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101108 PG malaria et parasites sanguins bvlt 2010.ppt

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jean taty MINTA BIBINA

Le document fournit des instructions détaillées sur le diagnostic de la malaria à travers diverses méthodes, telles que la microscopie et des tests de détection d'antigènes et de matériel génétique. Il décrit également les caractéristiques des différentes espèces de parasites responsables du paludisme ainsi que les indications cliniques et les seuils de gravité. Des recommandations de prélèvements sanguins et des précautions lors de l'analyse sont également incluses.

Santé & Médecine
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Le diagnostic de laboratoire de Le diagnostic de laboratoire de la Malaria la Malaria et des parasites sanguins et des parasites sanguins Formation continue ABTL-ITG 2010 Formation continue ABTL-ITG 2010
LA MALARIA LA MALARIA
Diagnostic Diagnostic du paludisme : du paludisme : 1. 1. [Diagnostic clinique…] [Diagnostic clinique…] 2. 2. Détection des parasites (microscopie). Détection des parasites (microscopie). 3. 3. Détection des antigènes parasitaires. Détection des antigènes parasitaires. 4. 4. Détection de matériel génétique (ADN ou ARN) Détection de matériel génétique (ADN ou ARN) parasitaire (PCR). parasitaire (PCR). 5. 5. Détection d’anticorps dirigés contre le parasite. Détection d’anticorps dirigés contre le parasite. 6. 6. Détection d’une infection par les automates Détection d’une infection par les automates hématologiques hématologiques
Malaria, microscopie et voyageur but : Malaria, microscopie et voyageur but : • Malaria OUI/NON ? Malaria OUI/NON ? • Espèce ? Espèce ? • Densité parasitaire ? Densité parasitaire ? • Stades parasitaires / présence de pigment ? Stades parasitaires / présence de pigment ?
Quand prélever ? Quand prélever ? • Dès la suspicion clinique Dès la suspicion clinique • Ne pas attendre le pic de fièvre Ne pas attendre le pic de fièvre
Quel prélèvement ? Quel prélèvement ? • Pas de différence entre sang veineux ou capillaire Pas de différence entre sang veineux ou capillaire • Sang sans anticoagulant préférable mais: Sang sans anticoagulant préférable mais: – Risque d’accident Risque d’accident – Pas de back-up Pas de back-up – Pas d’autres tests possibles Pas d’autres tests possibles • Sang prélevé sur EDTA: Sang prélevé sur EDTA: – Adhérence moins bonne de la goutte épaisse Adhérence moins bonne de la goutte épaisse – Changement morphologique si > 1 heure en tube Changement morphologique si > 1 heure en tube  EDTA: Alternative opérationnelle EDTA: Alternative opérationnelle
Détection microscopique des parasites Détection microscopique des parasites • [QBC]. [QBC]. • Coloration de Giemsa sur goutte épaisse (GE) Coloration de Giemsa sur goutte épaisse (GE) ou frottis sanguins [pH 8; Giemsa 3,5 %; 20 ou frottis sanguins [pH 8; Giemsa 3,5 %; 20 min.] min.]
Coloration de GIEMSA Coloration de GIEMSA hémolyse [pour les échantillons non fixés] et coloration hémolyse [pour les échantillons non fixés] et coloration Éosine Éosine (acide) (acide)   colore les éléments colore les éléments basiques basiques. . Bleu de méthylène Bleu de méthylène (basique) (basique)   colore les éléments colore les éléments acides acides. . Azur Azur (basique) (basique)   colore les éléments colore les éléments acides acides. .  Dilution extemporanée du colorant. Dilution extemporanée du colorant.  Influence du pH. Influence du pH. ! Coloration individuelle, rinçage prudent !
GE GE si + si +   FROTTIS FROTTIS • GE : GE : • FROTTIS FROTTIS • Mise en évidence des Mise en évidence des parasites. parasites. • Quantification (parasitémie/µl Quantification (parasitémie/µl de sang). de sang). • Pré différentiation des Pré différentiation des espèces. espèces. • Différentiation des Différentiation des espèces. espèces. • Quantification (% GR Quantification (% GR parasités). parasités). ¿ ¿ ou ou FROTTIS FROTTIS si négatif si négatif   GE ? GE ?
P. falciparum P. falciparum (caractéristiques en frottis sanguin) (caractéristiques en frottis sanguin) • Hématies parasitées de taille normale. Hématies parasitées de taille normale. • Normalement pas de schizontes dans Normalement pas de schizontes dans le sang périphérique, excepté en cas le sang périphérique, excepté en cas d'infection grave. d'infection grave. • Trophozoïtes fins, en forme de Trophozoïtes fins, en forme de bagues; formes accolées; image bagues; formes accolées; image uniforme, polyparasitisme. uniforme, polyparasitisme. • Gamétocytes en forme de bananes; Gamétocytes en forme de bananes; une quinzaine de jours après une quinzaine de jours après l'invasion initiale des hématies. l'invasion initiale des hématies. • Taches de Maurer possible (pH=8). Taches de Maurer possible (pH=8). • Fortes parasitémies possibles pouvant Fortes parasitémies possibles pouvant atteindre plus de 50 %. atteindre plus de 50 %.
P. vivax P. vivax (caractéristiques en frottis sanguin) (caractéristiques en frottis sanguin) • Hématies parasitées agrandies et Hématies parasitées agrandies et déformées. déformées. • Tous les stades évolutifs sont Tous les stades évolutifs sont possibles. possibles. • Forme amiboïde typique pour les Forme amiboïde typique pour les trophozoïtes âgés. trophozoïtes âgés. • Schizontes mûrs à 16 noyaux ou Schizontes mûrs à 16 noyaux ou plus. plus. • Granulations de Schüffner fines, Granulations de Schüffner fines, mais absentes chez les formes mais absentes chez les formes jeunes. jeunes. • Parasitémie n'excédant pas 4%. Parasitémie n'excédant pas 4%.
P. ovale P. ovale (caractéristiques en frottis sanguin) (caractéristiques en frottis sanguin) • Hématies parasitées variables en Hématies parasitées variables en volume; déformées. volume; déformées. • Tous les stades évolutifs sont Tous les stades évolutifs sont possibles. possibles. • Parasites moyennement compacts. Parasites moyennement compacts. • Schizontes mûrs à 8 noyaux en Schizontes mûrs à 8 noyaux en moyenne, n'occupant pas toute moyenne, n'occupant pas toute l'hématie. l'hématie. • Granulations de Schüffner Granulations de Schüffner évidentes. évidentes. • Parasitémie n'excédant pas 4%. Parasitémie n'excédant pas 4%.
