Microbiologgia
- 1. BACTERIAS GRAM NEGATIVAS D O C E N T E D o c . Y a n e t M e n d o z a . . . INTEGRANTES Chapi Huillca Caludia Condori Huaraka Mirian Laura Estrella Navarro Caceres
- 2. INTRODUCCION En microbiología, se denominan bacterias Gram negativas a aquellas bacterias que NO se tiñen de azul oscuro o violeta por la tinción de Gram, y lo hacen de un color rosado tenue: de ahí el nombre de "Gram-negativas" o también "gramnegativas".1 Esta característica está íntimamente ligada a la estructura didérmica dada por la envoltura celular, pues presenta doble membrana celular (una externa y la otra citoplasmática), lo que refleja un tipo natural de organización bacteriana. Son uno de los principales supergrupos de bacterias y cuando se tratan como taxón se utiliza también el nombre de Negibacteria2 o Didermata. Las restantes son las bacterias Gram positivas. Las bacterias Gram-negativas presentan dos membranas lipídicas entre las que se localiza una fina pared celular de peptidoglicano, mientras que las bacterias Gram-positivas presentan sólo una membrana lipídica y la pared de peptidoglicano es mucho más gruesa. Al ser la pared fina, no retiene el colorante durante la tinción de Gram.3 Muchas especies de bacterias Gram-negativas causan enfermedades. Los cocos Gram-negativos causan la gonorrea (Neisseria gonorrhoeae), meningitis (Neisseria meningitidis) y síntomas respiratorios (Moraxella catarrhalis), entre otros. Los bacilos Gram-negativos incluyen un gran número de especies. Algunos de ellos causan principalmente enfermedades respiratorias (Haemophilus influenzae, Klebsiella pneumoniae , Legionella pneumophila, Pseudomonas aeruginosa), enfermedades urinarias (Escherichia coli, Proteus mirabilis, Enterobacter cloacae, Serratia marcescens) y enfermedades gastrointestinales (Helicobacter pylori, Salmonella enteritidis, Salmonella typhi). Otros están asociadas a infecciones nosocomiales (Acinetobacter baumanii). OBJETIVOS: *Determinar la diferencia entre de bacterias de Gram negativas. *Aprender la clasificación de las distintas bacterias BACILOS ENTE RICOS GRAM NEGATIVOS INTRODUCCIÓN
- 3. Las enterobacteriáceas son una familia de bacterias Gram negativas que contiene más de 30 géneros y más de 100 especies que pueden tener morfología de bacilos o cocos. Los miembros de esta familia forman parte de la microbiota del intestino(llamados coliformes) y de otros órganos del ser. Algunas especies pueden vivir en tierra, en plantas o en animales acuáticos. Son anaeróbicos facultativos. Son oxidasa negativo. ESTRUCTURA ANTIGENICA Las enterobacterias tienen una compleja estructura antigénica, se han clasificado mas de 150 diferentes antígenos: * Somáticos O (lipopolisacárido) termoestable * Atg K (capsulares) termolábiles * Atg H (flagelares) En la Salmonella typhi, los antígenos capsulares se denominan Vi. Los antígenos O constituyen en la parte más externa de la pared celular. Los anticuerpos a los antígenos O con Ig M. COLICINAS Muchas bacterias gramnegativas producen bacteriocinas, son sustancias bactericidas producidas por ciertas cepas de bacterias activas contra cepas de bacterias de la misma especie, su producción está controlada por plásmidos. * Escherichia coli produce colicinas * Serratia produce marcescinas * Pseudomona produce piocinas Las cepas productoras de bacteriocinas son resistentes a sus propias bacteriocina. Son un grupo heterogéneo de bacilos gramnegativos, su hábitat natural esta en intestinos de humanos y animales por lo general son micoorganismos aerobio. Ejemplo: Escherichia Shigella Salmonella Enterobacter. Klebsiella
- 4. CARACTERISTICAS Fermentacion de carbohidratos Poseen una estructura antigénica compleja Producen varias toxinas y otros factores de virulencia Tambien se les llama coliformes ESCHERICHIA COLI Escherichia ocasiona reacciones positivas para indol, lisina descarboxilasa y fermentacion del manitol, y produce gas a partir de la glucosa. Los aislados a partir de la orina pueden identificarse con rapidez como E. coli por la hemólisis sobre agar. GRUPO KLEBSIELLA-ENTEROBACTER-SERRATIA Especies de klebsiella muestran crecimiento mucoide, grandes cápsulas de polisacáridos, ausencia de moVilidad y por lo general dan pruebas positivas para la lisina descarboxilasa. Las enterobacter resultado positivo en pruebas de motilidad, citrato y ornitina descarboxilasa y producen gas a partir de la glucosa. SHIGELLA Y SALMONELA No poseen motilidad y en general no fermentan la lactosa, pero si otros carbohidratos, produciendo ácido aunque no gas.
