Toxi 5

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 1
UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
PROFESOR: BQF. Carlos García MSc.
ALUMNO: Katerine Torres
CURSO: 5to Paralelo: “A”
GRUPO: N° 1
FECHA DE ELABORACIÓN DE LA PRÁCTICA: Lunes 23 de Junio del 2014
FECHA DE PRESENTACIÓN DE LA PRÁCTICA: Lunes 30 de Junio del 2014
PRÁCTICA N° 5
TÍTULO DE LA PRÁCTICA: INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO
ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN: Cobayo
VOLUMEN ADMINISTRADO: 10 ml
VÍA DE ADMINISTRACIÓN: Vía Intraperitonial
HORA DE ADMINISTRACIÓN: 8: 34 am
TIEMPO DE MUERTE: 28 min
SÍNTOMAS:  Respiración agitada
 Depresión del SNC
 Convulsiones
 Hipoxia
 Perdida de actividad motora
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA
1. Observar la reacción que presenta el cobayo ante la Intoxicación por Cloroformo
2. Observar atentamente las manifestaciones que presenta el cobayo ante la
Intoxicación por Cloroformo
3. Controlar el tiempo en que actúa el cloroformo en el cobayo
4. Conocer mediante pruebas de identificación la presencia de cloroformo

MATERIALES SUSTANCIAS
 Jeringuilla de 10cc
 Campana
 Equipo de disección
 Vaso de precipitación
 Erlenmeyer
 Equipo de destilación.
 Tubos de ensayo
 Pipetas
 Agitador
 Ácido tartárico
 Cloruro de fenilhidrazina
 Nitroprusiato de sodio
 Ácido sulfúrico
 Cloruro férrico
 Hidróxido de Sodio
 Acido Clorhídrico
 Ferricianuro de potasio
 Hidróxido de potasio al 12%
 Ácido cromotròpico
 Guantes de látex
 Mascarilla
 Mandil
 Perlas de vidrio
 Probeta
 Espátula
 Panema
EQUIPOS
 Balanza Analítica
 Tapón de vidrio y de caucho
 Cinta
 Pinzas para tubos
PROCEDIMIENTO
1. Desinfectar el área de trabajo y tener todos los materiales listos en la mesa de
trabajo
2. Aplicar todas las normas de bioseguridad antes de iniciar la práctica
3. Administrar 10ml de Cloroformo al cobayo por vía intraperitoneal
4. Colocar el cobayo en la panema
5. Observar las manifestaciones que se presentan y en qué tiempo se dan hasta su
muerte.
6. Con la ayuda del bisturí procedemos a realizar la disección al cobayo
7. Colocar las vísceras una vez trituradas (picadas lo más finas posibles) en un
recipiente adecuado (balón volumétrico).
8. Pesar 2 gr de ácido tartárico y diluirlo en 50 ml de Agua destilada
9. Colocar la solución de acido tartárico sobre la muestra para acidularla
10. Recoger el destilado de las vísceras en un elermeyer
11. Realizar las reacciones de identificación

