Enterobacterias
- 1. ENTEROBACTERIAS P.Q.C. MIGUEL ANGEL ORTIZ GIL.
- 2. Las Enterobacteriaceae habitan en: Distribuidas en suelo, agua, alimentos. Flora normal del intestino de humanos y animales. Características Generales:
- 3. MORFOLÓGICAS Y TINTORIALES Bacilos o cocobacilos cortos gram negativos, no esporulados, mótiles (flagelos perítricos) o no, capsulados o no, pilis.
- 4. BIOQUÍMICAS Anaerobios facultativos, catalasa positiva, (excepto Shigella dysenteriae Tipo 1) oxidasa negativa, fermentan la glucosa, reducen nitratos a nitritos.
- 5. Reacción de catalasa Esta prueba detecta la presencia de citocromooxidasas La prueba se hace con peróxido de hidrógeno (H2O2) al 3% sobre un portaobjetos. La producción inmediata y abundante de burbujas indica la conversión del H202 en agua y oxígeno gaseoso. L a prueba de la catalasa debe realizarse a partir de un medio que no contenga sangre porque los eritrocitos pueden producir una reacción de catalasa débil.
- 6. P rueba de la catalasa
- 7. R eacción de citocromo oxidasa Los citocromo son hemoproteinas que contienen hierro y actuan como último eslabón de la cadena de la respiración aerobia ; transfireren electrones de Hidrógeno al Oxígeno, con la formación de agua. El sistema citocromo se encuentra presente en microorganismos aerobios, microaerofílicos y en algunos anaerobios facultativos , pero nunca en anaerobios estrictos. Dimetil-p-fenilendiamina al 1%
- 8. Los modos de transmisión a los seres humanos son: Infecciones Nosocomiales ( E. coli ) Ingesta de alimentos o agua. Salmonella, Shigella, Yersinia enterocolitica.
- 9. Enterobacteriaceae Patógenos oportunistas. Patógenos evidentes. Citrobacter. Enterobacter. Klebsiella. Proteus. Serratia Salmonella tiphy – (fiebre tifoidea.) Shigella – (Disentería). Y. Pestis (peste negro).
- 10. MEDIOS DE CULTIVO 1 . Medios no selectivos: agar sangre 2. Medios selectivos-diferenciales : agar McConkey, agar EMB, SS agar, agar XLD. McConkey: colonias rosadas (fermentan lactosa) y colonias transparentes (no fermentan lactosa). Agar EMB: colonias azules (fermentan lactosa) y colonias transparentes (no fermentan lactosa).
- 11. Mac Conkey Gram positivas ven inhibido - sales biliares y cristal violeta. Fermenten la lactosa liberarán productos ácidos que producirán un cambio de pH que se detectará gracias al rojo neutro .
- 13. Aspectos de las colonias. En agar sangre y agar chocolate las colonias son: Grandes. Gris. Lisas. Klebsiella o Enterobacter. Mucoides – (polisacáridos).
- 14. E. Coli – ( Beta hemolítica). P. mirabilis. Motilidad. P. penneri. P. Vulgaris.
- 15. PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN 1. Pruebas bioquímicas 2. Pruebas serológicas 3. Pruebas de biología molecular
- 17. Estudia el metabolismo de la bacteria Estudio basado en la determinación de la presencia o ausencia de diferentes enzimas codificadas por el material genético del cromosoma bacteriano Se detecta a través de medios de cultivo especiales Pruebas bioquímicas
- 18. Los medios de cultivo generalmente están formados por: El sustrato sobre los cuales actúan las enzimas Un indicador que puede detectar la disminución del sustrato o la presencia de un producto metabólico especifico
- 19. La medición de las diferentes características metabólicas de un microorganismo permiten identificar la especie
- 20. Metabolismo fermentativo Mide la capacidad del microorganismo para utilizar los hidratos de carbono Microorganismo actúa sobre los carbohidratos y acidifica el medio El indicador presente vira Pruebas bioquímicas
- 21. PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICAS Prueba TSI (triple azúcar hierro) Contiene lactosa 10 g, sacarosa 10 g y glucosa 1 g. Resultados: Superficie inclinada/fondo: - ácida/ácida: Bacterias fermentadoras de lactosa: E. coli, Klebsiella, Citrobacter, Enterobacter, etc - alcalina/ácida: Bacterias no fermentadoras de lactosa. Salmonella (H2S+), Shigella (H2S -), Yersinia.