- 5. Salmonela: bacilos dorados de motilidad que característicamente fermentan glucosa y manosa sin producción da gas, pero no fermentan lactosa o sacarosa. Son patógenas para animales. ESTRUCTURA ANTÍGENICA 150 antígenos somáticos O (lipopolisacáridos) termoestables 100 antígenos K (capsulares) termolábiles 50 antígenos H (flagelares) LOS ANTÍGENOS O Parte mas externa de la pared lipopolisacárida de la célula y constan de unidades repetidas de polisacáridos. Estos contienen azúcares únicos, son resistentes al calor y al alcohol, poseen anticuerpos son de clase IgM Un solo microorganismo puede ser portador de varioas antígenos O (todas las shigelas comparten 1 o mas antígenos O con la E. coli) LOS ANTIGENOS k Y H Son antígenos O externos, Polisacáridos. Se localizan sobre los flagelos y se desnaturalizan o retiran mediante calor o alcohol . Se acumulan con anticuerpos h principalmente la IgG ENFERMEDADES CAUSADAS E. coli infecciones del aparato urinario.90%en las mujeres jóvenes. Signos y sintomas: poluria, disuria, hematuria. Enfermedades diarreicas: propiedades de adherencias las células epiteliales de los intestinos gruesos y delgados
- 6. Septicemia: torrente sanguíneo Meningitis: en los niños. Klebsiella:neumoniabacteriana, infección del aparato urinario SHIGELLAS Bacilos gramnegativos de forma cocobacilares Anaerobios facultativos Infecciones se limitan al aparato gastrointestinal Son muy transmisibles
- 7. La S. dysenteriae produce una exotoxina termolabil que afecta al intestino y el SNC Esta exotoxina inhibe la absorción de azúcar y aminoácidos en el intestino delgado Periodo de incubación d 1 a 2 días hay dolor abdominal, fiebre y diarrea Los anticuerpos a los antígenos somáticos son IgM. SALMONELLA Flagelos perítricos Sobreviven en agua congelada durante periodos prolongados Salmonella Typhi, choleraesuis pueden provocar “fiebres entéricas” o fiebre tifoidea .Periodo de incubacion de 10 a 14 dias hay fiebre malestar cefalea estreñimiento bradicardia y mialgia. La bradicardia es una alteración del ritmo al que late el corazón, concretamente se trata de un descenso en la frecuencia cardíaca. La mialgia es un dolor localizado en uno o más músculos.
- 8. B. Klebsiella-Enterobacter-Serratia; Proteus-Morganella-Providencia; y Citrobacter La patogenia de la enfermedad causada por estos grupos de bacilos gramnegativos entéricos es similar a la de los factores inespecíficos en la enfermedad causada por E. coli. 1. Klebsiella. K. pneumoniae Está presente en el sistema respiratorio y en las heces de casi 5% de las personas sanas.Produce una pequeña proporción (alrededor de 1%) de las neumonías bacterianas. K. pneumoniae puede producir una consolidación pulmonar necrosante por hemorragia extensa. Produce infecciones urinarias y bacteriemia con lesiones focales en pacientes débiles. Otros microorganismos entéricos también producen neumonía. Las bacterias del género Klebsiella figuran entre las 10 principales bacterias patógenas que ocasionan infecciones hospitalarias. Se han aislado otras dos klebsielas relacionadas con trastornos inflamatorios de las vías respiratorias altas: Klebsiella pneumoniae subespecie ozaenae de la mucosa nasal en ozena, una atrofia fétida y progresiva de las mucosas; y Klebsiella pneumoniae subespecie rhinoscleromatis del rinoescleroma, un granuloma destructor de la nariz y la faringe. Klebsiella granulomatis (antes Calymmatobacterium granulomatis) produce una enfermedad ulcerosa genital crónica. 2. Enterobacter. Tres bacterias del género Enterobacter, E. cloacae, E. aerogenes y E. zakazakii (recién cambiado al género Cronobacter), producen la mayor parte de las infecciones por bacterias del género Enterobacter. Estas bacterias fermentan lactosa, pueden contener cápsulas que producen colonias mucoides y son móviles. Tales microorganismos son causa de una amplia gamma de infecciones hospitalarias como neumonía, infecciones urinarias, infecciones de heridas y dispositivos. La mayor parte de las cepas poseen una lactamasa β cromosómica denominada ampC que las vuelven intrínsecamente resistentes a la ampicilina y a
- 9. las cefalosporinas de primera y segunda generaciones. Las mutantes suelen producir en exceso lactamasa β que confi ere resistencia a las cefalosporinas de tercera generación. 3. Serratia. S. marcescens : Es un microorganismo patógeno oportunista frecuente en pacientes hospitalizados. Serratia (por lo general no pigmentada) produce neumonía, bacteriemia y endocarditis, sobre todo en adictos a narcóticos y en pacientes hospitalizados. Sólo cerca de 10% de las cepas forma el pigmento rojo (prodigiosina) que por mucho tiempo ha caracterizado a Serratia marcescens. S. marcescens suele tener resistencia a múltiples aminoglucósidos y penicilinas; las infecciones se puedentratar con cefalosporinas de tercera generación. 