P. malariae P. malariae (caractéristiques en frottis sanguin) (caractéristiques en frottis sanguin) • Hématies parasitées de taille normales Hématies parasitées de taille normales ou réduites. ou réduites. • Tous les stades évolutifs sont Tous les stades évolutifs sont possibles. possibles. • Forme en bande typique pour les Forme en bande typique pour les trophozoïtes (rare). trophozoïtes (rare). • Schizontes mûrs à 6 - 12 noyaux, Schizontes mûrs à 6 - 12 noyaux, situées à la périphérie du parasite avec situées à la périphérie du parasite avec pigment rassemblé au centre. pigment rassemblé au centre. • Les parasites sont petits, compacts, Les parasites sont petits, compacts, foncés foncés • Pigment précoce. Pigment précoce. • Parasitémie n'excédant jamais 1 Parasitémie n'excédant jamais 1%. %.
P. knowlesi P. knowlesi (caractéristiques en frottis sanguin) (caractéristiques en frottis sanguin) • Hématies parasitées de taille Hématies parasitées de taille normales ou réduites. normales ou réduites. • Tous les stades évolutifs sont Tous les stades évolutifs sont possibles. possibles. • Trophozoites jeunes= Trophozoites jeunes= P. falciparum P. falciparum, , Trophozoites mûrs et autres stades Trophozoites mûrs et autres stades (Schizontes et Gamétocytes= (Schizontes et Gamétocytes=P. P. malariae. malariae. • Schizontes mûrs à 6 - 12 noyaux, Schizontes mûrs à 6 - 12 noyaux, situées à la périphérie du parasite situées à la périphérie du parasite avec pigment rassemblé au centre. avec pigment rassemblé au centre. • Pigment précoce. Pigment précoce. • Très hautes parasitémies possibles Très hautes parasitémies possibles (50%) (50%). . Source: The primate malaria. Coatinez 1971
Source: The primate malaria. Coatinez 1971
Malaria, microscopie et voyageur but : Malaria, microscopie et voyageur but : • Malaria OUI/NON ? Malaria OUI/NON ? • Espèce ? Espèce ? • Densité parasitaire ? Densité parasitaire ? • Stades parasitaires / présence de pigment ? Stades parasitaires / présence de pigment ?
Malaria, microscopie et voyageur but : Malaria, microscopie et voyageur but : • Malaria: Malaria: OUI OUI  Confirmation : envoyez au laboratoire de référence Confirmation : envoyez au laboratoire de référence https://www.iph.fgov.be/epidemio/epifr/plabfr/F_Plasmodium.pdf • Malaria: Malaria: NON NON et suspicion clinique ! et suspicion clinique !  Répétez après 8-12 heures (jusqu’à 4x en 36 heures pour Répétez après 8-12 heures (jusqu’à 4x en 36 heures pour exclure malaria). exclure malaria).  Doutes : envoyez au laboratoire de référence Doutes : envoyez au laboratoire de référence https://www.iph.fgov.be/epidemio/epifr/plabfr/F_Plasmodium.pdf  Pensez autres pathologies… Pensez autres pathologies…
Malaria, microscopie et voyageur but : Malaria, microscopie et voyageur but : • Espèce ? Espèce ? – P. falciparum P. falciparum mortelle mortelle résistance résistance – P. vivax P. vivax/ /ovale ovale élimination hypnozoïtes élimination hypnozoïtes complication graves ( complication graves (P. vivax P. vivax) ) – [ [P. knowlesi P. knowlesi mortelle ?] mortelle ?]  Confirmation/doutes : envoyez au laboratoire de référence Confirmation/doutes : envoyez au laboratoire de référence https://www.iph.fgov.be/epidemio/epifr/plabfr/F_Plasmodium.pdf
Répartition des espèces Répartition des espèces Répartition des espèces pour les cas de paludisme diagnostiqués en Belgique en 2008 (n=146) 75,3 % 12,3 % 6,8 % 3,4 % 2,1 % P. falciparum P. vivax P. ovale P. malariae infections mixtes Source: Wetenschappelijk Instituut Volksgezondheid, Afdeling Epidemiologie http://www.iph.fgov.be/epidemio/epinl/plabnl/plabannl/08_011n_v.pdf
Malaria, microscopie et voyageur but : Malaria, microscopie et voyageur but : • Densité parasitaire ? Densité parasitaire ? – Signes de gravité. Signes de gravité. – Hospitalisation recommandée si parasitémie > 2% Hospitalisation recommandée si parasitémie > 2% – Suivi du traitement (réduction de minimum ¼ de la Suivi du traitement (réduction de minimum ¼ de la parasitémie après 48 heures de traitement). parasitémie après 48 heures de traitement).
QUANTIFICATION EN GE QUANTIFICATION EN GE • Négative si aucun parasite n’est Négative si aucun parasite n’est retrouvé dans 100 champs retrouvé dans 100 champs microscopiques microscopiques (objectif 50 x ou 100 x). (objectif 50 x ou 100 x). • Comptage des formes asexuées Comptage des formes asexuées rencontrées par +/- 200 leucocytes rencontrées par +/- 200 leucocytes (gamétocytes comptés séparément). (gamétocytes comptés séparément). Nombre de parasites asexués comptés -------------------------------------------------------- x Numération leucocytaire = Nombre de Parasites/µl de sang Nombre de leucocytes comptés
QUANTIFICATION EN GE QUANTIFICATION EN GE 1-9 parasites asexués / 100 champs = + 1-9 parasites asexués / 100 champs = + 1-9 parasites asexués / 10 champs = ++ 1-9 parasites asexués / 10 champs = ++ 1-9 parasites asexués / 1 champs = +++ 1-9 parasites asexués / 1 champs = +++ >10 parasites asexués / 1 champs = ++++ >10 parasites asexués / 1 champs = ++++
QUANTIFICATION EN FROTTIS QUANTIFICATION EN FROTTIS • Comptage du nombre de globules rouges Comptage du nombre de globules rouges parasités par des formes parasités par des formes asexuées asexuées du du parasite sur au moins 25 champs parasite sur au moins 25 champs microscopiques à l’objectif 100 x (50 x). microscopiques à l’objectif 100 x (50 x). Détermination préliminaire du nombre Détermination préliminaire du nombre moyen d’érythrocytes présents par champs moyen d’érythrocytes présents par champs microscopique 100 x (ou 50 x). microscopique 100 x (ou 50 x). Nombre d’érythrocytes infectés -------------------------------------------------------- x 100 = % d’hématies parasitées Nombre d’érythrocytes observés
QUANTIFICATION QUANTIFICATION 50.000/µl = 1% des GR 100/µl = 0.002% des GR
Malaria, microscopie et voyageur but : Malaria, microscopie et voyageur but : • Stades parasitaires Stades parasitaires – P. vivax P. vivax, , P. ovale P. ovale, , P. malariae P. malariae, [ , [P. knowlesi P. knowlesi]: T+S+G ]: T+S+G – P. falciparum P. falciparum: only Trophozoïtes : only Trophozoïtes Gametocytes après 14 jours Gametocytes après 14 jours Schizontes: signe de gravité Schizontes: signe de gravité • présence de pigment ? présence de pigment ? – P. malariae P. malariae: normal : normal – P. falciparum P. falciparum: signe de gravité : signe de gravité
PALUDISME GRAVE ( PALUDISME GRAVE (P. falciparum P. falciparum) ) (examen parasitologique) (examen parasitologique) • Hyper parasitémie Hyper parasitémie ( (  2 % 2 % pour des sujets non-immuns, pour des sujets non-immuns, > 5 % en zone endémique), > 5 % en zone endémique), • Présence de Présence de schizontes schizontes dans le sang circulant, dans le sang circulant, • Prédominance de Prédominance de trophozoïtes matures trophozoïtes matures (pigment malarien présent (pigment malarien présent dans plus de 20 % des dans plus de 20 % des trophozoïtes), trophozoïtes), • Hémozoïne Hémozoïne phagocytée phagocytée dans les globules blancs dans les globules blancs (Polynucléaires neutrophiles (Polynucléaires neutrophiles et/ou monocytes). et/ou monocytes).
