LABORATORIO No. 7
                                          PROTOZOOARIOS

GENERALIDADES:

Son organismos unicelulares de forma y tamaño variable.              Poseen diferentes organelos de
locomoción; flagelos, cilios y seudópodos.

Los protozoos existen en dos formas: la vegetativa o trofozoito que es la forma patógena, y la quística
o quiste que es la forma infectante. Los quistes son formas de resistencia. Los protozoos que se
transmiten por vía fecal-oral (amebas, giardias y balantidium) poseen fase quística mientras que los
que se transmiten por vectores (tripanosomas, leishmania, malaria) o por contacto íntimo
(trichomonas) no adoptan esta forma de resistencia.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS:

1. Establecer diferencias morfológicas para la identificación entre todos los géneros y especies de
   amebas.

2. Identificar los diversos estadíos parasitarios de la amebas (Trofozoitos y quistes)

PARTE I: PROTOZOOS INTESTINALES/CLASE RHIZOPODEA (AMEBAS)

De todas las amebas la única especie patógena para el hombre es la Entamoeba histolytica. Las
amebas se presentan en tres estadíos diferentes: trofozoito, prequiste y quiste. La Entamoeba
gingivalis y la Dientamoeba fragilis no presenta la forma quística. Las amebas parásitas del hombre
habitan todas en el tubo digestivo (intestino grueso) excepto la Entamoeba gingivalis que vive en la
boca. Para reconocer las diferentes especies de amebas es importante tener en cuenta las
siguientes características diagnósticas:

Tamaño
Movilidad
Diferencia entre endo y ectoplasma
La morfología del núcleo hace diagnóstico de especies.


Entamoeba histolyitica:

Es la más importante de todas las amebas se presenta en forma de trofozoito, prequiste y quiste.

Trofozoito: 20-30 micras, muy móvil, endoplasma granuloso y ectoplasma transparente, hialino.
Para su reconocimiento hay que observar las características del núcleo que tiene cariosoma central,
pequeño y la cromatina uniformemente distribuida. Se encuentran en las heces diarreicas y es el
único estadío que se encuentra en el absceso hepático amibiano.

Prequiste: Es el estadío intermedio entre el trofozoito y el quiste, inmóvil y con un solo núcleo.

Quiste: 10-18 micras. Es la forma más frecuente. En el interior se encuentran los núcleos hasta
cuatro o también los cuerpos cromatoidales en forma de grano de arroz con bordes redondeados y
estas estructuras también son suficientes para hacer el diagnóstico.

Todas las infecciones por E. histolytica deben tratarse.


Entamoeba coli:

No es patógena. También se presenta en tres estadíos:

Trofozoito: 30-40 micras, poco móvil, el ectoplasma es granuloso, su núcleo es fácilmente visible,
presentando una cariosoma excéntrico y la cromatina irregular.

Prequiste: 15-30 micras, apariencia incolora.        El núcleo presenta igual morfología que en el
trofozoito.

Quiste: 12-20 micras, presenta más de 4 núcleos, presenta cuerpos cromatoidales delgados y de
extremos astillados.
Endolimax nana:

Como la Entamoeba coli es un comensal.
Trofozoito: 6-15 micras, son muy pequeños, con múltiples seudópodos, de movimientos rápidos en
materias fecales recién emitidas. El núcleo se observa poco pero es refringente.

Quiste: Son muy pequeños generalmente con cuatro núcleos refringentes.


Iodamoeba butschilii:

Trofozoito: 8-20 micras, movimiento lento, citoplasma vacuolizado.

Quiste: son muy numerosos en las heces 8-15 micras y un solo núcleo, es fácil reconocerlo por la
vacuola de glucógeno.

DIAGNOSTICO DE AMIBIASIS:

1.Examen coprológico tomando de la región que contiene moco
2.Rectosigmoidoscopia
3.Cultivos

                                                                                  Entamoeba coli




             Entamoeba histolytica


                                            Iodamoeba bustchlii      Endolimax nana




            Entamoeba hartmani




                                     Entamoeba
                                     gingivalis




PARTE II: PROTOZOOS INTESTINALES/CLASE ZOOMASTIGOPHOREA (FLAGELADOS)

Son protozoarios que se mueven por medio de flagelos, los cuales pueden ser únicos o múltiples;
también pueden utilizar para su locomoción la membrana ondulante. Los siguientes son flagelados,
que habitan en el tubo digestivo y cavidades orgánicas. Los flagelados hemáticos y tisulares se
estudiarán más adelante. La Giardiasis y la Balantidiasis reciben tratamiento.