REACCIONES DE RECONOCIMIENTO
REACCIONES EN MEDIO BIOLÓGICO
El material de la investigación se somete a destilación con arrastre de vapor en medio
acido tartárico, y en el destilado se realiza las reacciones de identificación.
1. En el fondo de un tubo de ensayo se mezclan unas cuantas gotas de cloroformo
con otras tantas de alcohol de 95° que contiene un poco de nitrato de plata, se
inflama la mezcla y se observa que esta arde con un llama bordeada de verde y
que el ácido clorhídrico formado reacciona con el nitrato de plata disuelto
originando un precipitado de cloruro de plata.
2. Reacción de Dumas.- al adicionar unas gotas de destilado que contiene
cloroformo a unos mililitros de potasa alcohólica (proporción 1:10), se originan
formiatos y cloruro de potasio.
CHCl3 + 4 KOH  ClK + HCO2K + H 2 O
Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones a una porción se le
agrega percloruro de hierro produciendo un color rojo en frío o un precipitado
en caliente.
A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose un
precipitado de cloruro de plata que se disuelve en amoníaco diluido.
3. Reacción de Lustgarten.- al calentar la muestra con unos miligramos de beta
naftol y solución alcohólica concentrada de potasa (preferentemente un trozo
de potasa y algunas gotas de alcohol), se obtiene un franco color azul.
Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo más o menos oscuro;
con resorcinol la coloración e roja – violáceo y con la piridina rojo.
4. Reacción de fujiwara.-En un tubo de ensayo, se vierte 2 ml de lejía de sosa 1:2
con una capa de 2mm de piridina y luego la muestra que contiene el
cloroformo; se agitan, podemos por unos instantes en baño de María y se deja en
reposo; se convierte en una materia coloreada que varía del rosa al rojo vivo,
soluble en piridina .Esta reacción sensible para unos pocos microgramos de
cloroformo y es aplicable en la orina de algún sujeto que haya absorbido de 15-
20 g de agua clorofórmica.
5. Reacción de roseboom.- se disuelve un pequeño cristal de yodo en la solución
muestra y se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de piperacina ; si el
cloroformo está presente en la muestra, la coloración violeta inicial cambia a
amarilla rojiza al disolverse el alcaloide.
6. Reacción de Benedict.- si la solución muestra contiene cloroformo, reduce el
reactivo de Benedict, y de acuerdo a la concentración del tóxico puede
producirse una gama de colores que van desde el verde, amarillo, naranja o rojo
ladrillo.

GRÁFICOS
1.- Administrar la sustancia 2.- Colocar el cobayo en 3.- Colocar al cobayo en
tóxica por vía intraperitonial la panema y observar lugar de disección y pro-
sus manifestaciones ceder a rasurarlo
4.- Proceder a realizar la 5.- Recoger las vísceras 6.- Triturar las vísceras
disección del cobayo del cobayo y colocarlas en un balón
de Aforado
7.- Armar el equipo de destilación 8.- Una vez recogido el 9.- Precipitado de AgCl
destilado, realizar las rea-
cciones de identificación

10.- Reacción de Dumas 11.- Reacción con Lustgarten 12.- Reacc. Roseboom
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO
 Precipitado de AgCl
Solución Problema
(Antes)
Positivo – Característico ( AgCl)
 Reacción de Dumas
Solución Problema
(Antes)
Positivo – Característico
(Rojo en Frío y Caliente)

 Reacción de Lustgarten
Solución Problema
(Antes)
(Rojo, Amarillo y Azul)
 Reacción de Roseboom
Solución Problema
(Antes)
(Amarillo Rojizo)
OBSERVACIONES
 Se necesito solo los 10ml de cloroformo para producir el deceso del cobayo,
 Al administrar el cloroformo por vía intraperitoneal el cobayo presentó
convulsiones, movimientos descoordinados, hipoxia.
 El tiempo en que se produjo el deseo del cobayo fue de 28 min
CONCLUSIONES
La reacción que presento el cobayo ante la intoxicación de cloroformo fue
movimientos descoordinados, convulsiones, hipoxia y su muerte se produjo después de
un tiempo de 28 minutos, con lo que se concluye que el cloroformo es una sustancia
muy tóxica, y con la ayuda de las reacciones de reconocimiento se pudo comprobar la
presencia de cloroformo en estos medios biológicos teniendo en cuenta que las