PALUDISME GRAVE ( PALUDISME GRAVE (P. falciparum P. falciparum ) ) (autres examens) (autres examens) Points d’attention lors de l’examen hématologique : Points d’attention lors de l’examen hématologique : • Thrombocytopénie Thrombocytopénie (< 20.000/µl) (< 20.000/µl) • Anémie sévère Anémie sévère < 5 g/100 ml < 5 g/100 ml • Leucocytose Leucocytose (> 12.000/µl) (> 12.000/µl) Points d’attention lors des autres examens biologiques : Points d’attention lors des autres examens biologiques : • Acidose Acidose (pH < 7.35, bicarbonate <15 mmol/l, lactate veineux > 5 mmol/l ) (pH < 7.35, bicarbonate <15 mmol/l, lactate veineux > 5 mmol/l ) • Hypoglycémie Hypoglycémie (< 2,2 mmol/l ou < 40 g/100 ml) (< 2,2 mmol/l ou < 40 g/100 ml) • Lactémie Lactémie plasmatique plasmatique (> 5 mmol/l) (> 5 mmol/l) • Anémie sévère normocytaire Anémie sévère normocytaire (<5 g/100 ml) (<5 g/100 ml) • Insuffisance rénale Insuffisance rénale (créatininémie > 265 µmol/l ou > 3,0 mg/100 ml, diurèse < (créatininémie > 265 µmol/l ou > 3,0 mg/100 ml, diurèse < 400 ml/24heures après réhydratation [12 ml/kg/24 heures pour les enfants]) 400 ml/24heures après réhydratation [12 ml/kg/24 heures pour les enfants]) • Ictère Ictère (bilirubine > 50 µmol/l ou > 3 mg/100 ml) (bilirubine > 50 µmol/l ou > 3 mg/100 ml) • Hémoglobinurie Hémoglobinurie • [ [Hémostase suggestive d’une Hémostase suggestive d’une coagulation intra-vasculaire disséminée] coagulation intra-vasculaire disséminée]
GE et Frottis colorés au GE et Frottis colorés au Giemsa Giemsa AVANTAGES AVANTAGES • Équipement et réactifs simples. Équipement et réactifs simples. • Sensible : < 5-10 parasites/µl (100 Sensible : < 5-10 parasites/µl (100 parasites/µl ?). parasites/µl ?). • Différentiation des espèces. Différentiation des espèces. • Quantification. Quantification. • Différentiation de parasitémies Différentiation de parasitémies actives (asexuées)/ non actives actives (asexuées)/ non actives (sexuées). (sexuées). • Identification de signes de gravité. Identification de signes de gravité. • Détermination des infections mixtes. Détermination des infections mixtes. • Evaluation possible de l’efficacité du Evaluation possible de l’efficacité du traitement. traitement.   Golden standard Golden standard INCONVENIENTS INCONVENIENTS • Microscope nécessaire. Microscope nécessaire. • > 60 minutes avant un résultat. > 60 minutes avant un résultat. • Nécessite une expertise. Nécessite une expertise. • Subjectif, (mais moins le frottis Subjectif, (mais moins le frottis que la goutte épaisse). que la goutte épaisse). • Coûteuse en personnel. Coûteuse en personnel. • Nuits et Week-end ? Nuits et Week-end ? + Détection et identification possible + Détection et identification possible des babésioses, des microfilaires, des des babésioses, des microfilaires, des trypanosomiases et des fièvres trypanosomiases et des fièvres récurrentes. récurrentes.
AUTRES PARASITES SANGUINS AUTRES PARASITES SANGUINS SPOROZOAIRES SPOROZOAIRES
Babesia Babesia spp. spp.
Babesia Babesia spp. spp. Dimensions : Dimensions : Variable, de 1 à 5 µm. Variable, de 1 à 5 µm. Localisation : Localisation : De 1 à 4 trophozoïtes par De 1 à 4 trophozoïtes par globule rouge (extracellulaire) globule rouge (extracellulaire) Forme : Forme : Rond, ovoïde, piriforme. Rond, ovoïde, piriforme. Cytoplasme : Cytoplasme : Coloré en bleu, sans pigment. Coloré en bleu, sans pigment. Noyau : Noyau : 1 petit noyau rouge (puis 1 petit noyau rouge (puis 2, 3 et 4 noyaux) 2, 3 et 4 noyaux) Caractéristiques : Caractéristiques : Multiplication par bourgeonnement qui Multiplication par bourgeonnement qui restent accolés par leurs extrémités restent accolés par leurs extrémités pointues, donnant une image en trèfle à pointues, donnant une image en trèfle à 2,3 ou 4 feuilles 2,3 ou 4 feuilles (croix de Malte) (croix de Malte). . Jamais de pigment. Jamais de pigment.