Giardia lamblia: Es el único flagelado que habita en el intestino delgado (duodeno-yeyuno). Adopta
una forma vegetativa o trofozoito que es la patógena, y una forma quística que es la resistente e
infectante.

Trofozoito: Tiene forma piriforme. Es el único protozoo intestinal que tiene simetría bilateral
completa. En el extremo anterior presenta dos núcleos con un cariosoma central grande, posee ocho
flagelos de los cuales dos son anteriores, dos son posteriores y cuatro restantes laterales.

Su extremidad anterior es redondeada y la posterior puntiaguda. En su porción ventral esta provisto
de una concavidad superficial (disco suctorio) con la que se fija a las células intestinales. Posee
además de una parte media, dos barras gruesas llamadas axonemas y además un par de
condensaciones que son cuerpos parabasales. Tienen movimiento unidireccional y en forma de
balanceo.

Quiste: Ovalados miden de 8 a 12 micras con un polo más redondeado que el otro. Cuando están
inmaduros tienen dos núcleos y los maduros cuatro. Con frecuencia presentan una envoltura con
doble pared. En el interior se observan una fibrillas curvas en forma de “S” que corresponden a los
futuros flagelos del trofozoito.
La enfermedad que produce se denomina giardiasis y el diagnóstico se realiza por la observación de
  los parásitos en materia fecal.


  Chilomastix mesnilli: Junto con la Giardia lamblia son los flagelados más frecuentes del intestino del
  hombre. Su hábitat más común es el colon. No es patógeno. Su presencia en el coprológico es
  indicativa de contaminación oro-fecal.

  Trofozoito: Presenta un cuerpo alargado piriforme. Mide de 6 a 20 miras. Tiene un núcleo esférico
  con cariosoma central situado hacia la parte media del polo anterior, también presenta un citostoma.
  Posee tres flagelos libres (dos cortos y uno largo) y otro que se encuentra en el interior del citostoma.

  Quiste: Son incoloros en forma de pera o limón. Miden de 7 a 10 micras. Es un comensal inocuo y no
  da sintomatología


  Trichomona hominis: Solo se le conoce el estado de trofozoito.

  Trofozoito: Es móvil, piriforme y mide de 7 a 15 micras, tiene de 3 a 5 flagelos libres y uno más
  bordeando los márgenes de la membrana ondulante, con el extremo posterior libre. Presenta un
  axostilo visible que sobresale por el extremo posterior del citoplasma. Su hábitat común es el área
  cecal del intestino grueso. El diagnóstico se realiza observando los trofozoitos en las heces y se
  diferencia de Giardia lamblia por el movimiento que presenta ya que es errático y muchas veces de
  rotación.

                                                                                    Giardia lamblia
                   Chilomastix mesnilii




N: Núcleo
CAR: Cariosoma
C: Citostoma
FL: Flagelo



                                                                  Trichomonas hominis




  PARTE III: PROTOZOOS INTESTINALES/CLASE CILIATA (CILIADOS)

  A esta clase pertenecen los protozoarios que se mueven por medio de cilias, las cuales son
  pequeñas prolongaciones citoplasmáticas que recubren todo el cuerpo del parásito. En la mayoría de
  ellos existe una boca llamada citostoma, por donde penetran los alimentos. Durante su ciclo vital
  presentan dos estadíos: la forma de trofozoito y la forma quística, por medio del cual se hace la
  transmisión de un individuo a otro.


  Balantidium coli: Es el mayor protozoario intestinal y el único ciliado patógeno para el hombre. La
  enfermedad se denomina Balantidiasis.

  Trofozoito: Su cuerpo esta cubierto de cilias, filamentos delgados, cortos, móviles, que por medio de
  sus movimientos realiza el desplazamiento del parásito. Dentro del citoplasma se aprecian vacuolas
  alimenticias. Posee dos núcleos el macronúcleo en forma de riñón y en su concavidad el micronúcleo
  de forma esférica. Presenta en su extremo anterior una boca y en el extremo posterior un pequeño
  poro, el citopigio para la expulsión de los alimentos. Mide de 50 a 200 micras. Vive en el intestino
  grueso donde produce ulceraciones semejantes a las de E. Histolyitica.