reacciones de reconocimiento de cloroformo son indispensables para la verificación de
una intoxicación y muerte por este tóxico.
RECOMENDACIONES
 Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, guantes,
mascarilla.
 Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio.
 Utilizar pipetas específicas para cada reactivo.
 Preparar correctamente las sustancias a la concentración requerida
 Para una mayor eficacia en los resultados de la práctica realizar
correctamente la administración del tóxico al animal a experimentar.
CUESTIONARIO
1. DESCRIBA LA COMPOSICIÓN QUÍMICA DEL CLOROFORMO
C: 10.05 %; H: 0.84 % y Cl: 89.10 %.
2. ¿QUÉ ES EL CLOROFORMO?
El cloroformo es un líquido incoloro de aroma agradable no irritante y de sabor
ligeramente dulce. Se enciende espontáneamente cuando alcanza temperaturas
muy altas
3. ¿QUÉ SINTOMAS SE PUEDEN DAR POR LA INHALACIÓN CON
CLOROFORMO?
Actúa como un anestésico relativamente potente. Irrita las vías respiratorias y
causa efectos en el sistema nervioso, incluyendo dolor de cabeza, somnolencia,
mareos. La exposición a altas concentraciones puede producir pérdida del
conocimiento e incluso la muerte. Puede causar daño hepático y desórdenes
sanguíneos. La exposición prolongada puede llevar a la muerte debido a una
frecuencia cardíaca irregular y desórdenes renales y hepáticos.
4. ¿CUÁL ES EL TIPO DE INFLAMABILIDAD DEL CLOROFORMO?
La inflamabilidad que presenta es leve peligro de incendio cuando se expone a
altas temperaturas, de lo contrario, prácticamente no es inflamable.
5. ¿HABITUALMENTE DONDE SE APLICA EL CLOROFORMO?
El cloroformo es empleado habitualmente
en tintorerías como disolvente de grasas en la limpieza a
seco, extintores de incendios, fabricación de colorantes, fumigantes, insecticidas
GLOSARIO
SOMNIFÉRO
Que da sueño

ESCOPOLAMINA
También conocida como burundanga, es un alcaloide tropánico
CARCINOGÉNICO
Sustancia que puede producir cáncer.
CAS
Servicio de Resúmenes de Sustancias Químicas.
MICROGRAMO (UG)
La millonésima parte de un gramo.
PPM
Parte por millón
WEBGRAFÍA
ATSDR. Cloroformo. September 1997. EE.UU. Disponible en:
http://www2.udec.cl/matpel/toxfaq_espanol/CLOROFORMO.pdf
PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERINA. Ficha de Datos de Seguridad. Cloroformo
(CHCl3). Cali, Colombia. Disponible en: http://portales.puj.edu.co/doc-quimica/fds-
labqca-dianahermith/CHCl3.pdf
Machala 30 de Junio del 2014
FIRMA DE RESPONSADILIDAD
________________
Katerine Torres

ANEXOS:

INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO
GENERALIDADES
El cloroformo es el triclorometano (CHCl3). Inicialmente se empleó como agente
anestésico, pero poco después se abandonó este uso por s gran toxicidad hepática y
renal.es un líquido incoloro y no inflamable, de olor y sabor dulzón, extremadamente
volátil y muy liposoluble.
FUENTES DE EXPOSICIÓN
Está disponible como disolvente en laboratorios y en la industria química.se ha
prohibido su uso como sustancia aromática en pastas de dientes y otros productos como
resultado de su efecto carcinogénico en animales después de exposiciones crónicas. La
intoxicación aguda y crónica puede ocurrir por exposición a sus vapores.
TOXICOCINETICA Y MECANISMO DE ACCIÓN
El cloroformo es un anestésico potente y origina una profunda depresión del
SNC. Entra en el organismo por vía respiratoria, digestivo dérmico. En humanos puede
producir la muerte con la ingestión oral de tan solo 10 ml .exposiciones prolongadas o
repetidas a los vapores pueden producir hepatotoxicidad, severa que se característica por
necrosis centrolobular. Asimismo se ha descrito degeneración grasa del hígado, el riñón
el corazón. El mecanismo de lesión parece ser la oxidación a nivel hepático del
cloroformo a fosgeno a través del sistema microsomal. También se forma fosgeno
cuando los vapores de cloroformo se exponen al calor de una llama. El fosgeno inhalado
se convierte en ácido hidroclorhídrico y dióxido de carbono cuando reacciona con el
agua en el alvéolo; y el ácido produce edema pulmonar.
CUADRO CLÍNICO
La severidad de los síntomas por exposición aguda, vía respiratoria, digestivo, dérmica,
está en relación directa con la dosis absorbida. El cloroformo, cuando se inhala, produce
todos los niveles de anestesia, teniendo un margen de seguridad muy estrecho, debido a
que causa fallo cardiaco y respiratorio de forma casi simultánea. No puede detectarse
por el olfato hasta que su concentración excede de 400 ppm. Una exposición durante 10
minutos a concentraciones de 1000 ppm produce síntomas generales como náuseas,
vómitos, vértigo cefaleas .exposiciones a una concentración de 1000 a 4000 ppm
origina desorientación y concentraciones de 10000 a 20000 ppm dan lugar a pérdida de
conciencia, pudiendo originar la muerte.
Dependiendo de la dosis absorbida va a producir alteraciones más o menos
importantes de la función hepática, renal y cardiaca.
El cloroformo, por su acusado poder como disolvente de grasas, en contacto con la
piel da lugar a dermatitis local, y en los ojos produce irritación corneal.
REACCIONES EN MEDIO BIOLÓGICO
El material de la investigación se somete a destilación con arrastre de vapor en medio
acido tartárico, y en el destilado se realiza las reacciones de identificación.
En el fondo de un tubo de ensayo se mezclan unas cuantas gotas de cloroformo con
otras tantas de alcohol de 95ª que contiene un poco de nitrato de plata, se inflama la
mezcla y se observa que esta arde con un llama bordeada de verde y que el ácido
clorhídrico formado reacciona con el nitrato de plata disuelto originando un precipitado
de cloruro de plata.

