Informe uno
- 1. UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE LABORATORIO CLINICO E HISTOPATOLOGICO ASIGNATURA: TECNICAS HISTOLOGICAS INFORME INVESTIGATIVO BASADO EN LA PRACTICA DE LABORATORIO DE TECNICAS HISTOLOGICAS TEMA: RECONOCIMIENTO DE LAS DISTINTAS AREAS DENTRO DEL LABORATORIO DE TECNICAS HISTOLOGICAS ELABORADO POR: BRANDON CAIZA TERCER SEMESTRE DOCENTE: LIC.IVAN PEÑAFIEL MENDEZ FECHA DE LA PRÁCTICA: 20/04/2016 FECHA DE ENTREGA: 27/04/2016 PERIODO: ABRIL-AGOSTO 2016 RIOBAMBA – ECUADOR
- 2. TECNICAS HISTOLOGICAS 1.-Tema: Reconocimiento de las distintas áreas dentro del laboratorio de técnicas histológicas 2.-Objetivo General: Identificar las áreas y equipos que se encuentran formando un laboratorio de Anatomía Patológica. 3.-Objetivos Específicos: Identificar cuál es la función que cumple cada área del laboratorio de anatomía patológica. Conocer cuáles son los materiales y equipos utilizados en cada área del laboratorio. Diferenciar el trabajo que se va a cumplir dentro de cada área, obteniendo un aprendizaje significativo. 4.-Materiales: Mandil Cobertor de cabello Guantes Mascarilla Libreta de apuntes Esferos 5.-Marco teórico: En una institución asistencial o docente-asistencial el laboratorio de patología o de anatomía patológica también denominado servicio o departamento se ocupa del estudio morfológico de muestras de células, tejidos y órganos obtenidos de pacientes vivos y de las necropsias. La distribución de las distintas áreas del laboratorio de anatomía patológica van a ser un requisito primordial para el correcto procesamiento de las muestras en estudio; para lo cual se van a dividir en distintas las distintas áreas para facilitar el trabajo y lograr un excelente resultado. Área de Microscopia:
- 3. TECNICAS HISTOLOGICAS En esta área es necesario hacer énfasis en las condiciones de recepción de muestras para que posteriormente durante el inicio de la técnica histológica que comprende; el estudio macroscópico no se cometa errores. Este estudio normalmente es llevado a cabo en un espacio físico denominado sala de tallado o área de microscopia es la primera recepción de muestras, biopsias, tejidos que vienen codificados; deben tener toma de agua que este en constante fluido el agua, para evitar que los patógenos de la muestra contaminen el área y que no se queden en el mesón. Plancha de madera y corcho: Es un instrumento en forma de resbalera que nos va a servir para medir, cortar y manipular los órganos que llegan a ser examinados, además nos va ayudar a que el bisturí o cualquier otro objeto utilizado para en corte se dañe y que el fluido de dichos órganos se vaya directamente a la cañería evitando el posible contagio con muestras contaminadas. Casetas: La utilización de las casetas son las de contener las porciones más sospechosas que van directamente a los procesadores para eliminar fluidos, agua tisular y que de esta forma queden aptas para su estudio. PROCESAMIENTO DE TEJIDOS El Procesamiento de muestras para anatomía patológica se las puede realizar de dos maneras manuales y automatizadas. Fijación Deshidratación Aclaramiento Incrustación o inclusión Corte de tejidos Tinción Observación Fijación (2 horas): en este paso el tejido obtenido se coloca en una sustancia fijadora para evitar los cambios post-mortem. • Unos de los fijadores más usado es el Formol al 10% (Formaldehido) formol Deshidratación (6 horas): se da por la presencia de alcoholes en este caso el etanol 50-90 %, se debe primero diluir el formol de mayor a menor para que no se endure la muestra. Aclaramiento (2 horas ): se usa Xilol o sustituto de Xilol que es incoloro y rico en plomo el tejido vuelve a su forma normal aclarándolo y blanqueando el tejido. Inclusión (2 horas) • Se debe lavar el tejido para quitar exceso de fijador, luego se deshidrata y se pasa por un líquido intermediario que es miscible con la parafina. •Infiltración: en este paso la muestra se coloca en parafina liquida, de manera que se impregne con ella.