  Quiste: Miden de 40 a 70 micras, de forma esférica u oval. Se caracterizan por tener macronúcleo y
  una pared quística muy gruesa.
Balantidium coli




                                     PRACTICA # 7: PROTOZOARIOS


1. EJERCICIO:
De acuerdo a lo observado en el laboratorio dibuje los siguientes esquemas manteniendo la
proporción de los tamaños de los trofozoitos y quistes.

                                       Entamoeba histolyitica
                        Trofozoito                                Quiste




                                          Entamoeba coli
                        Trofozoito                                Quiste




                                          Endolimax nana
                        Trofozoito                                Quiste




                                        Iodamoeba butschilii
                        Trofozoito                                Quiste




                                          Giardia lamblia
                        Trofozoito                                Quiste




                                        Chilomastix mesnilli:
                        Trofozoito                                Quiste
PRACTICA # 7: PROTOZOARIOS

NOMBRE______________________________________FECHA________________GRUPO_____


2. RESPONDA:
Los dos parásitos más comunes que ocasionan prolapso rectal en los pacientes desnutridos son:
Entamoeba histolytica y Trichuris trichuiura. Observando usted la mucosa rectal prolapsada ¿Cómo
haría el diagnóstico diferencial para saber cuál de los dos parásitos esta produciendo esta
complicación? _____________________________________________________________________


3. COMPLETE LOS CICLOS DE VIDA:


                            CICLO DE VIDA DE Entamoeba histolytica




Describa los pasos por los cuales se inicia el recorrido del parásito desde su entrada hasta la salida
nuevamente del hospedero, además diga el estadío diagnóstico e infectivo.

1.   __________________________________________________________________________
2.   __________________________________________________________________________
3.   __________________________________________________________________________
4.   __________________________________________________________________________

A. Colonización: _____________________________________________________________
B. Enfermedad: ______________________________________________________________
C. Enfermedad: ______________________________________________________________
CICLO DE VIDA Giardia lamblia




Describa los pasos por los cuales se inicia el recorrido del parásito desde su entrada hasta la salida
nuevamente del hospedero, además diga el estadío diagnóstico e infectivo.

1. __________________________________________________________________________
2. __________________________________________________________________________
3. __________________________________________________________________________
4. __________________________________________________________________________
5. __________________________________________________________________________