AUTRES PARASITES SANGUINS AUTRES PARASITES SANGUINS NEMATODES NEMATODES
• Caractéristiques générales microfilaires Caractéristiques générales microfilaires
Identification basée sur : Identification basée sur : • Diamètre (fine/épaisse) Diamètre (fine/épaisse) • Noyaux (individualisés/ non individualisés, jusqu’au Noyaux (individualisés/ non individualisés, jusqu’au bout de la queue,…) bout de la queue,…) • Espace céphalique (court/long) Espace céphalique (court/long) • Queue (pointue/arrondie, remplie/vide) Queue (pointue/arrondie, remplie/vide) • Caractéristiques (gaine, hernies,...) Caractéristiques (gaine, hernies,...) Espace céphalique Queue gaine
Détection microscopique des Détection microscopique des nématodes nématodes sanguins sanguins • Coloration de Giemsa sur goutte épaisse (GE) Coloration de Giemsa sur goutte épaisse (GE) ou frottis sanguins [pH 8; Giemsa 3,5 %; 20 ou frottis sanguins [pH 8; Giemsa 3,5 %; 20 min.] min.] Dans l’idéal, on Double tout : Concentration Giemsa : 7 % Temps de coloration: 40 min.
Wuchereria bancrofti
Wuchereria bancrofti Dimensions : 240 à 300 µm. Diamètre : 7.5 – 10 µm. Gaine : Oui, mais très rarement colorée en rose au Giemsa. Queue : Effilée, pointue, sans noyaux, souvent repliée. Tête : Courte : Aussi longue que large. Caractéristiques : Noyaux bien individualisés, petits, sauf premiers et derniers noyaux très ovoïdes, queue pointue et vide.
Brugia spp.
Brugia malayi Brugia malayi Dimensions : 175 à 230 µm. Diamètre : 5 – 6 µm. Gaine : Oui, souvent (sauf sub- périodiques) colorée en rose au Giemsa (fines ponctuations). Queue : Effilée, souvent repliée, avant dernier et dernier noyaux très espacés. Tête : Longue : 2 x plus longue que large. Caractéristiques : Souvent fort repliée dans la préparation (sauf en Knott).
Brugia timori Brugia timori Dimensions : 265 à 325 µm. Diamètre : 4.4 – 6.8 µm. Gaine : Oui, (non colorée au Giemsa). Queue : Effilée, souvent repliée, avant dernier et dernier noyaux très espacés. Tête : Très longue : (2) 3 x plus longue que large. Caractéristiques : Souvent fort repliée dans la préparation (sauf Knott). Sur 1/3 du corps, noyaux peu colorés donnant une impression de « vide ».
Loa Loa Loa Loa
Loa Loa Loa Loa Dimensions : 230 à 250 µm. Diamètre : 5 – 7 µm. Gaine : Oui, mais non colorée au Giemsa Queue : Effilée et arrondie, avec noyaux jusqu’à l’extrémité. Tête : Courte (Aussi longue que large). Caractéristiques : Présence de 2 hernies parfois rosâtres, presque toujours visibles, noyaux ovoïdes jusqu’à l’extrémité.
Mansonella perstans Mansonella perstans
Mansonella perstans Mansonella perstans Dimensions : 150 à 200 µm. Diamètre : 3 – 5 µm. Gaine : Non. Queue : Arrondie, noyaux jusqu’à l’extrémité. Tête : Très courte : Moins longue que large. Caractéristiques : Noyaux angulaires, maximum 4 noyaux en file indienne à l’extrémité caudale. Dernier noyau plus gros ou plus foncé.
Mansonella ozzardi Mansonella ozzardi
Mansonella ozzardi Mansonella ozzardi Dimensions : 160 à 205 µm. Diamètre : 3 – 5 µm. Gaine : Non. Queue : Effilée, pointue, sans noyaux (parfois peu ou pas bien visible). Tête : Très courte : Moins longue que large. Caractéristiques : Queue vide, noyaux en mosaïques.
Mansonella streptocerca Mansonella streptocerca
Mansonella streptocerca Mansonella streptocerca Dimensions : 180 à 240 µm. Diamètre : 5 – 6 µm. Gaine : Non. Queue : Arrondie, noyaux jusqu’à l’extrémité. Tête : Très courte : Moins longue que large. Caractéristiques : Minimum 8 noyaux en file indienne à l’extrémité caudale. La queue est presque toujours recourbée en « crosse d’évêque ».
Onchocerca volvulus Onchocerca volvulus
Onchocerca volvulus Onchocerca volvulus Dimensions : 280 à 320 µm. Diamètre : 5 – 9 µm. Gaine : Non Queue : Effilée, pointue, sans noyaux, souvent recourbée. Tête : Longue : Plus longue que large (2/1). Caractéristiques : Noyaux ovoïdes peu visibles individuellement ou rarement bien visibles, premiers et derniers noyaux presque toujours visibles et ovoïdes, queue pointue et vide.
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AUTRES PARASITES SANGUINS AUTRES PARASITES SANGUINS FLAGELLES FLAGELLES
Trypanosoma brucei Trypanosoma brucei gambiense / rhodesiense gambiense / rhodesiense
Trypanosoma brucei gambiense Trypanosoma brucei gambiense Trypanosoma brucei rhodesiense Trypanosoma brucei rhodesiense Dimensions : 15–25 µm. Cytoplasme : Fusiforme, avec un flagelle et une membrane ondulante (bleuté). Contenu : Noyau assez gros, souvent central et petit kinétoplaste (rougeâtre). Caractéristiques : Membrane ondulante partant du petit kinétoplaste (sub-terminal) et se terminant par le flagelle.
Trypanosoma cruzi
Trypanosoma cruzi Dimensions : 15–25 µm. Cytoplasme : Fusiforme, avec un flagelle et une membrane ondulante (bleuté). Contenu : Noyau assez gros, souvent central et gros kinétoplaste (rougeâtre). Caractéristiques : Souvent en forme de C, U [ou S]. Membrane ondulante partant du gros kinétoplaste (sub-terminal) et se terminant par le flagelle. Attention : Ne se retrouve dans les sang sous cette forme presque exclusivement durant la phase aigue de la maladie de Chagas
Trypanosoma rangeli Dimensions : 30–35 µm. Cytoplasme : Fusiforme, avec un flagelle et une membrane ondulante (bleuté). Contenu : Noyau assez gros, souvent central et petit kinétoplaste (rougeâtre). Caractéristiques : Membrane ondulante partant du gros kinétoplaste (sub-terminal) et se terminant par le flagelle.