4. Proteus. Las bacterias del género Proteus producen infecciones en el ser humano sólo cuando las bacterias salen del tubo digestivo. Se encuentran presentes en las infecciones urinarias y producen bacteriemia, neumonía y lesiones focales en pacientes débiles o en los que reciben infusiones intravenosas. P. mirabilis produce infecciones de las vías urinarias y en ocasiones otras infecciones. Proteus vulgaris y Morganella morganii son microorganismos patógenos de infecciones hospitalarias. Las bacterias del género Proteus producen ureasa, que resulta en una hidrólisis rápida de la urea con liberación de amoniaco. Por consiguiente, en las infecciones de las vías urinarias con Proteus, la orina se vuelve alcalina y favorece la formación de cálculos imposibilitando prácticamente la acidifi cación. La motilidad rápida de Proteus puede contribuir a la invasión del sistema urinario. Las cepas de Proteus tienen una sensibilidad muy variable a los antibióticos. P. mirabilis suele inhibirse con penicilinas; los antibióticos más activos de otros miembros del grupo son los aminoglucósidos y las cefalosporinas. 5. Providencia. Las bacterias del género Providencia (Providencia rettgeri, Providencia alcalifaciens y Providencia stuartii) son miembros de la microfl ora intestinal
- 10. normal. Todos producen infecciones urinarias y a menudo son resistentes al tratamiento antimicrobiano. 6. Citrobacter. Citrobacter puede causar infecciones urinarias y septicemia. Pruebas diagnósticas de laboratorio A. Muestras Las muestras incluyen orina, sangre, pus, líquido cefalorraquídeo, esputo u otro material orgánico, según lo determine la ubicación del proceso patológico. B. Frotis Las Enterobacteriaceae tienen una estructura morfológica parecida entre sí. La presencia de grandes cápsulas es sugestiva de Klebsiella. C. Cultivo Las muestras se colocan en placas de agar sangre y medios diferenciadores. Con los medios diferenciadores, a menudo es factible la identificación preliminar rápida de las bacterias entéricas gramnegativas. Inmunidad Los anticuerpos específicos se presentan en infecciones sistémicas,pero no se ha determinado si después ocurre inmunidad importante contra los microorganismos. Tratamiento No se dispone de ningún tratamiento individual específi co. Las sulfonamidas, la ampicilina, las cefalosporinas, las fl uoroquinolonas y los aminoglucósidos tienen efectos antibacterianos notables contra los entéricos, pero es importante la variación de la susceptibilidad y las pruebas de laboratorio para conocer la susceptibilidad a los antibióticos. Es frecuente la resistencia a múltiples fármacos y está sujeta al control de plásmidos transmisibles. LAS SHIGELAS
- 11. El hábitat natural de las shigelas está limitado al tubo digestivo de seres humanos y otros primates, donde producen disentería bacilar. Morfología e identificación A. Microorganismos típicos Las shigelas son bacilos gramnegativos delgados; las formas cocobacilares se presentan en cultivos de jóvenes. B. Cultivo Las shigelas son anaerobios facultativos pero se multiplican mejor en condiciones aeróbicas. Las colonias convexas, circulares, transparentes con bordes intactos alcanzan un diámetro de casi 2 mm en 24 h. C. Características de crecimiento Todas las shigelas fermentan glucosa. Con excepción de Shigella sonnei ellas no fermentan lactosa. La imposibilidad para fermentar lactosa distingue a las shigelas en los medios diferenciadores. Las shigelas forman ácido a partir de hidratos decarbono pero pocas veces producen gas. También se dividen en las que fermentan manitol y en las que no lo fermentan. Estructura antigénica Las shigelas tienen un patrón antigénico complejo. Hay gran superposición en el comportamiento serológico de diferentes especies y la mayor parte de ellas comparten antígenos O con otros bacilos entéricos. Los antígenos O somáticos de las shigelas son lipopolisacáridos. Su especificidad serológica depende del polisacárido. Existen más de 40 serotipos. La clasificación de las shigelas se basa en las características bioquímicas y antigénicas. Patogenia y anatomía patológica Las infecciones por Shigella casi siempre están limitadas al tubo digestivo; la invasión de la circulación sanguínea es poco frecuente. Las shigelas son muy
- 12. transmisibles; la dosis infecciosa es del orden de 103 microorganismos (en tanto que por lo general es de 105 a 108 para salmonelas y vibrios). El proceso patológico esencial es la invasión de las células del epitelio de la mucosa (p. ej., las células M) por la fagocitosis activada, el escape de la vacuola fagocítica, la multiplicación y la diseminación dentro del citoplasma de la célula epitelial y su paso a las células adyacentes. Los microabscesos de la pared del intestino grueso y la porción terminal del intestino desencadenan necrosis de la mucosa, ulceración superfi cial, hemorragia y formación de una “seudomembrana” en la zona ulcerosa. Ésta consta de fi brina, leucocitos, residuos celulares, una mucosa necrótica y bacterias. A medida que cede el proceso, el tejido de granulación llena las úlceras y se forma un tejido cicatrizal. Toxinas A. Endotoxina Con la autólisis, todas las shigelas liberan su lipopolisacárido tóxico. Esta endotoxina probablemente contribuye a la irritación de la pared intestinal.
