Ac corregido
- 1. ANTICUERPOS
- 11. COMPOSICIÓN QUÍMICA Y CARGA ELECTROSTÁTICA GLUCOPROTEÍNAS CATIÓNICAS (+) g-globulinas b-globulinas Ánodo (+) Cátodo (-) α1 α2 β1 β2 g Albúminas Globulinas INMUNOGLOBULINAS
- 12. Estructura de las Inmunoglobulinas Cadenas pesadas (H) y livianas (L) Puentes disulfuro Región en bisagra Bucles Región Fab y región Fc Regiones constantes y variables de cadenas H y L Regiones hipervariables y sitios de unión de Ag
- 13. Cadenas pesadas (H) Cadenas livianas (L) N terminal C terminal g μ a ε d k l Puentes disulfuro “Bucle” Región en bisagra
- 14. C terminal Fragmentos Fab Papaína Fragmento Fc Hidratos de carbono Fijación del complemento Unión al antígeno H L H N terminal
- 15. H L N terminal C terminal VH VL CL CH1 CH2 CH3 Región VARIABLE Región CONSTANTE Sitio de unión a Ag o PARATOPE Segmentos HIPERVARIABLES
- 16. VARIACIÓN EN LOS DOMINIOS SEGÚN LA CLASE DE Ig Ig G Ig M Ig A Ig D Ig E
- 17. Estructura pentamérica de la Ig M Estructura dimérica de la Ig A Cadena J Cadena J Componente secretor
- 18. Formación de la IgA2
- 20. Estructura del Anticuerpo: • En la región V hay: – 3 CDR: Regiones Determinantes de la Complementariedad. Son hipervariables. – 4 FR: Regiones de armazón o entramado. • El PARATOPE es una porción de las CDR (Regiones Fab). • Las regiones Fc intervienen en la fijación del complemento o la unión a tejidos.
- 23. Linfocitos B • Los Linfocitos B seleccionados se diferencian a: • Células plasmáticas • correceptores CD19/CD21 y CD81 • Células de Memoria • CD40
- 24. Inmunoglobulinas Conc suero Vida media Fijac Comp Placent a Mucosas Alergia s Estruc IgG 13.5 21 1 a 3 + + - - Mono IgM 1.5 10 3+ - - - Pentá mero IgA 3.55 6 - - + - Dímero IgD 0.03 3 - - - - Mono IgE 0.00005 2 - - - + mono
- 25. IgG Fijación de Complemento IgG1 2+ Atraviesa placenta y es una Opsonina IgG2 1+ IgG3 3+ Atraviesa placenta y es una Opsonina IgG4 Negativo Atraviesa placenta
- 26. Clases de Inmunoglobulinas: características gg-bg-bbgMovimiento electroforético 7S8S11S19S7SCoeficiente de sedimentación 180.000200.000360.000900.000180.000 monómeromonómerodímero (monómero) pentámeromonómeroEstructura Ig DIg EIg AIg MIg G PM (Da)
- 27. IgDIgEIgAIgMIgG k-lk-lk-lk-lk-lCadena liviana Bazo G. linfáticos Vías digestivas y respiratorias Vías digestivas y respiratorias Bazo G. linfáticos Méd. ósea Bazo G. linfáticos Méd. ósea Principal lugar de síntesis 13119112,9% Hidratos de Carbono deamgCadena pesada
- 28. RUMIANTES EQUINO PORCINO CARNÍVOROS SUERO Ig G Ig G Ig G CALOSTRO Ig G Ig G Ig G LECHE Ig G Ig A Ig A DISTRIBUCIÓN EN SUERO, CALOSTRO Y LECHE Inmunoglobulinas predominantes
- 29. VALENCIA DE UNIÓN AL ANTÍGENO (cantidad de sitios de unión ) IgG IgM IgA IgE IgD 2 5 (10) 2 ó 4 2 2 UNIÓN a Ag
- 30. Setiembre 2005 RESPUESTA PRIMARIA Y SECUNDARIA
- 31. Setiembre 2005 Principales características respuesta primaria y secundaria Componente Respuesta primaria Respuesta secundaria Células B Tiempo respuesta Duración respuesta Isotipo anticuerpo Afinidad del anticerpo No preactivadas (vírgenes) Generalmente 5-10 días Corta Predominante IgM Baja Memoria Generalmente 1-5 días Largo periodo Predominante IgG Alta
- 32. Producción de Ig en respuesta primaria y secundaria Concentración Ig en suero Total Total 10 15 20 25 / 3 10 15 30 IgG IgG IgM IgMAg Ag Latencia Latencia días
- 33. PRIMARIA SECUNDARIA Latencia Larga Corta Síntesis Ig Lenta Rápida Persistencia AC Baja Alta Ig predominante Ig M Ig G Título máximo AC Bajo Alto Dosis de inmunógeno necesaria Alta Baja
- 34. Funciones efectoras IgG IgM IgA IgE IgD Aglutinación + +++ + - - Precipitación +++ + + + - Fijación de complemento + +++ - - - Neutralización + ++ + - - Opsonización ++ +++ - - - Citotoxicidad Ac dependiente ++ - - + - Inmunidad en mucosas - - ++ - - Traspaso por placenta ++ - - - -
- 35. Célula Plasmática NÚCLEO Cadena H Péptido Adicional Vesícula secretora o de Russell Hemimolécula Carbohidratos Aparato de Golgi Líquido Extracelular R.E.R. Ribosoma Cadena L Síntesis de inmunoglobulinas
- 36. SÍNTESIS DE Ig A secretoria (Ig AS) Luz intestinal Célula plasmática submucosa Ig A dimérica Receptor de Ig polimérica (pIgR) Ig As Componente secretor Enterocito
- 37. Degradación de Ig 21-30 díasVIDA MEDIA 70%Sistema retículoendotelial (S.R.E.) 30%Hepática DEGRADACIÓN
- 38. Clases de anticuerpos: IgG: • Monómero • Dos zonas de unión al antígeno (dos fragmentos Fab) • Cuatro subclases (Ig1, Ig2, Ig3, Ig4) • La Ig más abundante en el plasma (80%). • Bajo Pm Difunde bien a otros líquidos corporales y atraviesa la barrera placentaria.