ET UN AUTRE ET UN AUTRE « PATHOGENE » SANGUIN : « PATHOGENE » SANGUIN : Une BACTERIE, Une BACTERIE, parfois retrouvée en GE parfois retrouvée en GE
Borrelia duttoni Borrelia duttoni Borrelia recurrentis Borrelia recurrentis Fine et longue bactérie 10 – 20 µm x 0,5 µm Hélicoïdale, Colorée en Bleu (au Giemsa) Très mobile (examen à frais)

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  • 1. Le diagnostic de laboratoire de Le diagnostic de laboratoire de la Malaria la Malaria et des parasites sanguins et des parasites sanguins Formation continue ABTL-ITG 2010 Formation continue ABTL-ITG 2010
  • 3. Diagnostic Diagnostic du paludisme : du paludisme : 1. 1. [Diagnostic clinique…] [Diagnostic clinique…] 2. 2. Détection des parasites (microscopie). Détection des parasites (microscopie). 3. 3. Détection des antigènes parasitaires. Détection des antigènes parasitaires. 4. 4. Détection de matériel génétique (ADN ou ARN) Détection de matériel génétique (ADN ou ARN) parasitaire (PCR). parasitaire (PCR). 5. 5. Détection d’anticorps dirigés contre le parasite. Détection d’anticorps dirigés contre le parasite. 6. 6. Détection d’une infection par les automates Détection d’une infection par les automates hématologiques hématologiques
  • 4. Malaria, microscopie et voyageur but : Malaria, microscopie et voyageur but : • Malaria OUI/NON ? Malaria OUI/NON ? • Espèce ? Espèce ? • Densité parasitaire ? Densité parasitaire ? • Stades parasitaires / présence de pigment ? Stades parasitaires / présence de pigment ?
  • 5. Quand prélever ? Quand prélever ? • Dès la suspicion clinique Dès la suspicion clinique • Ne pas attendre le pic de fièvre Ne pas attendre le pic de fièvre
  • 6. Quel prélèvement ? Quel prélèvement ? • Pas de différence entre sang veineux ou capillaire Pas de différence entre sang veineux ou capillaire • Sang sans anticoagulant préférable mais: Sang sans anticoagulant préférable mais: – Risque d’accident Risque d’accident – Pas de back-up Pas de back-up – Pas d’autres tests possibles Pas d’autres tests possibles • Sang prélevé sur EDTA: Sang prélevé sur EDTA: – Adhérence moins bonne de la goutte épaisse Adhérence moins bonne de la goutte épaisse – Changement morphologique si > 1 heure en tube Changement morphologique si > 1 heure en tube  EDTA: Alternative opérationnelle EDTA: Alternative opérationnelle
  • 7. Détection microscopique des parasites Détection microscopique des parasites • [QBC]. [QBC]. • Coloration de Giemsa sur goutte épaisse (GE) Coloration de Giemsa sur goutte épaisse (GE) ou frottis sanguins [pH 8; Giemsa 3,5 %; 20 ou frottis sanguins [pH 8; Giemsa 3,5 %; 20 min.] min.]
  • 8. Coloration de GIEMSA Coloration de GIEMSA hémolyse [pour les échantillons non fixés] et coloration hémolyse [pour les échantillons non fixés] et coloration Éosine Éosine (acide) (acide)   colore les éléments colore les éléments basiques basiques. . Bleu de méthylène Bleu de méthylène (basique) (basique)   colore les éléments colore les éléments acides acides. . Azur Azur (basique) (basique)   colore les éléments colore les éléments acides acides. .  Dilution extemporanée du colorant. Dilution extemporanée du colorant.  Influence du pH. Influence du pH. ! Coloration individuelle, rinçage prudent !
  • 9. GE GE si + si +   FROTTIS FROTTIS • GE : GE : • FROTTIS FROTTIS • Mise en évidence des Mise en évidence des parasites. parasites. • Quantification (parasitémie/µl Quantification (parasitémie/µl de sang). de sang). • Pré différentiation des Pré différentiation des espèces. espèces. • Différentiation des Différentiation des espèces. espèces. • Quantification (% GR Quantification (% GR parasités). parasités). ¿ ¿ ou ou FROTTIS FROTTIS si négatif si négatif   GE ? GE ?
  • 10. P. falciparum P. falciparum (caractéristiques en frottis sanguin) (caractéristiques en frottis sanguin) • Hématies parasitées de taille normale. Hématies parasitées de taille normale. • Normalement pas de schizontes dans Normalement pas de schizontes dans le sang périphérique, excepté en cas le sang périphérique, excepté en cas d'infection grave. d'infection grave. • Trophozoïtes fins, en forme de Trophozoïtes fins, en forme de bagues; formes accolées; image bagues; formes accolées; image uniforme, polyparasitisme. uniforme, polyparasitisme. • Gamétocytes en forme de bananes; Gamétocytes en forme de bananes; une quinzaine de jours après une quinzaine de jours après l'invasion initiale des hématies. l'invasion initiale des hématies. • Taches de Maurer possible (pH=8). Taches de Maurer possible (pH=8). • Fortes parasitémies possibles pouvant Fortes parasitémies possibles pouvant atteindre plus de 50 %. atteindre plus de 50 %.
  • 11. P. vivax P. vivax (caractéristiques en frottis sanguin) (caractéristiques en frottis sanguin) • Hématies parasitées agrandies et Hématies parasitées agrandies et déformées. déformées. • Tous les stades évolutifs sont Tous les stades évolutifs sont possibles. possibles. • Forme amiboïde typique pour les Forme amiboïde typique pour les trophozoïtes âgés. trophozoïtes âgés. • Schizontes mûrs à 16 noyaux ou Schizontes mûrs à 16 noyaux ou plus. plus. • Granulations de Schüffner fines, Granulations de Schüffner fines, mais absentes chez les formes mais absentes chez les formes jeunes. jeunes. • Parasitémie n'excédant pas 4%. Parasitémie n'excédant pas 4%.
  • 12. P. ovale P. ovale (caractéristiques en frottis sanguin) (caractéristiques en frottis sanguin) • Hématies parasitées variables en Hématies parasitées variables en volume; déformées. volume; déformées. • Tous les stades évolutifs sont Tous les stades évolutifs sont possibles. possibles. • Parasites moyennement compacts. Parasites moyennement compacts. • Schizontes mûrs à 8 noyaux en Schizontes mûrs à 8 noyaux en moyenne, n'occupant pas toute moyenne, n'occupant pas toute l'hématie. l'hématie. • Granulations de Schüffner Granulations de Schüffner évidentes. évidentes. • Parasitémie n'excédant pas 4%. Parasitémie n'excédant pas 4%.
