3º práctica
- 1. Alba Amaya Bello Andrea Andrade Alicia Núñez Marrero
- 2. ○ Tubos de ensayo. ○ Gradilla. ○ Mechero. ○ Vasos de precipitados. ○ Pipetas. ○ Solución de HCl ○ Alcohol etílico ○ Solución de SO4 ○ Clara de huevo. ○ Solución de albúmina al 12%. ○ Diversos alimentos. ● Fundamento. Debido al enorme tamaño de las moléculas de proteínas, éstas pueden formar con el agua soluciones coloidales y que a su vez pueden precipitarse formando coágulos al ser calentadas a temperaturas superiores al 70% o al vertile soluciones como ácidos, alcohol, salinas etc. La coagulación de las proteínas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalización por los agentes indicados que el actuar sobre la proteína la desordena por destrucción de sus estructuras secundaria y terciaria. ● Técnica. 1. En primer lugar, colocamos en tres tubos de ensayo una pequeña cantidad de clara de huevo (puede diluirse en un poco de agua para obtener una mezcla espesa).
- 3. 2. Seguidamente, calentamos uno de los tubos al baño María. Al segundo tubo de ensayo, le añadimos 2-3 ml alcohol etílico (etanol) y al tercero CuSO4, es decir, el Fehling B rebajado. 3. Finalmente, observamos los resultados. Mientras en el primero tubo al baño María, la clara de huevo se encontraba espesa, en el segundo con alcohol etílico ocurrió algo parecido. Al añadir etanol ocurrió lo mismo que cuando se fríe o escuece: las cadenas de proteínas se desenrollan y forman enlaces que unen unas cadenas con otras. Sin embargo, al añadirle CuSO4 Entre las reacciones coloreadas específicas de las proteínas , que sirven por tanto para su identificación , destaca la reacción de biuret. Esta reacción la producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos ya que se debe a la presencia del enlace peptídico CO-NH que se destruye al liberarse los aminoácidos . El reactivo del biuret lleva sulfato de cobre (II) y sosa y el cu, en un medio fuertemente alcalino , se coordina con los enlaces peptídicos formando un complejo de color violeta (biuret)cuya intensidad de color depende de la concentración de proteínas. En primer lugar colocamos a nuestra disposición las muestras que nos dio el profesor cerca de nosotros para tenerlas mano , estas muestras eran pan , galletas de perro , yema , pechuga , jamón serrano , danacol de naranja , queso y limonada. Una vez tuvimos las muestras en los tubos de ensayo les pusimos a cada una de tres a cuatro gotitas de la solución de so4cu al 1% , al aplicar esta procedimos a poner también 3ml de solución al 20% de naoh. Posteriormente agitamos cada una de ellas para ver la reacción que se efectuaba al mezclarse bien la muestra con las solución añadida.
- 4. Al mezclarse bien pudimos ver como las muestras de queso , pan , jamón serrano , pechuga , la yema , y el danacol se teñían de un color violeta y daban positivo en la contención de proteínas , mientras que la limonada y la galleta de perro daban negativo ante este contenido. 1) ¿Cómo se manifiesta la desnaturalización de la clara de huevo? Cuando le echamos etílico, la clara se quedó en estado líquido y cuando le echamos HCl, se queda en estado sólido. Por ello, suponemos que depende del líquido que se le añada. 2) ¿Cuál de los tres agentes utilizados tienen mayor poder de des naturalización? Tiene mayor poder el HCl. 3) ¿Cómo podríamos saber que una sustancia desconocida es una proteína? Para saber si tiene proteína una sustancia, hay que poner NaOH y CuSO4 debería cambiar de color al violeta. 4) ¿Qué coloración de la reacción del Biuret? La reacción de Biuret en los alimentos con proteínas debe dar un color malva. 5) ¿Una proteína coagulada podría dar la reacción del Biuret? Si, el reactivo reacciona con cualquier proteína sea líquida o sólida. Por ejemplo, cuando haces la prueba en suero (líquida) y cuando haces una prueba en huevos, carnes, pan… 6) Si se realiza la reacción del Biuret sobre un aminoácido como la Glicina, ¿es positivo o negativo? ¿Por qué? La reacción dará negativa o positiva dependiendo de la cantidad de aminoácidos que contenga. Ya que si solo contienen un aminoácido el resultado será negativo, porque no habrá péptidos que den la unión de dos aminoácidos. Por lo que dará positiva, siempre y cuando haya dos o más aminoácidos unidos.