- 4. TECNICAS HISTOLOGICAS Aquí se forman bloques de parafina y dentro de estos bloques están las muestras a estudiar. Se deja enfriar para que adquiera dureza. Corte: tallado Previo al corte, se debe tallar el bloque para el obtener secciones adecuadas en el micrótomo. El micrótomo es un instrumento que permite obtener cortes muy delgados de muestra (5μm). Los cortes se obtienen seriados, uno tras otro, obteniendo una cinta. Luego se echa a un baño de flotación para que se estiren y se rescatan con un portaobjetos, que luego se calienta para evaporar el agua y que los cortes queden adheridos. Tinción: las placas se tiñen con la técnica de hematoxilina/eosina u otra especial. La muestra debe desparafinarse y pasar por una serie de soluciones. Finalmente, las muestras se deshidratan y se montan para ser vistas al microscopio. Observación: el patólogo observa la muestra al microscopio y consigna el diagnóstico. El estudio de las muestras demora 12 horas en ser procesadas en caso de ser muestras de emergencia las muestras se procesaran en 3 días y las muestras de rutina de 8 a 15 días. EQUIPOS UTILIZADOS PARA EL PROCESAMIENTO DE MUESTRAS Estación de inclusión de tejidos en parafina acompañado de plancha fría Se trata de una estación modular de inclusión diseñada para el encastramiento del tejido y la confección de bloques de parafina, figura. Cuenta con un módulo calefactado de dispensación de parafina con una capacidad de 3 litros y una superficie de trabajo espaciosa así como zonas de almacenaje tanto para casetes como moldes. Todas las funciones se controlan a través de una pantalla LED de fácil lectura, incluido el ajuste de la temperatura para las bandejas de calentamiento derecha e izquierda, el depósito de parafina y la superficie de trabajo. Cuanta además con un porta-pinzas extraíble y calentable para 6 pinzas, accesible por los dos lados. La activación del flujo de parafina es mediante clip de altura ajustable y pivotable, cuya activación manual se hace mediante el molde de inclusión o con el dedo. La velocidad de flujo es regulable y los recipientes colectores de parafina extraíbles, calentados (de forma indirecta a través de la superficie de trabajo). Dicha superficie de trabajo es grande y de fácil limpieza con zona de enfriamiento integrada también para casetes extra grandes con sistema de salida de parafina.
- 5. TECNICAS HISTOLOGICAS La iluminación de la superficie de trabajo óptima gracias a la lámpara halógena ajustable individualmente. Y un portapinzas extraíble, calentable para 6 pinzas, accesible por los dos lados. La temperatura del depósito de casetes/moldes de inclusión, de la superficie de trabajo y del recipiente de parafina regulable entre 55° C y 70° C. La indicación de temperatura permanente para todos los rangos de trabajo. Se pueden programar los días y horas de trabajo para lograr un funcionamiento automático del equipo. Las bandejas calefactadas de los casetes y de los moldes son intercambiables para adaptarse a los cambios en el flujo de trabajo. Accesorios: Placa fría Pedalera Regulador de energía Micrótomo: Los micrótomos son instrumentos de corte para la elaboración de preparados que se usan en la microscopía. Para cumplir con las altas exigencias de tales preparados, los micrótomos permiten realizar cortes extremadamente finos. Los micrótomos en la elaboración de preparados para la microscopía Normalmente los micrótomos modernos permiten cortes de un espesor de 0,1 hasta 100 µm. A modo comparativo: El cabello humano tiene un espesor entre 50 y 70 µm. La historia de los micrótomos empezó con el inicio de los microscopios de luz. Para poder analizar objetos, estos debían ser lo suficientemente finos para que la luz los traspasara. Los primeros micrótomos eran en su inicio simples cuchillas (normalmente cuchillas de afeitar) con los que se hacían cortes de forma manual. Como las exigencias a los preparados iban en aumento, fue necesario que los micrótomos se desarrollaran. Los primeros micrótomos, tal como hoy en día los conocemos, se desarrollaron en 1770. Con estos se podía fijar la prueba y ajustar el grosor del corte mediante unos tornillos. Hoy en día, los micrótomos mecánicos se componen de un bloque, un sujeta-muestras y un equipo técnico para el control del avance. La calidad de los preparados depende del tipo de avance, de la geometría de la cuchilla y de la declinación (ángulo entre la cuchilla y la dirección de corte). Adicionalmente se puede influir en el resultado en la preparación de la muestra (mediante congelación).