- 13. B. Exotoxina de Shigella dysenteriae S. dysenteriae de tipo 1 (bacilo de Shiga) produce una exotoxina termolábil que afecta tanto al intestino como al sistema nervioso central. La exotoxina es una proteína antigénica (estimula la producción de antitoxinas) y letal para los animales de experimentación. Al actuar como una enterotoxina, produce diarrea lo mismo que la toxina similar a Shiga de E. coli, tal vez por el mismo mecanismo. En los seres humanos, la exotoxina también inhibe la absorción de glúcidos y aminoácidos en el intestino delgado. Al actuar como una “neurotoxina”, este material puede contribuir a la gravedad extrema y carácter letal de las infecciones por S. dysenteriae y a las reacciones del sistema nervioso central que se observan en ella (p. ej., meningismo, coma). Los pacientes con infecciones por Shigella fl exneri o Shigella sonnei presentan antitoxina que neutraliza la exotoxina de S. dysenteriae in vitro. La actividad tóxica es diferente a las propiedades invasivas de shigela en la disentería. Las dos pueden tener una acción sucesiva, la toxina produce una diarrea voluminosa no sanguinolenta inicial y la invasión del intestino delgado da por resultado una disentería tardía con sangre y pus en las heces. Manifestaciones clínicas Tras un periodo de incubación breve (uno a dos días) hay instauración súbita de dolor abdominal, fiebre y diarrea líquida. La diarrea se atribuye a una exotoxina que tiene acción en el intestino delgado (véase antes). Más o menos un día después, a medida que la infección afecta al íleon y al colon, aumenta el número de deposiciones; son menos líquidas pero a menudo contienen moco y sangre. Cada evacuación se acompaña de pujo y tenesmo (espasmos rectales), con dolor abdominal bajo consiguiente. En más de la mitad de los casos de adultos, la fiebre y la diarrea ceden en forma espontánea en un lapso de dos a cinco días. Sin embargo, en los niños y los ancianos, la pérdida de agua y electrólitos puede desencadenar deshidratación, acidosis e incluso la muerte. La enfermedad causada por S. dysenteriae puede ser muy grave. Con el restablecimiento, la mayoría de las personas eliminan bacilos de la disentería por un breve periodo, pero algunos se mantienen como portadores intestinales crónicos y pueden tener
- 14. ataques recidivantes de la enfermedad. Tras el restablecimiento de la infección, la mayoría de las personas presenta anticuerpos circulantes contra shigelas, pero no las protegen contra la reinfección. Pruebas diagnósticas de laboratorio A. Muestras Las muestras comprenden heces en fresco, muestras de moco y exudados rectales para cultivo. En el examen microscópico suele observarse un gran número de leucocitos fecales y algunos eritrocitos. Las muestras de suero, si es conveniente, se deben tomar a un intervalo de 10 días para demostrar elevación de los títulos de anticuerpos aglutinantes. B. Cultivo Los materiales se aplican en estrías de medios diferenciadores (p. ej., agar de MacConkey o EMB) y en medios selectivos (agar entérico de Hektoen o agar Salmonella-Shigella), que suprimen otras Enterobacteriaceae y microorganismos grampositivos. Las colonias incoloras (lactosa-negativas) se inoculan en agar hierro y glúcidos triple. Los microorganismos que no producen H2S, que producen ácido pero no gas en el extremo y una inclinación alcalina en medio de agar hierro y glúcidos triples y que no son móviles deben ser objeto de una aglutinación en el portaobjetos con antisueros específi cos contra Shigella. C. Serología Las personas normales a menudo tienen aglutinina contra varias especies de Shigella. Sin embargo, las determinaciones seriales de títulos de anticuerpo pueden mostrar una elevación del anticuerpo específico. No se realiza diagnóstico serológico en las infecciones por Shigella. Inmunidad La infección va seguida de una respuesta de anticuerpos de tipo específico. La inyección de las shigelas muertas estimula la producción de anticuerpos en suero