- 22. TSI
- 23. TSI
- 25. Mide la capacidad de un organismo para utilizar el citrato como única fuente de carbono Citrato compuesto orgánico constituye uno de los metabolitos del ciclo de Klebs Las bacterias al utilizar citrato extraen nitrógeno de la sal de amonio con producción de amoniaco que hace vire el indicador CITRATO DE SIMMONS
- 26. Para esta prueba se utiliza el agar de citrato de Simmons que contiene citrato de sodio y azul de timol como indicador. La única fuente de carbono en este medio es el citrato. Si la reacción es positiva el indicador vira a azul. En la reacción negativa los microorganismos no crecen y el medio conserva su color verde CITRATO DE SIMMONS
- 27. El medio también contiene sales de amonio que la bacteria usa como fuentes de nitrógeno Fosfato de amonio amoniaco alcalinización del medio CITRATO DE SIMMONS
- 31. Descarboxilasas de aminoácidos (arginina, lisina, ornitina Los medios contienen: Peptona Extracto de carne Glucosa Aminoácido Purpura de bromocresol MEDIO DE LIA
- 32. Descarboxilasas de aminoácidos lisina, ornitina Los aminóacidos al perder el grupo carboxilo se convierten en aminas lo que incrementa el pH del medio y el indicador ( púrpura del bromocresol ) vira a violeta R – CH - NH 2 - COOH R- CH 2 - NH 2 + CO 2 Aminoácido Amina Dióxido de carbono pH alcalino
- 33. Descarboxilaciòn lisina (LIA y MIO) Ejemplo: Aminoácido amina + dióxido de carbono Lisina lisina descarboxilasa cadaverina L- Ornitina Ornitina descarboxilasa Putrescina + CO2
- 37. Prueba que se utiliza para investigar: Motilidad (M) Producción de Indol (I) Descarboxilación Ornitina. INDOL MEDIO DE MIO
- 38. INDOL
- 39. Indol El indol es uno de los productos de degradación metabólica del aminoácido triptofano. Las bacterias que poseen la triptofanasa . La prueba de indol está basada cuando el indol reacciona con el grupo aldehído del p-dimetilaminobenzaldehído .
- 40. Medio de MIO (p-dimetilaminobenzaldehído )
- 43. E. coli
- 44. Escherichia coli . Mac Conkey. Colonias Planas. Colonias secas. Colonias Rosadas. (LF) INDOL (+) k/A Ó A/A K/A LIA TSI
- 45. Escherichia coli Clasificación de las cepas productoras de diarrea E. coli enterotoxigénica E. coli enteropatógena E. coli enterohemorrágica E. coli enteroinvasiva E. coli enteroagregante
- 46. E. coli
- 48. Klebsiella. Mac Conkey LF. Mucoides. (polisacáridos). Indicaciones de laboratorio: Lysine + Citrato + Indol – +/+ TSI (con gas) No-motile Ornithine –
- 51. Proteus
- 52. Proteus. Género que contiene varias especies, de las cuales dos tienen importancia médica: P. mirabais . INDOL (-) P. vulgaris. INDOL (+) Mac Conkey. NFL. Swarning. Olor a podrido.
- 53. Enterobacter
- 54. Enterobacter. Mac Conkey. LF. Pueden ser Mucoides. MIO: *MOVILIDAD (+) *INDOL: (+) E. agglomeras. *INDOL: (-) E. aerogenas (LIA +), E. cloacae (LIA-).
- 55. Enterobacter
- 56. Shigella
- 57. Shigella S. dysenteriae S. flexneri S. sonnei S. boydii
- 58. Shigella Mac Conkey: NLF. TSI: alcalina/ácida, H2S negativo. LIA: K/A o A/A.
- 59. Crecimiento de Shigella en medio MacConkey
- 60. Salmonella
- 61. Salmonella Clasificación S. enteritidis S. typhimurium S. typhi S. paratyphi A S. paratyphi B (Salmonella schottmuelleri) S. typhi C (Salmonella hirschfeldii)
- 62. Salmonella enteritidis Mac Conkey: NFL. TSI: alcalina/ácida y H 2 S + S. typhimurium. INDOL (-)
- 63. SALMONELLA SSA
- 64. Salmonella XLD
- 65. Bibliografía: MANUAL DE TÉCNICAS EN MICROBIOLOGÍA CLÍNICA. M. V. Álvarez, E. Boquet, I. De Fez. AEFA. 1990. DIAGNÓSTICO Y TRATAMIENTO CLÍNICOS POR EL LABORATORIO. John Bernard Henry, Todd-Sanford-Davidsohn. Tomo I y II. 8ª Edición. Salvat Editores. 1988. DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO. TEXTO Y ATLAS COLOR. Koneman, Allen, Dowell, Sommers. Editorial Médica Panamericana. 2ª Reimpresión. 1990.