- 6. TECNICAS HISTOLOGICAS BAÑO DE FLOTACION El baño de María es un equipo que se utiliza en el laboratorio para realizar pruebas serológicas y procedimientos de incubación, aglutinación, inactivación, biomédicos, farmacéuticos y hasta industriales. Por lo general, se utilizan con agua, pero también permiten trabajar con aceite. Los rangos de temperatura en los cuales normalmente son utilizados están entre la temperatura ambiente y los 60 °C. También se pueden seleccionar temperaturas de 100 °C, utilizando una tapa de características especiales. Los baños de María son fabricados con cámaras cuya capacidad puede seleccionarse entre los 2 y los 30 litros. ESTUFAS: La estufa de secado es un equipo que se utiliza para secar y esterilizar recipientes de vidrio y metal en el laboratorio. Se identifica también con el nombre de Horno de secado. Los fabricantes han desarrollado básicamente dos tipos de estufa: las que operan mediante convección natural y las que operan mediante convección forzada. Las estufas operan, por lo general entre la temperatura ambiente y los 350°C. Se conocen también con el nombre de pupinel. La estufa de secado se emplea para esterilizar o secarel material de vidrio y metal utilizado en los exámenes o prueba, que realiza el laboratorio y que proviene de la sección de lavado, donde se envía luego de ser usado en algún procedimiento. La esterilización que se efectúa en la estufa se denomina de calor seco y se realiza a 180°C durante 2 horas; la cristalería, al ser calentada por aire a alta temperatura, absorbe humedad y elimina la posibilidad de que se mantenga cualquier actividad biológica debido a las elevadas temperaturas y a los tiempos utilizados.
- 7. TECNICAS HISTOLOGICAS BATERIA DE TINCION: Las baterías de tinción serán única y exclusivas para el área donde se encuentren en este caso para el área de anatomía patológica; deben tener su respectiva rotulación en todas la cubetas; los colorantes se deben filtrar inmediatamente antes de llenar las cubetas usando un embudo y papel filtro además se requiere que la batería de tinción este bajo la campana de extracción de gases Se deben dar dos tipos de mantenimiento a los colorantes los cuales son: Mantenimiento general: el cual consiste en remover cada 8 días cualquier material celular que haya desprendido después de su respectiva filtración. Además se debe mirar los niveles de soluciones en las baterías de tinciones. Mantenimiento específico: en la hematoxilina se debe retirar la capa de aspecto metálico que se forman sobre los colorantes con papel absorbente o filtración. El etanol es indispensable mantenerlo bien tapado. 6.-CONCLUSIONES: Se pudo identificar y conocer las áreas que están dentro del laboratorio de anatomía patológica Se logró conocer cuál es la función de cada área y todos los procedimientos que se realizan dentro de las mismas. Se adquirió conocimiento en cuanto a al función que desempeña cada equipo dentro del laboratorio de anatomía patológica. 7.-RECOMENDACIONES: Se recomienda por parte de los estudiantes contar con todos los materiales de bioseguridad necesarios para las prácticas ya que son de gran importancia dentro del laboratorio. Se requiere tener el conocimiento previo a la práctica mediante la facilitación de la guía de cada laboratorio por parte del docente. Se debe mantener la calma dentro del mismo ya que se está conociendo y manejando equipos sumamente costosos que son de gran ayuda para nuestro aprendizaje.
- 8. TECNICAS HISTOLOGICAS 8.-BIBLIOGRAFIA: Gabriel M. (2006) Micrótomo. Disponible en: https://laboratorioap.wordpress.com/2015/05/13/el-microtomo/ Luis G. (2015) Importancia del Área de Macroscopia. Disponible en: http://histoscientifics.blogspot.com/2015/10/importancia-del-area-de-macroscopia- y.html García del Moral, R. (1993).Manual de laboratorio de anatomía patológica. Editorial MacGraw-Hill / Interamericana de España S.A Stevens, A. (2001).Anatomía patológica .Barcelona: Editorial lsevier España, S.A,
- 9. TECNICAS HISTOLOGICAS 9.-ANEXOS: ANEXO N°1 FOTOS DE LOS EQUIPOS UTILIZADOS EN EL LABORATORIODE ANATOMIA PATOLOGICA. IMAGENN°1 Estaciónde inclusiónde tejidos IMAGENN°2 Micrótomo IMAGENN°3 Equipoutilizadoparael bañode flotación IMAGENN°4 Batería de tinción