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  • 1. LABORATORIO No. 7 PROTOZOOARIOS GENERALIDADES: Son organismos unicelulares de forma y tamaño variable. Poseen diferentes organelos de locomoción; flagelos, cilios y seudópodos. Los protozoos existen en dos formas: la vegetativa o trofozoito que es la forma patógena, y la quística o quiste que es la forma infectante. Los quistes son formas de resistencia. Los protozoos que se transmiten por vía fecal-oral (amebas, giardias y balantidium) poseen fase quística mientras que los que se transmiten por vectores (tripanosomas, leishmania, malaria) o por contacto íntimo (trichomonas) no adoptan esta forma de resistencia. OBJETIVOS ESPECÍFICOS: 1. Establecer diferencias morfológicas para la identificación entre todos los géneros y especies de amebas. 2. Identificar los diversos estadíos parasitarios de la amebas (Trofozoitos y quistes) PARTE I: PROTOZOOS INTESTINALES/CLASE RHIZOPODEA (AMEBAS) De todas las amebas la única especie patógena para el hombre es la Entamoeba histolytica. Las amebas se presentan en tres estadíos diferentes: trofozoito, prequiste y quiste. La Entamoeba gingivalis y la Dientamoeba fragilis no presenta la forma quística. Las amebas parásitas del hombre habitan todas en el tubo digestivo (intestino grueso) excepto la Entamoeba gingivalis que vive en la boca. Para reconocer las diferentes especies de amebas es importante tener en cuenta las siguientes características diagnósticas: Tamaño Movilidad Diferencia entre endo y ectoplasma La morfología del núcleo hace diagnóstico de especies. Entamoeba histolyitica: Es la más importante de todas las amebas se presenta en forma de trofozoito, prequiste y quiste. Trofozoito: 20-30 micras, muy móvil, endoplasma granuloso y ectoplasma transparente, hialino. Para su reconocimiento hay que observar las características del núcleo que tiene cariosoma central, pequeño y la cromatina uniformemente distribuida. Se encuentran en las heces diarreicas y es el único estadío que se encuentra en el absceso hepático amibiano. Prequiste: Es el estadío intermedio entre el trofozoito y el quiste, inmóvil y con un solo núcleo. Quiste: 10-18 micras. Es la forma más frecuente. En el interior se encuentran los núcleos hasta cuatro o también los cuerpos cromatoidales en forma de grano de arroz con bordes redondeados y estas estructuras también son suficientes para hacer el diagnóstico. Todas las infecciones por E. histolytica deben tratarse. Entamoeba coli: No es patógena. También se presenta en tres estadíos: Trofozoito: 30-40 micras, poco móvil, el ectoplasma es granuloso, su núcleo es fácilmente visible, presentando una cariosoma excéntrico y la cromatina irregular. Prequiste: 15-30 micras, apariencia incolora. El núcleo presenta igual morfología que en el trofozoito. Quiste: 12-20 micras, presenta más de 4 núcleos, presenta cuerpos cromatoidales delgados y de extremos astillados.
  • 2. Endolimax nana: Como la Entamoeba coli es un comensal. Trofozoito: 6-15 micras, son muy pequeños, con múltiples seudópodos, de movimientos rápidos en materias fecales recién emitidas. El núcleo se observa poco pero es refringente. Quiste: Son muy pequeños generalmente con cuatro núcleos refringentes. Iodamoeba butschilii: Trofozoito: 8-20 micras, movimiento lento, citoplasma vacuolizado. Quiste: son muy numerosos en las heces 8-15 micras y un solo núcleo, es fácil reconocerlo por la vacuola de glucógeno. DIAGNOSTICO DE AMIBIASIS: 1.Examen coprológico tomando de la región que contiene moco 2.Rectosigmoidoscopia 3.Cultivos Entamoeba coli Entamoeba histolytica Iodamoeba bustchlii Endolimax nana Entamoeba hartmani Entamoeba gingivalis PARTE II: PROTOZOOS INTESTINALES/CLASE ZOOMASTIGOPHOREA (FLAGELADOS) Son protozoarios que se mueven por medio de flagelos, los cuales pueden ser únicos o múltiples; también pueden utilizar para su locomoción la membrana ondulante. Los siguientes son flagelados, que habitan en el tubo digestivo y cavidades orgánicas. Los flagelados hemáticos y tisulares se estudiarán más adelante. La Giardiasis y la Balantidiasis reciben tratamiento. Giardia lamblia: Es el único flagelado que habita en el intestino delgado (duodeno-yeyuno). Adopta una forma vegetativa o trofozoito que es la patógena, y una forma quística que es la resistente e infectante. Trofozoito: Tiene forma piriforme. Es el único protozoo intestinal que tiene simetría bilateral completa. En el extremo anterior presenta dos núcleos con un cariosoma central grande, posee ocho flagelos de los cuales dos son anteriores, dos son posteriores y cuatro restantes laterales. Su extremidad anterior es redondeada y la posterior puntiaguda. En su porción ventral esta provisto de una concavidad superficial (disco suctorio) con la que se fija a las células intestinales. Posee además de una parte media, dos barras gruesas llamadas axonemas y además un par de condensaciones que son cuerpos parabasales. Tienen movimiento unidireccional y en forma de balanceo. Quiste: Ovalados miden de 8 a 12 micras con un polo más redondeado que el otro. Cuando están inmaduros tienen dos núcleos y los maduros cuatro. Con frecuencia presentan una envoltura con doble pared. En el interior se observan una fibrillas curvas en forma de “S” que corresponden a los futuros flagelos del trofozoito.
