PRACTICA 1 TOXICO
- 1. UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA “Calidad, Pertinencia y Calidez” D.L. N° 69-04, DE 14 DE ABRIL DE 1969 PROV. DE EL ORO-REP. DEL ECUADOR UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA PRÁCTICA Nº BF.8.01-1 NOMBRE DE LA PRÁCTICA: INTOXICACIÓN POR METANOL DATOS INFORMATIVOS: CARRERA: Bioquímica y Farmacia CICLO/NIVEL: 8vo Semestre “B” FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: 31/Mayo/2017 ESTUDIANTE: Paloma da Silva DOCENTE RESPONSABLE: Bioq. Carlos Alberto García Gonzales, Msc. Animal de Experimentación: Pollo Vía de Administración: Vía Intraperitoneal. Volumen administrado: 10mL de Alcohol Metílico. TIEMPOS: Inicio de la práctica: 7:30 am Hora de disección: 8:00 am Hora Inicio de Destilado: 8:20 am Hora de finalización de Destilado: 8:55 am Hora finalización de la práctica: 10:30 am 1. OBJETIVOS: 1.1. Identificar los síntomas que presenta un pollo tras la intoxicación producida por alcohol metílico para saber cuál es su consecuencia de acuerdo a la dosis que se administre. 1.2.Realizar la determinación de las reacciones de reconocimiento de la presencia de metanol en las vísceras del pollo para saber si este se encuentra presente o no. 2. FUNDAMENTO TEÓRICO: El metanol es utilizado comúnmente como un solvente orgánico industrial, se ha desarrollado su uso como combustible alternativo y se encuentra a la disposición del público en una amplia variedad de productos. La utilización tan expandida de esta sustancia, incrementa la probabilidad de la exposición aguda o crónica al mismo y subraya la importancia de conocer los mecanismos fisiopatológicos responsables de su toxicidad. En la actualidad, son bien conocidos los efectos del envenenamiento por metanol en el sistema nervioso central (SNC) y especialmente en las vías visuales. La ceguera o déficit
- 2. visual severo son posiblemente las secuelas más frecuentes en el hombre. Además, por su acción a nivel de la maquinaria energética mitocondrial, la intoxicación crónica por metanol ha sido utilizada experimentalmente como un modelo de neuropatía óptica. 3. RECURSOS: MATERIALES, EQUIPOS REACTIVOS SUSTANCIAS E INSUMOS 4. INSTRUCCIONES: 4.1 Trabajar con orden, limpieza y sin prisa. 4.2 Mantener las mesas de trabajo limpias y sin productos, libros, cajas o accesorios innecesarios para el trabajo que se esté realizando. 4.3 Llenar ropa adecuada para la realización de la práctica: bata, guantes, mascarilla, gorro, zapatones. Materiales Equipos Sustancias Muestra VIDRIO: Vasos de precipitación -Pipetas -Erlenmeyer -Tubos de ensayo -Probeta -Perlas de vidrio -Agitador -Embudo OTROS -Guantes -Mascarilla -Gorro -Mandil -Aguja hipodérmica 10 mL -Cronómetro -Estuche de disección -Panema -Agitador -Fosforo -Pinzas -Cocineta -Espátula -Gradilla -Aparato de destilación -Balanza -Baño maría -Campana - Cloruro de fenilhidracina -Nitroprusiato sódico -Hidróxido de sodio -HCl -Cloruro de fenil hidracina -Ferricianuro de potasio Ácido - sulfúrico -Leche -Cloruro férrico -Sulfato ferroso -Ácido sulfúrico -Ácido clorhídrico Destilado de vísceras del animal de Experimentación.
- 3. 4.4 Utilizar la campana extractora de gases siempre que sea necesario. 5. PROCEDIMIENTO: 5.1. Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse 5.2. Preparar una solución de formaldehido al 4%. 5.3. Agarrar al animal de experimentación (rata wistar) por sus patas y mediante una aguja hipodérmica administrar 8mL de solución de formaldehido. 5.4. Colocar al animal de experimentación (rata wistar) en la panema y observar los efectos de la intoxicación. 5.5. Luego del deceso, con la ayuda del estuche de disección, abrir el al animal de experimentación (rata wistar) y recolectar sus fluidos y vísceras picadas lo más finas posibles en un vaso de precipitación. 5.6. Verter las vísceras en un balón de destilación y agregar 50 mL ácido tartárico al 4% y perlas de vidrio. 5.7. Destilar, recoger el destilado en NaOH 0.1 N. 5.8. Con aproximadamente 15 mL del destilado recogido (muestra) realizar las reacciones de reconocimientos en medios biológicos. 6. REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN: 6.1 Reacción de Schiff: A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de yodato de potasio al 1% después de mezclar se adiciona unas gotas de ácido sulfúrico puro, se deja reposar por tres minutos la mezcla adquiere un color madera que se decolora totalmente luego de agregarle nuevamente algunas gotas de ácido sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1ml de violeta de genciana, con lo cual se produce un intenso color violeta en caso de positivo. 6.2 Reacción de Rimini A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% recién preparado y 1ml de solución de hidróxido de sodio, se produce una coloración azul intensa. 6.3 Con la Fenilhidracina En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico a una pequeña cantidad de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4 gotas de solución de yoduro de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de hidróxido de sodio al 12% se obtienen una coloración rojo grosella. 6.4 Reacción de Marquis
- 4. Se toma 1ml de destilado y se agregan 5ml de ácido sulfúrico concentrado, se agita luego con una solución sulfúrica de formol (0.2 gr de cloruro de morfina en 10ml de ácido sulfúrico concentrado), se obtiene enseguida o después de algún tiempo un color violeta. 6.5 Reacción de Hehner Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de leche, se estratifica con ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro férrico (5 gotas de cloruro férrico en 500ml de ácido sulfúrico); en caso positivo, en la zona de contacto se produce un color violeta o azul violeta. En esta práctica logramos con éxito nuestro objetivo de determinar las reacciones de reconocimiento del metanol utilizando como muestra a las vísceras del pollo y tenemos como consecuencia los siguientes resultados: En la reacción de Schiff tenemos positivo no característico. En la reacción de Rimini nos dio de positivo característico. En la reacción de Fenilhidracina dio positvo característico. En la reacción de ácido cromotopico tenemos positivo característico. En la reacción de Henner nos dio de positivo no característico. En la reacción de Marquis dio positvo no característico. ANEXOS PREGUNTAS SOBRE EL ARTÍCULO: ¿Cuál es uno de los métodos que se puede utilizar para detener la intoxicación por metanol? La hemodiálisis HD. ¿Cuáles son las indicaciones de la hemodiálisis HD para un caso clínico? Nivel de metanol en sangre >50 mg/dl (no disponible en nuestro medio de forma urgente), acidosis metabólica grave, alteraciones visuales o neurológicas e ingestión >30 ml de metanol. ¿Cuál es la duración de la hemodiálisis HD en caso de intoxicación grave por metanol? 9 horas.
- 5. 8. RESULTADOS OBTENIDOS. Reacción de Schiff: Reacción de Rimini
- 6. Con la Fenilhidracina Reacción de Marquis Con el Ácido Cromotrópico Reacción de Hehner
- 7. BIBLIOGRAFIA: Nefrología (2015). Intoxicaciones por metanol y reacciones. Nefrología, consecuencias de intoxicación por metanol. Recuperado de: http://www.revistanefrologia.com/es- publicacion-nefrologia-articulo-intoxicacion-por-metanol-evolucion-niveles- sanguineos-con-hemodialisis-alto-flujo-X0211699511051081