Reacción de Dumas.- al adicionar unas gotas de destilado que contiene cloroformo a
unos mililitros de potasa alcohólica (proporción 1:10), se originan formiatos y cloruro
de potasio.
CHCl3 + 4 KOH ----- ClK + HCO2K + H 2 O
Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones a una porción se le agrega
percloruro de hierro produciendo un color rojo en frío o un precipitado en caliente.
A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose un
precipitado de cloruro de plata que se disuelve en amoníaco diluido.
Reacción de Lustgarten.- al calentar la muestra con unos miligramos de beta naftol y
solución alcohólica concentrada de potasa (preferentemente un trozo de potasa y
algunas gotas de alcohol), se obtiene un franco color azul.
Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo mas o menos oscuro; con
resorcinol la coloración e roja – violáceo y con la piridina rojo.
Reacción de fujiwara.-En un tubo de ensayo, se vierte 2 ml de lejía de sosa 1:2 con una
capa de 2mm de piridina y luego la muestra que contiene el cloroformo; se agitan,
podemos por unos instantes en baño de María y se deja en reposo; se convierte en una
materia coloreada que varía del rosa al rojo vivo, soluble en piridina .Esta reacción
sensible para unos pocos microgramos de cloroformo y es aplicable en la orina de algún
sujeto que haya absorbido de 15-20 g de agua clorofórmica.
Reacción de roseboom.- se disuelve un pequeño cristal de yodo en la solución muestra
y se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de piperacina ; si el cloroformo está
presente en la muestra, la coloración violeta inicial cambia a amarilla rojiza al
disolverse el alcaloide.
Reacción de Benedict.- si la solución muestra contiene cloroformo, reduce el reactivo
de Benedict, y de acuerdo a la concentración del tóxico puede producirse una gama de
colores que van desde el verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo.
EFECTOS POTENCIALES DE SALUD
Inhalación: Actúa como anestésico relativamente potente. Irrita el tracto respiratorio
produce efectos en el sistema nervioso central, incluyendo dolor de cabeza,
somnolencia, mareos. La exposición a altas concentraciones puede resultar en
inconsciencia e inclusive muerte. Puede causar daño hepático y desórdenes sanguíneos.
La exposición prolongada puede llevar a la muerte debida una frecuencia cardíaca
irregular y desórdenes renales y hepáticos.
Ingestión: Causa quemaduras severas de boca y garganta, dolor pectoral y vómitos.
Grandes cantidades pueden causar síntomas similares a los de la inhalación.
Contacto con la Piel: Causa irritación cutánea causando enrojecimiento y dolor.
Elimina los aceites naturales. Puede ser absorbido a través de la piel.
Contacto con los Ojos: Los vapores causan dolor e irritación ocular. Las salpicaduras
pueden causar severa irritación y posible daño ocular.
Exposición Crónica: La exposición prolongada o repetida a los vapores puede causar
daño al sistema nervioso central, corazón, hígado y riñones. El contacto con el líquido