  • 13. P. malariae P. malariae (caractéristiques en frottis sanguin) (caractéristiques en frottis sanguin) • Hématies parasitées de taille normales Hématies parasitées de taille normales ou réduites. ou réduites. • Tous les stades évolutifs sont Tous les stades évolutifs sont possibles. possibles. • Forme en bande typique pour les Forme en bande typique pour les trophozoïtes (rare). trophozoïtes (rare). • Schizontes mûrs à 6 - 12 noyaux, Schizontes mûrs à 6 - 12 noyaux, situées à la périphérie du parasite avec situées à la périphérie du parasite avec pigment rassemblé au centre. pigment rassemblé au centre. • Les parasites sont petits, compacts, Les parasites sont petits, compacts, foncés foncés • Pigment précoce. Pigment précoce. • Parasitémie n'excédant jamais 1 Parasitémie n'excédant jamais 1%. %.
  • 14. P. knowlesi P. knowlesi (caractéristiques en frottis sanguin) (caractéristiques en frottis sanguin) • Hématies parasitées de taille Hématies parasitées de taille normales ou réduites. normales ou réduites. • Tous les stades évolutifs sont Tous les stades évolutifs sont possibles. possibles. • Trophozoites jeunes= Trophozoites jeunes= P. falciparum P. falciparum, , Trophozoites mûrs et autres stades Trophozoites mûrs et autres stades (Schizontes et Gamétocytes= (Schizontes et Gamétocytes=P. P. malariae. malariae. • Schizontes mûrs à 6 - 12 noyaux, Schizontes mûrs à 6 - 12 noyaux, situées à la périphérie du parasite situées à la périphérie du parasite avec pigment rassemblé au centre. avec pigment rassemblé au centre. • Pigment précoce. Pigment précoce. • Très hautes parasitémies possibles Très hautes parasitémies possibles (50%) (50%). . Source: The primate malaria. Coatinez 1971
  • 15. Source: The primate malaria. Coatinez 1971
  • 16. Malaria, microscopie et voyageur but : Malaria, microscopie et voyageur but : • Malaria OUI/NON ? Malaria OUI/NON ? • Espèce ? Espèce ? • Densité parasitaire ? Densité parasitaire ? • Stades parasitaires / présence de pigment ? Stades parasitaires / présence de pigment ?
  • 17. Malaria, microscopie et voyageur but : Malaria, microscopie et voyageur but : • Malaria: Malaria: OUI OUI  Confirmation : envoyez au laboratoire de référence Confirmation : envoyez au laboratoire de référence https://www.iph.fgov.be/epidemio/epifr/plabfr/F_Plasmodium.pdf • Malaria: Malaria: NON NON et suspicion clinique ! et suspicion clinique !  Répétez après 8-12 heures (jusqu’à 4x en 36 heures pour Répétez après 8-12 heures (jusqu’à 4x en 36 heures pour exclure malaria). exclure malaria).  Doutes : envoyez au laboratoire de référence Doutes : envoyez au laboratoire de référence https://www.iph.fgov.be/epidemio/epifr/plabfr/F_Plasmodium.pdf  Pensez autres pathologies… Pensez autres pathologies…
  • 18. Malaria, microscopie et voyageur but : Malaria, microscopie et voyageur but : • Espèce ? Espèce ? – P. falciparum P. falciparum mortelle mortelle résistance résistance – P. vivax P. vivax/ /ovale ovale élimination hypnozoïtes élimination hypnozoïtes complication graves ( complication graves (P. vivax P. vivax) ) – [ [P. knowlesi P. knowlesi mortelle ?] mortelle ?]  Confirmation/doutes : envoyez au laboratoire de référence Confirmation/doutes : envoyez au laboratoire de référence https://www.iph.fgov.be/epidemio/epifr/plabfr/F_Plasmodium.pdf
  • 19. Répartition des espèces Répartition des espèces Répartition des espèces pour les cas de paludisme diagnostiqués en Belgique en 2008 (n=146) 75,3 % 12,3 % 6,8 % 3,4 % 2,1 % P. falciparum P. vivax P. ovale P. malariae infections mixtes Source: Wetenschappelijk Instituut Volksgezondheid, Afdeling Epidemiologie http://www.iph.fgov.be/epidemio/epinl/plabnl/plabannl/08_011n_v.pdf
  • 20. Malaria, microscopie et voyageur but : Malaria, microscopie et voyageur but : • Densité parasitaire ? Densité parasitaire ? – Signes de gravité. Signes de gravité. – Hospitalisation recommandée si parasitémie > 2% Hospitalisation recommandée si parasitémie > 2% – Suivi du traitement (réduction de minimum ¼ de la Suivi du traitement (réduction de minimum ¼ de la parasitémie après 48 heures de traitement). parasitémie après 48 heures de traitement).
  • 21. QUANTIFICATION EN GE QUANTIFICATION EN GE • Négative si aucun parasite n’est Négative si aucun parasite n’est retrouvé dans 100 champs retrouvé dans 100 champs microscopiques microscopiques (objectif 50 x ou 100 x). (objectif 50 x ou 100 x). • Comptage des formes asexuées Comptage des formes asexuées rencontrées par +/- 200 leucocytes rencontrées par +/- 200 leucocytes (gamétocytes comptés séparément). (gamétocytes comptés séparément). Nombre de parasites asexués comptés -------------------------------------------------------- x Numération leucocytaire = Nombre de Parasites/µl de sang Nombre de leucocytes comptés
  • 22. QUANTIFICATION EN GE QUANTIFICATION EN GE 1-9 parasites asexués / 100 champs = + 1-9 parasites asexués / 100 champs = + 1-9 parasites asexués / 10 champs = ++ 1-9 parasites asexués / 10 champs = ++ 1-9 parasites asexués / 1 champs = +++ 1-9 parasites asexués / 1 champs = +++ >10 parasites asexués / 1 champs = ++++ >10 parasites asexués / 1 champs = ++++
  • 23. QUANTIFICATION EN FROTTIS QUANTIFICATION EN FROTTIS • Comptage du nombre de globules rouges Comptage du nombre de globules rouges parasités par des formes parasités par des formes asexuées asexuées du du parasite sur au moins 25 champs parasite sur au moins 25 champs microscopiques à l’objectif 100 x (50 x). microscopiques à l’objectif 100 x (50 x). Détermination préliminaire du nombre Détermination préliminaire du nombre moyen d’érythrocytes présents par champs moyen d’érythrocytes présents par champs microscopique 100 x (ou 50 x). microscopique 100 x (ou 50 x). Nombre d’érythrocytes infectés -------------------------------------------------------- x 100 = % d’hématies parasitées Nombre d’érythrocytes observés
  • 24. QUANTIFICATION QUANTIFICATION 50.000/µl = 1% des GR 100/µl = 0.002% des GR
  • 25. Malaria, microscopie et voyageur but : Malaria, microscopie et voyageur but : • Stades parasitaires Stades parasitaires – P. vivax P. vivax, , P. ovale P. ovale, , P. malariae P. malariae, [ , [P. knowlesi P. knowlesi]: T+S+G ]: T+S+G – P. falciparum P. falciparum: only Trophozoïtes : only Trophozoïtes Gametocytes après 14 jours Gametocytes après 14 jours Schizontes: signe de gravité Schizontes: signe de gravité • présence de pigment ? présence de pigment ? – P. malariae P. malariae: normal : normal – P. falciparum P. falciparum: signe de gravité : signe de gravité
  • 26. PALUDISME GRAVE ( PALUDISME GRAVE (P. falciparum P. falciparum) ) (examen parasitologique) (examen parasitologique) • Hyper parasitémie Hyper parasitémie ( (  2 % 2 % pour des sujets non-immuns, pour des sujets non-immuns, > 5 % en zone endémique), > 5 % en zone endémique), • Présence de Présence de schizontes schizontes dans le sang circulant, dans le sang circulant, • Prédominance de Prédominance de trophozoïtes matures trophozoïtes matures (pigment malarien présent (pigment malarien présent dans plus de 20 % des dans plus de 20 % des trophozoïtes), trophozoïtes), • Hémozoïne Hémozoïne phagocytée phagocytée dans les globules blancs dans les globules blancs (Polynucléaires neutrophiles (Polynucléaires neutrophiles et/ou monocytes). et/ou monocytes).