- 15. pero no logra proteger al ser humano contra la infección. Los anticuerpos de IgA en el intestino son importantes para limitar la reinfección. Éstos pueden ser estimulados por cepas de microorganismos vivos atenuados que se administran por vía oral como vacunas experimentales. Los anticuerpos séricos para los antígenos somáticos de Shigella son IgM. Tratamiento Ciprofl oxacina, ampicilina, doxiciclina y trimetoprim-sulfametoxazol suelen ser muy inhibidores de las cepas de Shigella y pueden suprimir los ataques clínicos agudos de la disentería y abreviar la duración de los síntomas. Es posible que no erradiquen los microorganismos del intestino. La resistencia a múltiples fármacos puede transmitirse por plásmidos y son frecuentes las infecciones resistentes al tratamiento. Muchos casos ceden de manera espontánea. Se deben evitar los opiáceos en la disentería por Shigella. Epidemiología, prevención y control Las shigelas son transmitidas por los alimentos, los dedos, las heces y las moscas (“food, fingers, feces and flies”) de persona a persona. La mayor parte de los casos de infección por shigela se presenta en niños menores de 10 años de edad. La shigelosis se ha convertido en un problema importante en las guarderías en Estados Unidos. S. dysenteriae puede propagarse ampliamente. Se ha intentado quimioprofi laxis masiva por periodos limitados (p. ej., en personal militar), pero las cepas resistentes de shigelas tienden a surgir con rapidez. Puesto que los seres humanos son el principal hospedador reconocido de las shigelas patógenas, los esfuerzos de control deben dirigirse a eliminar los microorganismos de este reservorio mediante: 1) control sanitario del agua, alimentos y leche; eliminación del agua residual; y control de las moscas; 2) aislamiento de los pacientes y desinfección de las excretas; 3) detección de los casos asintomáticos y portadores, sobre todo personas que manejan alimentos, y 4) tratamiento antimicrobiano de los individuos infectados. EL GRUPO SALMONELLA-ARIZONA
- 16. Las salmonelas suelen ser patógenas en el ser humano o en los animales cuando se adquieren por la vía oral. Son transmitidas de los animales y los productos animales al ser humano, donde producen enteritis, infección sistémica y fiebre entérica. Morfología e identificación Las salmonelas tienen una longitud variable. La mayor parte de las cepas son móviles con flagelos peritricosos; se multiplican fácilmente en medios simples, pero casi nunca fermentan lactosa ni sacarosa. Forman ácido y a veces gas a partir de glucosa y manosa. Suelen producir H2S. Sobreviven al congelamiento en agua por periodos prolongados. Las salmonelas son resistentes a determinadas sustancias químicas (p. ej., verde brillante, tetrationato de sodio, desoxicolato de sodio) que inhiben otras bacterias entéricas; estos compuestos son, por tanto, útiles para incluirlos en medios para aislar salmonelas de las heces. Clasificación La clasificación de las salmonelas es compleja porque los microorganismos son un continuo más que una especie defi nida. Los miembros del género Salmonella fueron clasificados originalmente con base en la epidemiología, la gama de hospedadores, las reacciones bioquímicas y las estructuras de los antígenos O, H y Vi (cuando están presentes). Los nombres (p. ej., Salmonella typhi, Salmonella typhimurium) fueron escritos como si fuesen género y especie; esta forma de la nomenclatura permanece generalizada pero se utiliza en forma incorrecta. Los estudios de hibridación de DNA-DNA han demostrado que hay siete grupos evolutivos. En la actualidad, el género Salmonella se divide en dos especies, cada una de las cuales contiene múltiples subespecies y serotipos. Las dos especies son Salmonella entérica y Salmonella bongori (antiguamente subespecie V). Salmonella enterica contiene cinco subespecies: subespecie entérica (subespecie I); subespecie salamae (subespecie II); subespecie arizonae (subespecie IIIa); subespecie diarizonae (subespecie IIIb); subespecie houtenae (subespecie IV) y subespecie indica (subespecie VI). Casi todas las infecciones de seres humanos son causadas por las cepas de la subespecie I, que se designa como Salmonella
- 17. enterica subespecie enterica. Pocas veces las infecciones humanas son causadas por las subespecies IIIa y IIIb o las otras subespecies que suelen encontrarse en animales de sangre fría. A menudo estas infecciones se relacionan con mascotas exóticas, como los reptiles. Parece probable que la nomenclatura ampliamente aceptada para la clasifi cación será la siguiente: S. enterica subespecie enterica serotipo Typhimurium, que puede abreviarse a Salmonella Typhimurium con el nombre del género en cursivas y el nombre del serotipo en tipo romano. Los laboratorios de referencia nacionales e internacionales pueden utilizar las fórmulas antigénicas que siguen al nombre de las subespecies porque imparten información más precisa sobre las cepas (cuadro 15-4). Hay más de 2 500 serotipos de salmonelas, incluidos más de 1 400 en el grupo de hibridación de DNA I que puede infectar