elimina las grasas y puede causar irritación crónica de la piel con grietas y resequedad y
la correspondiente dermatitis. Se sospecha que el cloroformo es un carcinógeno en
humanos.
Estabilidad y reactividad
Estabilidad: Establo bajo condiciones ordinarias del uso y del almacenaje. el pH
disminuye en la exposición prolongada a la luz y al aire debido a la formación de HCl.
Productos peligrosos de la descomposición: Monóxido de carbono del producto de
mayo, bióxido de carbono, cloruro de hidrógeno y fosgeno cuando está calentado a la
descomposición.
Polimerización peligrosa: No ocurrirá.
Manejo
Guarde en un envase resistente a la luz, cerrado herméticamente y almacene en un
área fresca, seca y bien ventilada. Proteja contra los daños físicos. Aísle de las
substancias incompatibles. Use equipo de protección especial para realizar el
mantenimiento o donde las exposiciones pueden exceder los niveles de exposición
establecidos. Lávese las manos, la cara, los antebrazos y el cuello al salir de las áreas
restringidas. Dese un baño de regadera, deseche la ropa exterior, cámbiese la ropa
vistiendo ropa limpia al terminar el día.
Evite la contaminación cruzada de las ropas de calle. Lávese las manos antes de comer y
no coma, ni beba, ni fume en el trabajo. Los envases de este material pueden ser
peligrosos cuando están vacíos ya que retienen residuos del producto (vapores, líquido);
observe todas las advertencias y precauciones que se alistan para el producto. Umbral de
olor del cloroformo: 250 mg/m3. El umbral de olor sólo sirve como advertencia de la
exposición; si no siente el olor, no significa que usted no está siendo expuesto.
Desechos:
En pequeñas cantidades puede dejarse evaporar en una campana extractora. En caso
de grandes cantidades, debe mezclarse con combustible, como queroseno, e incinerarse
en equipo especializado para evitar la generación de fosgeno.
ALMACENAMIENTO:
Los recipientes que contienen este producto deben ser almacenados en lugares alejados
de la luz directa del sol, ya que se descompone lentamente a productos como el fosgeno.

INFORMACIÓN TOXICOLÓGICA
DATO TOXICOLÓGICOS:
Chloroform: LD50 oral en ratas: 908 mg/kg; LD50 piel de conejos: > 20 gm/kg; LC50
inhalación en ratas: 47702 mg/m3/4H; irritación data: piel de conejos 10 mg/24H
abierta leve; Ojo de conejos: 20 mg/24H moderada; Ha sido investigado como
tumorígeno, mutagénico y causante de efectos reproductivos.
Se han observado defectos al nacimiento en ratas y ratones expuestos a la inhalación
de cloroformo a concentraciones en el aire mayores de 100 ppm. La ingestión de
cloroformo por animales de laboratorio gestantes, ha causado feto toxicidad pero no
defectos al nacimiento y sólo a niveles que causan severos efectos en la madre.
INFORMACIÓN ECOLÓGICA
Esta sustancia puede ser peligrosa para el ambiente; debería prestarse atención especial
al agua.
· Ecotoxicidad
Algas (Chlamydomonas reinhardii) EC50 = 13,3 mg/l (72 horas)
Crustáceos (Artemia salina) EC50 = 68 mg/l (10 horas)
Peces (Brachydanio rerio) LC50 = 100 mg/l (48 horas)
· Movilidad
Coeficiente de reparto octanol/agua como log Pow: 1,97
BIBLIOGRAFÍA:
· http://www.quimica.unam.mx/IMG/pdf/7cloroformo.pdf
· http://www.dorwil.com.ar/msds/Cloroformo.pdf
· https://www.murciasalud.es/recursos/ficheros/137913-CLOROFORMO.pdf

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