  • 3. La enfermedad que produce se denomina giardiasis y el diagnóstico se realiza por la observación de los parásitos en materia fecal. Chilomastix mesnilli: Junto con la Giardia lamblia son los flagelados más frecuentes del intestino del hombre. Su hábitat más común es el colon. No es patógeno. Su presencia en el coprológico es indicativa de contaminación oro-fecal. Trofozoito: Presenta un cuerpo alargado piriforme. Mide de 6 a 20 miras. Tiene un núcleo esférico con cariosoma central situado hacia la parte media del polo anterior, también presenta un citostoma. Posee tres flagelos libres (dos cortos y uno largo) y otro que se encuentra en el interior del citostoma. Quiste: Son incoloros en forma de pera o limón. Miden de 7 a 10 micras. Es un comensal inocuo y no da sintomatología Trichomona hominis: Solo se le conoce el estado de trofozoito. Trofozoito: Es móvil, piriforme y mide de 7 a 15 micras, tiene de 3 a 5 flagelos libres y uno más bordeando los márgenes de la membrana ondulante, con el extremo posterior libre. Presenta un axostilo visible que sobresale por el extremo posterior del citoplasma. Su hábitat común es el área cecal del intestino grueso. El diagnóstico se realiza observando los trofozoitos en las heces y se diferencia de Giardia lamblia por el movimiento que presenta ya que es errático y muchas veces de rotación. Giardia lamblia Chilomastix mesnilii N: Núcleo CAR: Cariosoma C: Citostoma FL: Flagelo Trichomonas hominis PARTE III: PROTOZOOS INTESTINALES/CLASE CILIATA (CILIADOS) A esta clase pertenecen los protozoarios que se mueven por medio de cilias, las cuales son pequeñas prolongaciones citoplasmáticas que recubren todo el cuerpo del parásito. En la mayoría de ellos existe una boca llamada citostoma, por donde penetran los alimentos. Durante su ciclo vital presentan dos estadíos: la forma de trofozoito y la forma quística, por medio del cual se hace la transmisión de un individuo a otro. Balantidium coli: Es el mayor protozoario intestinal y el único ciliado patógeno para el hombre. La enfermedad se denomina Balantidiasis. Trofozoito: Su cuerpo esta cubierto de cilias, filamentos delgados, cortos, móviles, que por medio de sus movimientos realiza el desplazamiento del parásito. Dentro del citoplasma se aprecian vacuolas alimenticias. Posee dos núcleos el macronúcleo en forma de riñón y en su concavidad el micronúcleo de forma esférica. Presenta en su extremo anterior una boca y en el extremo posterior un pequeño poro, el citopigio para la expulsión de los alimentos. Mide de 50 a 200 micras. Vive en el intestino grueso donde produce ulceraciones semejantes a las de E. Histolyitica. Quiste: Miden de 40 a 70 micras, de forma esférica u oval. Se caracterizan por tener macronúcleo y una pared quística muy gruesa.
  • 4. Balantidium coli PRACTICA # 7: PROTOZOARIOS 1. EJERCICIO: De acuerdo a lo observado en el laboratorio dibuje los siguientes esquemas manteniendo la proporción de los tamaños de los trofozoitos y quistes. Entamoeba histolyitica Trofozoito Quiste Entamoeba coli Trofozoito Quiste Endolimax nana Trofozoito Quiste Iodamoeba butschilii Trofozoito Quiste Giardia lamblia Trofozoito Quiste Chilomastix mesnilli: Trofozoito Quiste
  • 5. PRACTICA # 7: PROTOZOARIOS NOMBRE______________________________________FECHA________________GRUPO_____ 2. RESPONDA: Los dos parásitos más comunes que ocasionan prolapso rectal en los pacientes desnutridos son: Entamoeba histolytica y Trichuris trichuiura. Observando usted la mucosa rectal prolapsada ¿Cómo haría el diagnóstico diferencial para saber cuál de los dos parásitos esta produciendo esta complicación? _____________________________________________________________________ 3. COMPLETE LOS CICLOS DE VIDA: CICLO DE VIDA DE Entamoeba histolytica Describa los pasos por los cuales se inicia el recorrido del parásito desde su entrada hasta la salida nuevamente del hospedero, además diga el estadío diagnóstico e infectivo. 1. __________________________________________________________________________ 2. __________________________________________________________________________ 3. __________________________________________________________________________ 4. __________________________________________________________________________ A. Colonización: _____________________________________________________________ B. Enfermedad: ______________________________________________________________ C. Enfermedad: ______________________________________________________________
  • 6. CICLO DE VIDA Giardia lamblia Describa los pasos por los cuales se inicia el recorrido del parásito desde su entrada hasta la salida nuevamente del hospedero, además diga el estadío diagnóstico e infectivo. 1. __________________________________________________________________________ 2. __________________________________________________________________________ 3. __________________________________________________________________________ 4. __________________________________________________________________________ 5. __________________________________________________________________________