al ser humano. Cuatro serotipos de salmonela que producen fiebre entérica pueden identificarse en el laboratorio clínico mediante análisis bioquímicos y serológicos. Estos serotipos deben identificarse en forma sistemática debido a su importanciaclínica. Son los siguientes: Salmonella Paratyphi A (serogrupoA), Salmonella Paratyphi B (serogrupo B), Salmonella Choleraesuis(serogrupo C1) y Salmonella Typhi (serogrupo D). La Salmonella serotipos Enteritidis y Typhimurium son los dos serotipos más frecuentes notifi cados en Estados Unidos. Las más de otras 1 400 salmonelas que se aíslan en los laboratorios clínicos se seroagrupan por sus antígenos o en los serogrupos A, B, C1, C2, D y E; algunos no son tipifi cables con esta serie de antisueros. Las cepas son luego remitidas a los laboratorios de referencia para la identifi cación serológica defi nitiva. Esto permite a las autoridades de salud pública vigilar y evaluar la epidemiología de las infecciones por Salmonella en cada estado y en todo el país. Variación Los microorganismos pueden perder los antígenos H y volverse no móviles. La pérdida del antígeno O conlleva un cambio de la forma de colonia lisa a la rugosa. El antígeno Vi puede perderse en forma parcial o completa. Los antígenos pueden adquirirse (o perderse) durante el proceso de transducción.
- 18. Patogenia y manifestaciones clínicas Salmonella Typhi, Salmonella Choleraesuis y tal vez Salmonella Paratyphi A y Salmonella Paratyphi B son infecciosas principalmente para el ser humano y la infección por estos microorganismos implica la adquisición de una fuente humana. Sin embargo, la mayor parte de las salmonelas son principalmente patógenas en los animales que constituyen el reservorio para la infección humana: pollos, cerdos, roedores, ganado vacuno, mascotas (desde tortugas hasta papagayos) y muchos otros. Los microorganismos casi siempre entran a través de la vía oral, por lo general con alimentos o bebidas contaminados. La dosis infecciosa media para producir infección manifi esta o asintomática en el ser humano es 105 a 108 salmonelas (pero tal vez un mínimo de 103 microorganismos de la especie Salmonella typhi). Entre los factores relacionados con el hospedador que contribuyen a la resistencia a la infección por Salmonella están la acidez gástrica, la microflora intestinal normal y la inmunidad intestinal local. Las salmonelas producen tres tipos de enfermedad en el ser humano, pero son frecuentes las formas mixtas(cuadro 15-5). A. Las “fiebres entéricas” (fiebre tifoidea) Este síndrome es producido sólo por algunas de las salmonelas, de las cuales Salmonella Typhi (fi ebre tifoidea) es la más importante. Las salmonelas ingeridas llegan al intestino delgado, desde el cual entran en los linfáticos y luego a la circulación sanguínea. Son transportadas por la sangre a muchos órganos, incluido el intestino. Los microorganismos se multiplican en el tejido linfoide intestinal y son excretados en las heces. Tras un periodo de incubación de 10 a 14
- 19. días, se presenta fiebre, malestar, cefalea, estreñimiento, bradicardia y mialgia. La fiebre se eleva hasta alcanzar una meseta alta y se presenta esplenomegalia y hepatomegalia. Las manchas de color de rosa, por lo general en la piel de la pared abdominal o del tórax se presentan brevemente en casos esporádicos. Las concentraciones de leucocitos son normales o bajas. En la época previa a los antibióticos, las principales complicaciones de la fiebre entérica eran hemorragia intestinal y perforación y la tasa de mortalidad era 10 a 15%. El tratamiento con antibióticos ha disminuido la tasa de mortalidad a menos de 1%. Las principales lesiones son hiperplasia y necrosis del tejido linfoide (p. ej., placas de Peyer, hepatitis, necrosis focal del hígado e inflamación de la vesícula biliar, el periostio, los pulmones y otros órganos. B. Bacteriemia con lesiones focales Por lo común se relaciona con S. choleraesuis pero puede causarla cualquier serotipo de salmonela. Después de la infección oral, hay una invasión inicial de la circulación sanguínea (con posibles lesiones focales en pulmones, huesos, meninges, etc.), pero no suelen presentarse las manifestaciones intestinales. Los hemocultivos son positivos. C. Enterocolitis Ésta es la manifestación más frecuente de la infección por salmonela. En Estados Unidos, destacan Salmonella Typhimurium y Salmonella Enteritidis, pero las enterocolitis son causadas por cualquiera de los más de 1 400 serotipos de salmonelas del grupo I. Después de 8 a 48 h de la ingestión de las salmonelas se presentan náusea, cefalea, vómito y diarrea abundante, con escasos leucocitos en las heces. Es frecuente la febrícula, pero el episodio suele resolverse en un lapso de dos a tres días. Se presentan las lesiones inflamatorias del intestino delgado y colon. La bacteriemia es poco común (2 a 4%) excepto en las personas inmunodefi cientes. Los hemocultivos suelen ser negativos, pero los coprocultivos son positivos para salmonela y pueden mantenerse positivos por varias semanas después del restablecimiento clínico. Pruebas diagnósticas de laboratorio