- 39. Clases de anticuerpos: IgG: • Neutraliza toxinas bacterianas • Activa el complemento • Sensibiliza y agrega microorganismos para estimular su fagocitosis (opsonización). • Activa el complemento. • Es la Ig más importante en la respuesta inmunitaria secundaria (linfocitos B2 de memoria).
- 40. Subclase de IgG nº de puentes S-S concentración en suero (en mg/ml) opsonina s Activación del compleme nto IgG1 2 9 +++ ++ IgG2 4 3 +/- + IgG3 11 1 +++ +++ IgG4 4 0.5 - - http://www.ugr.es/~eianez/inmuno/cap_05.htm Algunos datos sobre las subclases de IgG
- 41. Clases de anticuerpos: IgM • Elevado Pm (“macroglobulina”) • Pentámero de Ig • Los 5 monómeros están unidos por puentes disulfuro y la “proteína j” • 10 fragmentos fab para unión al Ag • Confinada al espacio intravascular • Eficaz en la aglutinación y citolisis de microorganismos • Respuesta inmunitaria primaria: Papel predominante (aparición temprana)
- 42. Clases de anticuerpos: IgA Dos subclases: • IgA1: Monomérica. En plasma (poco abundante). • IgA2: Dimérica. Predominante en secreciones externas (saliva, lagrimal, nasal, leche materna, etc). • Monomeros unidos por puentes disulfuro y proteína j • Tiene otra cadena polipeptídica denominada COMPONENTE SECRETOR (sIgA), producida por las células de las mucosas que la protege de la proteolisis enzimática y facilita su transporte.
- 43. Clases de anticuerpos: IgA • Inhibe la adherencia de los microorganismos a la superficie de las células de las mucosas, por lo que es una primera línea de defensa frente a las infecciones. • También es importante en el procesamiento de los antígenos alimentarios en el intestino.
- 45. Clases de anticuerpos: IgD • Monómero • Poco abundante en plasma • Se encuentra en la superficie de algunos linfocitos B sanguíneos
- 46. Clases de anticuerpos: IgE • Monómero • Baja concentración en plasma. • Se encuentra en la superficie de los mastocitos y los basófilos • Es la mediadora de las reacciones de hipersensibilidad inmediata (alergias). • Confiere protección local frente a ciertos patógenos grandes, como helmintos: sirve para reclutar células plasmáticas a través de una reacción de inflamación aguda. • Está aumentada en infecciones parasitarias.
- 57. UTILIZACIÓN DE ANTICUERPOS EN BIOMEDICINA • Métodos y Técnicas de Estudio en Biología Celular UTILIZACIÓN DE ANTICUERPOS EN BIOMEDICINA
- 58. UTILIZACIÓN DE ANTICUERPOS EN BIOMEDICINA • Inmunoblotting (western blot), Dot/slot blot • Inmunocitoquímica • Inmunofluorescencia • Inmunoprecipitación • ELISA/EIA/RIA • Cromatografía de inmunoafinidad • Microscopia electrónica (morfología) UTILIZACIÓN DE ANTICUERPOS EN BIOMEDICINA
- 59. Estructura de los anticuerpos
- 61. Anticuerpos monoclonales 1. Inmunización del ratón 2. Extracción del bazo 3. Preparación de hibridomas (mieloma+B) 4. Selección de los clones 5. Producción y uso de anticuerpos
- 65. Anticuerpos policlonales 1. Inmunización del conejo 2. Recuerdos 3. Extracción de sangre 4. Preparación del suero 5. Purificación del anticuerpo (métodos opcionales) 6. Caracterización del antisuero