  • 27. PALUDISME GRAVE ( PALUDISME GRAVE (P. falciparum P. falciparum ) ) (autres examens) (autres examens) Points d’attention lors de l’examen hématologique : Points d’attention lors de l’examen hématologique : • Thrombocytopénie Thrombocytopénie (< 20.000/µl) (< 20.000/µl) • Anémie sévère Anémie sévère < 5 g/100 ml < 5 g/100 ml • Leucocytose Leucocytose (> 12.000/µl) (> 12.000/µl) Points d’attention lors des autres examens biologiques : Points d’attention lors des autres examens biologiques : • Acidose Acidose (pH < 7.35, bicarbonate <15 mmol/l, lactate veineux > 5 mmol/l ) (pH < 7.35, bicarbonate <15 mmol/l, lactate veineux > 5 mmol/l ) • Hypoglycémie Hypoglycémie (< 2,2 mmol/l ou < 40 g/100 ml) (< 2,2 mmol/l ou < 40 g/100 ml) • Lactémie Lactémie plasmatique plasmatique (> 5 mmol/l) (> 5 mmol/l) • Anémie sévère normocytaire Anémie sévère normocytaire (<5 g/100 ml) (<5 g/100 ml) • Insuffisance rénale Insuffisance rénale (créatininémie > 265 µmol/l ou > 3,0 mg/100 ml, diurèse < (créatininémie > 265 µmol/l ou > 3,0 mg/100 ml, diurèse < 400 ml/24heures après réhydratation [12 ml/kg/24 heures pour les enfants]) 400 ml/24heures après réhydratation [12 ml/kg/24 heures pour les enfants]) • Ictère Ictère (bilirubine > 50 µmol/l ou > 3 mg/100 ml) (bilirubine > 50 µmol/l ou > 3 mg/100 ml) • Hémoglobinurie Hémoglobinurie • [ [Hémostase suggestive d’une Hémostase suggestive d’une coagulation intra-vasculaire disséminée] coagulation intra-vasculaire disséminée]
  • 28. GE et Frottis colorés au GE et Frottis colorés au Giemsa Giemsa AVANTAGES AVANTAGES • Équipement et réactifs simples. Équipement et réactifs simples. • Sensible : < 5-10 parasites/µl (100 Sensible : < 5-10 parasites/µl (100 parasites/µl ?). parasites/µl ?). • Différentiation des espèces. Différentiation des espèces. • Quantification. Quantification. • Différentiation de parasitémies Différentiation de parasitémies actives (asexuées)/ non actives actives (asexuées)/ non actives (sexuées). (sexuées). • Identification de signes de gravité. Identification de signes de gravité. • Détermination des infections mixtes. Détermination des infections mixtes. • Evaluation possible de l’efficacité du Evaluation possible de l’efficacité du traitement. traitement.   Golden standard Golden standard INCONVENIENTS INCONVENIENTS • Microscope nécessaire. Microscope nécessaire. • > 60 minutes avant un résultat. > 60 minutes avant un résultat. • Nécessite une expertise. Nécessite une expertise. • Subjectif, (mais moins le frottis Subjectif, (mais moins le frottis que la goutte épaisse). que la goutte épaisse). • Coûteuse en personnel. Coûteuse en personnel. • Nuits et Week-end ? Nuits et Week-end ? + Détection et identification possible + Détection et identification possible des babésioses, des microfilaires, des des babésioses, des microfilaires, des trypanosomiases et des fièvres trypanosomiases et des fièvres récurrentes. récurrentes.
  • 29. AUTRES PARASITES SANGUINS AUTRES PARASITES SANGUINS SPOROZOAIRES SPOROZOAIRES
  • 31. Babesia Babesia spp. spp. Dimensions : Dimensions : Variable, de 1 à 5 µm. Variable, de 1 à 5 µm. Localisation : Localisation : De 1 à 4 trophozoïtes par De 1 à 4 trophozoïtes par globule rouge (extracellulaire) globule rouge (extracellulaire) Forme : Forme : Rond, ovoïde, piriforme. Rond, ovoïde, piriforme. Cytoplasme : Cytoplasme : Coloré en bleu, sans pigment. Coloré en bleu, sans pigment. Noyau : Noyau : 1 petit noyau rouge (puis 1 petit noyau rouge (puis 2, 3 et 4 noyaux) 2, 3 et 4 noyaux) Caractéristiques : Caractéristiques : Multiplication par bourgeonnement qui Multiplication par bourgeonnement qui restent accolés par leurs extrémités restent accolés par leurs extrémités pointues, donnant une image en trèfle à pointues, donnant une image en trèfle à 2,3 ou 4 feuilles 2,3 ou 4 feuilles (croix de Malte) (croix de Malte). . Jamais de pigment. Jamais de pigment.