- 20. A. Muestras La sangre para cultivo se debe obtener varias ocasiones. En casos de fiebre entérica y septicemia, los hemocultivos suelen ser positivos en la primera semana de la enfermedad. Los cultivos de médula ósea son útiles. Los cultivos de orina pueden ser positivos después de la segunda semana. Las muestras de las heces también se deben obtener en forma repetida. En la fiebre entérica, las heces producen resultados B. Métodos bacteriológicos para aislamiento de salmonelas 1. Cultivos en medio diferencial. El medio de EMB, MacConkey o desoxicolato permite la detección rápida de microorganismos que no fermentan lactosa (no sólo salmonelas y shigelas sino también Proteus, Serratia, Pseudomonas, etc.). Los microorganismos grampositivos son inhibidos en cierto grado. El medio de sulfi to de bismuto permite la detección rápida de salmonelas que forman colonias negras a causa de la producciónde H2S. Muchas salmonelas producen H2S. 2. Cultivos en medio selectivo. La muestra se coloca en placa de agar salmonela-shigela (SS), agar entérico Hektoen, XLD o agar desoxicolato-citrato, que favorecen la multiplicación de las salmonelas y las shigelas más que de otras Enterobacteriaceae. 3. Cultivos de enriquecimiento. La muestra (por lo general las heces) también se coloca en caldo de selenita F o de tetrationato, los cuales inhiben la replicación de las bacterias intestinales normales y permiten la multiplicación de las salmonelas. Después de la incubación durante uno a dos días, éste se coloca en placas con medios diferenciales y selectivos. 4. Identifi cación fi nal. Las colonias sospechosas de medios sólidos se identifican can por los tipos de reacción bioquímica (cuadro 15-1) y las pruebas de aglutinación en portaobjetos con sueros específicos. C. Métodos serológicos
- 21. Se utilizan técnicas serológicas para identificar cultivos desconocidos con sueros conocidos (véase adelante) y también se puede utilizar para determinar títulos de anticuerpo en pacientes con enfermedades desconocidas, aunque las últimas no son muy útiles para el diagnóstico de las infecciones por Salmonella. 1. Prueba de aglutinación. En esta prueba, los sueros conocidos y el cultivo desconocido se mezclan en un portaobjetos. El apiñamiento, cuando ocurre, se puede observar a los pocos minutos. Esta prueba es muy útil para la identificación preliminar rápida de los cultivos. Se dispone de estuches comerciales para aglutinar y determinar el serogrupo de las salmonelas mediante sus antígenos O: A, B, C1, C2, D y E. 2. Prueba de aglutinación con dilución en tubo (prueba de Widal). Las aglutininas séricas aumentan de manera brusca durante la segunda y la tercera semanas de la infección por Salmonella Typhi. La prueba de Widal para detectar estos anticuerpos contra los antígenos O y H se ha utilizado por decenios. Se necesitan por lo menos dos muestras de suero, obtenidas a intervalos de siete a 10 días, para demostrar una elevación del título de anticuerpo. Las diluciones seriales de sueros desconocidos se evalúan contra antígenos de salmonelas representativas. Ocurren resultados falsos positivos y falsos negativos. Los criterios de interpretación cuando se evalúan muestras de suero individuales son variables, pero se considera positivo un título contra el antígeno O >1:320 y contra el antígeno H >1:640. En algunos portadores hay títulos elevados de anticuerpos contra el antígeno Vi. Las alternativas a la prueba de Widal comprenden los métodos colorimétrico rápido y de inmunoanálisis enzimático. Hay informes contradictorios en la bibliografía en torno a la superioridad de estos métodos con respecto a la prueba de Widal. No se puede confi ar en los resultados de las pruebas serológicas para la infección por Salmonella para establecer un diagnóstico defi nitivo de fi ebre tifoidea y se utilizan más a menudo en zonas de escasos recursos en el mundo donde no es fácil llevar a cabo los hemocultivos.
