322 es:
- 8. Vector PBR322 Cuando la inserción de un fragmento de DNA foráneo en un vector interrumpe la secuencia de un gen funcional, el DNA recombinante resultante no expresa el gen. El gen que codifica la resistencia al antibiótico tetraciclina (tet 1 ) se destruye por inserción del DNA, mientras que el gen de resistencia a la ampicilina ( amp 1 ) permanece funcional.
- 9. Vector PBR322 La destrucción de uno de los genes de resistencia a un antibiótico y el mantenimiento de un segundo gen de resistencia a otro antibiótico permite la detección de colonias bacterianas que tienen DNA foráneo situado entre el vector recombinante de replicación.
- 10. Vector PBR322 Plásmidos de la serie pUC Son derivados del pBR322 La secuencia del tetRha sido cambiada. Todos los sitios de corte están ahora en el gen lacZ Permite clonar fragmentos de 6 KB
- 11. Vector PBR322 Expresion citoplasmatica. Secuencia lider PPT para secrecion. pMB1 es derivado del pBR322, es origen de replicacion en celulas bacterianas. Gen de β - Lactamasa para selacion de resistencia a la ampicilina en bacterias.
- 12. Conclusión El plásmido pBR322 es un buen vector para la clonación de vectores en E. coli . El descubrimiento de los elementos genéticos móviles en bacterias ha permitido en gran medida el desarrollo de la biología molecular . El plásmido inventado por el Dr. Bolívar le brinda a la célula portadora del plásmido la capacidad de desarrollarse en un medio de cultivo con un antibiótico. Esta aportación demuestra lo que es la selección negativa, porque con esto se puede buscar que la colonia de bacterias pierda una función especifica, en este caso la resistencia ampicilina, mediante la manipulación genética.
- 13. Bibliografía http://es.wikipedia.org/wiki/Vector_(gen%C3%A9tica) http://www.cienciorama.unam.mx/index.jsp?pagina=vida&action=vrArticulo&aid=170 http://en.wikipedia.org/wiki/PBR322 http://people.rit.edu/~gtfsbi/IntroMicro/20083MicrobialHumansCh21.htm http://www.sigmaaldrich.com/life-science/molecular-biology/cloning-and-expression/vector-systems/mat-system-vectors/3x-flag.html http://www.cienciorama.unam.mx/index.jsp?pagina=vida&action=vrArticulo&aid=170 http://books.google.com.mx/books?id=p3DCb9lTLx8C&pg=PA293&lpg=PA293&dq=pBR322+derivados&source=bl&ots=YZZNZUTjXT&sig=NDwL5mvSDrXAv1kkrgjbZatXmvc&hl=es&ei=1gaBSp3cK4uMtge4usTHCg&sa=X&oi=book_result&ct=result#v=onepage&q=pBR322%20derivados&f=false