  • 32. AUTRES PARASITES SANGUINS AUTRES PARASITES SANGUINS NEMATODES NEMATODES
  • 33. • Caractéristiques générales microfilaires Caractéristiques générales microfilaires
  • 34. Identification basée sur : Identification basée sur : • Diamètre (fine/épaisse) Diamètre (fine/épaisse) • Noyaux (individualisés/ non individualisés, jusqu’au Noyaux (individualisés/ non individualisés, jusqu’au bout de la queue,…) bout de la queue,…) • Espace céphalique (court/long) Espace céphalique (court/long) • Queue (pointue/arrondie, remplie/vide) Queue (pointue/arrondie, remplie/vide) • Caractéristiques (gaine, hernies,...) Caractéristiques (gaine, hernies,...) Espace céphalique Queue gaine
  • 35. Détection microscopique des Détection microscopique des nématodes nématodes sanguins sanguins • Coloration de Giemsa sur goutte épaisse (GE) Coloration de Giemsa sur goutte épaisse (GE) ou frottis sanguins [pH 8; Giemsa 3,5 %; 20 ou frottis sanguins [pH 8; Giemsa 3,5 %; 20 min.] min.] Dans l’idéal, on Double tout : Concentration Giemsa : 7 % Temps de coloration: 40 min.
  • 37. Wuchereria bancrofti Dimensions : 240 à 300 µm. Diamètre : 7.5 – 10 µm. Gaine : Oui, mais très rarement colorée en rose au Giemsa. Queue : Effilée, pointue, sans noyaux, souvent repliée. Tête : Courte : Aussi longue que large. Caractéristiques : Noyaux bien individualisés, petits, sauf premiers et derniers noyaux très ovoïdes, queue pointue et vide.
  • 39. Brugia malayi Brugia malayi Dimensions : 175 à 230 µm. Diamètre : 5 – 6 µm. Gaine : Oui, souvent (sauf sub- périodiques) colorée en rose au Giemsa (fines ponctuations). Queue : Effilée, souvent repliée, avant dernier et dernier noyaux très espacés. Tête : Longue : 2 x plus longue que large. Caractéristiques : Souvent fort repliée dans la préparation (sauf en Knott).
  • 40. Brugia timori Brugia timori Dimensions : 265 à 325 µm. Diamètre : 4.4 – 6.8 µm. Gaine : Oui, (non colorée au Giemsa). Queue : Effilée, souvent repliée, avant dernier et dernier noyaux très espacés. Tête : Très longue : (2) 3 x plus longue que large. Caractéristiques : Souvent fort repliée dans la préparation (sauf Knott). Sur 1/3 du corps, noyaux peu colorés donnant une impression de « vide ».
  • 42. Loa Loa Loa Loa Dimensions : 230 à 250 µm. Diamètre : 5 – 7 µm. Gaine : Oui, mais non colorée au Giemsa Queue : Effilée et arrondie, avec noyaux jusqu’à l’extrémité. Tête : Courte (Aussi longue que large). Caractéristiques : Présence de 2 hernies parfois rosâtres, presque toujours visibles, noyaux ovoïdes jusqu’à l’extrémité.
  • 44. Mansonella perstans Mansonella perstans Dimensions : 150 à 200 µm. Diamètre : 3 – 5 µm. Gaine : Non. Queue : Arrondie, noyaux jusqu’à l’extrémité. Tête : Très courte : Moins longue que large. Caractéristiques : Noyaux angulaires, maximum 4 noyaux en file indienne à l’extrémité caudale. Dernier noyau plus gros ou plus foncé.
  • 46. Mansonella ozzardi Mansonella ozzardi Dimensions : 160 à 205 µm. Diamètre : 3 – 5 µm. Gaine : Non. Queue : Effilée, pointue, sans noyaux (parfois peu ou pas bien visible). Tête : Très courte : Moins longue que large. Caractéristiques : Queue vide, noyaux en mosaïques.
  • 48. Mansonella streptocerca Mansonella streptocerca Dimensions : 180 à 240 µm. Diamètre : 5 – 6 µm. Gaine : Non. Queue : Arrondie, noyaux jusqu’à l’extrémité. Tête : Très courte : Moins longue que large. Caractéristiques : Minimum 8 noyaux en file indienne à l’extrémité caudale. La queue est presque toujours recourbée en « crosse d’évêque ».
  • 50. Onchocerca volvulus Onchocerca volvulus Dimensions : 280 à 320 µm. Diamètre : 5 – 9 µm. Gaine : Non Queue : Effilée, pointue, sans noyaux, souvent recourbée. Tête : Longue : Plus longue que large (2/1). Caractéristiques : Noyaux ovoïdes peu visibles individuellement ou rarement bien visibles, premiers et derniers noyaux presque toujours visibles et ovoïdes, queue pointue et vide.
  • 52. AUTRES PARASITES SANGUINS AUTRES PARASITES SANGUINS FLAGELLES FLAGELLES
  • 53. Trypanosoma brucei Trypanosoma brucei gambiense / rhodesiense gambiense / rhodesiense
  • 54. Trypanosoma brucei gambiense Trypanosoma brucei gambiense Trypanosoma brucei rhodesiense Trypanosoma brucei rhodesiense Dimensions : 15–25 µm. Cytoplasme : Fusiforme, avec un flagelle et une membrane ondulante (bleuté). Contenu : Noyau assez gros, souvent central et petit kinétoplaste (rougeâtre). Caractéristiques : Membrane ondulante partant du petit kinétoplaste (sub-terminal) et se terminant par le flagelle.
  • 56. Trypanosoma cruzi Dimensions : 15–25 µm. Cytoplasme : Fusiforme, avec un flagelle et une membrane ondulante (bleuté). Contenu : Noyau assez gros, souvent central et gros kinétoplaste (rougeâtre). Caractéristiques : Souvent en forme de C, U [ou S]. Membrane ondulante partant du gros kinétoplaste (sub-terminal) et se terminant par le flagelle. Attention : Ne se retrouve dans les sang sous cette forme presque exclusivement durant la phase aigue de la maladie de Chagas
  • 57. Trypanosoma rangeli Dimensions : 30–35 µm. Cytoplasme : Fusiforme, avec un flagelle et une membrane ondulante (bleuté). Contenu : Noyau assez gros, souvent central et petit kinétoplaste (rougeâtre). Caractéristiques : Membrane ondulante partant du gros kinétoplaste (sub-terminal) et se terminant par le flagelle.
  • 58. ET UN AUTRE ET UN AUTRE « PATHOGENE » SANGUIN : « PATHOGENE » SANGUIN : Une BACTERIE, Une BACTERIE, parfois retrouvée en GE parfois retrouvée en GE
  • 59. Borrelia duttoni Borrelia duttoni Borrelia recurrentis Borrelia recurrentis Fine et longue bactérie 10 – 20 µm x 0,5 µm Hélicoïdale, Colorée en Bleu (au Giemsa) Très mobile (examen à frais)