- 22. Epidemiología Las heces de las personas que tienen una enfermedad asintomática no sospechada o que son portadoras constituyen una fuente más importante de contaminación que los casos clínicos declarados que rápidamente se aíslan, por ejemplo, cuando los portadores que trabajan manejando alimentos “eliminan” los microorganismos. Muchos animales, como el ganado vacuno, los roedores y las aves de corral, tienen una infección natural con diversas salmonelas y tienen las bacterias en sus tejidos (carne), excreta o huevos. Se le ha dado mucha publicidad a la gran frecuencia de salmonelas en los pollos que se preparan en el comercio. La frecuencia de fiebre tifoidea ha disminuido, pero la de otras infecciones por Salmonella ha aumentado notablemente en Estados Unidos. El problema probablemente es agravado por el uso generalizado de alimentos de animales que contienen antimicrobianos que favorecen la proliferación de las salmonelas resistentes a los fármacos y su transmisión potencial al ser humano. A. Portadores Después de la infección manifi esta o asintomática, algunas personas siguen albergando salmonelas en sus tejidos por periodos variables (portadores convalecientes o portadores permanentes sanos). De las personas que sobreviven a la fi ebre tifoidea 3% se vuelven portadores permanentes y albergan los microorganismos en la vesícula biliar, las vías biliares o, pocas veces, el intestino o las vías urinarias. B. Fuentes de infección Las fuentes de infección son alimento y bebidas que están contaminados con salmonelas. Las siguientes fuentes son importantes: 1. Agua. La contaminación con heces a menudo produce epidemias explosivas. 2. Leche y otros productos lácteos (helado de crema, queso, mostaza). La contaminación con las heces y la pasteurización inadecuada o el manejo inadecuado. Algunos brotes epidémicos son rastreables a la fuente de suministro.
- 23. 3. Mariscos. Por el agua contaminada. 4. Huevos desecados o congelados. De pollos infectados o contaminados durante el procesamiento. 5. Carnes y sus derivados. De animales infectados (pollo) o contaminación con heces por roedores o seres humanos 6. Drogas “recreativas”. Mariguana y otras drogas. 7. Colorantes de animales. Colorantes (p. ej., carmín) que se utilizan en fármacos, alimentos y cosméticos. 8. Mascotas domésticas. Tortugas, perros, gatos, etcétera. Prevención y control Se deben poner en práctica medidas sanitarias para prevenir la contaminación de los alimentos y el agua por los roedores u otros animales que excretan salmonelas. Se debe cocer minuciosamente pollo, carnes y huevos infectados. No se debe permitir a los portadores que trabajen manejando alimentos y deben observar precauciones higiénicas estrictas. Actualmente se dispone de dos vacunas contra la tifoidea en Estados Unidos: una vacuna de microorganismos vivos atenuados que se administra por vía oral y una vacuna de polisacárido capsular Vi para uso intramuscular. Se recomienda la vacunación en viajeros a zonas endémicas, sobre todo si el viajero visita zonas rurales o pequeños poblados donde son escasas las opciones de alimento. Las dos vacunas tienen una efi cacia de 50 a 80%. El tiempo necesario para la vacunación primaria y los límites de edad para cada vacuna varía y las personas deben consultar la página WEB de los DCD u obtener asesoría de una clínica para viajeros en relación con la última información disponible sobre vacunas REFRENCIAS BIBLIOGRAFIA:
- 24. • MICROBIOLOGIA MEDICA. PATRCK R. MURRAY. EDITORIAL ELSERVIER. 5º EDICION • MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA MEDICA. A. PUMAROLA. EDITORIAL MASSON. SEGUNDA EDICION.1987. • MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA MEDICAS. DR. JORGE TAY ZAVALA. MENDEZ EDITORES. TERCERA EDICION. 2003. • http://microbiiologia.files.wordpress.com/2013/04/salmonella-sp.jpg • http://microbiiologia.files.wordpress.com/2013/04/ciclo-de-vida-de-salmonella.jpg